Lab 9: coloration de Gram et méthode du KOH

Question 1

À quoi sert la coloration de Gram?

Answer 1

• Cela peut être utile en milieu médical, car permet d”identifier l’agent infectieux, de sa sensibilité aux antibitiques et de sa capacité à sécréter des endotoxines ou exo toxines. On peut déterminer quel type de bactéries il s’agit (Gram + ou -) et de donner le type d’antibiotique pertinent
• Et en industrie alimentaire, elle permet de trouver l’origine de la contamination

Question 2

Comment se passe le processus de coloration de Gram?

Answer 2

1-Traiter le frottis bactérien par une solution de violet de gentiane

• Les Gram + et - sont colorés en violet
  2) Traiter le frottis bactérien avec une solution d’iode:
• complexe VG-iode est formé dans les cellules des Gram + et -, elles demeurent violettes
  3) Soumettre la préparation à l’alcool éthylique:
• les Gram - se décolorent rapidement sous l’action du solvant, car les lipides sont extraits des parois causant le grossissement des pores et la disparition du complexe VG-iode
• Les Gram + conservent leur couleur violette, car les parois cellulaires se déshydratent donc les pores se réduisent diminuant la perméabilité de la paroi et de la membrane donc le complexe VG-iode ne peut sortir des cellules
  4) Traiter les frottis à la safranine:
• Les Gram - deviennent roses, car les cellules prennent le colorant
• les Gram + restent violettes, car les cellules ne sont pas affectées par la safranine