טכנולוגית דנ"א רקומביננטי Flashcards
1
Q
אילו ספריות יש ולמי הן מתאימות?
A
ספרייה גנומית מבוססת על מקטעי דנ”א, מתאים לפרוקריוטים
ספריית cDNA המבוססת על מקטעי mRNA, מתאים לאאוקריוטים שיש להם אינטרונים
2
Q
אילו 5 דרכים יש לסריקת ספריות?
A
- היברידיזציה
- על סמך פעילות ביולוגית (למשל האם המוטנט שורד או לא שורד, או עושה או לא עושה פעילות מסוימת לפי הגן המוטנטי וכך נדע אם הגן תקין)
- נוגדנים לחלבונים ספציפיים (כדי לסרוק באילו תאים החלבונים מתבטאין)
- ביטוי הטרולוגי (לוקחים גן מאורגניזם אחד ומבטאים אותו באורגניזם אחר)
- על סמך פעילות ביוכימית (ביצוע מבחנים אנזימתיים על הפלאקים של הבקטריופאג’ים שהעברנו לניטרוצלולוז)
3
Q
מהן התכונות המולקולריות של אאוקריוטים
A
אאוקריוטים:
- לגן יש אזורי בקרת שיעתוק שיכולים להיות גם מאוד רחוקים מהרצף של הגן
- אזור קריאה מונוציסטרוני
- יש שיוניים אחרי השיעתוק - splicing, polyA’ capping ויציאה מהגרעין
- התרגום מתחיל ב-AUG הראשון אחרי ה-cap
- יש הולו-אנזים של הפולימראז ו-TATA box
4
Q
מהן התכונות המולקולריות של פרוקריוטים
A
- יש גנים פוליציסטרונים (על אופרון)
- אזורי בקרה (פרומוטרים ואופרטורים קרובים לתחילת השיעתוק
- התרגום מתחיל ברצף שיין דלגרנו
- מערכת שיעתוק עם פקטור סיגמא ופולימראז
- השיעתוק והתרגום מתרחשים בו זמנית (כך שהתרגום מהווה בקרה על השיעתוק)
- התרגום מסתיים ביצירת hair pin, הרנ”א מתקפל על עצמו והריבוזום נתקע ונופל.
