seminario 6 Flashcards
se ha descrito varios alelos de este gen, sólo 2 son predominantes (gustador fuerte y el no gustador). Estos alelos difieren en 3 nt que dan como resultado
el cambio de aminoácidos en la proteína (cambios en el alelo de la población)
DNA doble hebra (así es posible que haya una interacción de puentes de hidrógeno), debe ser amplificada la
doble hebra
para realizar un pcr se necesita
desoxirribonucleótidos Taq polimerasa (no se desnatura con calor)
1° pcr
predesnaturación llevándolo a 100°C
Se instalan partidores para cada hebra que mantienen el
antiparalelismo
Los partidores tienen la misma secuencia de
la hebra opuesta a la que se encuentra instalada
Se pone un exceso de partidores para evitar
que estas se hebras se vuelvan a pegar
La Taq polimerasa comienza a replicar la hebra hasta que
se desnatura luego de 5000 pares de base
la hebra se vuelve a desnaturar y la taq polimerasa volverá
a correr en una cadena mucho más pequeña
Amplificación in vitro
Existe un banco de secuencias para poder localizar la región que se quiere amplificar
Se utilizaron partidores con 24 y 44 bases
Un partidor de 24 bases es suficiente para que se pegue en la región
Control positivo
corroborar que, si no existe el producto deseado, no es por un defecto de reacción (ya que ya tenemos al control que dio positivo)
se utilizan genes housekeeping o constitutivos
Control negativo
comprobar que no exista contaminación en el mix de reacción. se incluyen todos los componentes de la reacción menos el DNA objetivo
Falsos positivos
resulta la banda, pero en realidad no se tiene realmente (como contaminación)
Falso negativo
no resulta la banda, pero la persona si lo presenta
