Proteínas recombinantes

Question 1

DNA recombinante

Answer 1

Molécula de DNA formada por la unión de dos secuencias de DNA de dos diferentes organismos

Question 2

¿Qué pasa si se introduce un DNA recombinante en un organismo?

Answer 2

Se produce una modificación genética

Question 3

¿Qué es una proteína recombinante?

Answer 3

Una proteína que no está presente en un organismo determinado y es producida a partir de un DNA recombinante

Question 4

Son proteínas que se obtienen al expresar un gen clonado en una especie o una línea celular original

Answer 4

Proteínas recombinantes

Question 5

Son proteínas específicas contra un padecimiento

Answer 5

Proteínas recombinantes

Question 6

Proteínas recombinantes que hoy se comercializan y se emplean como fármacosen humanos

Answer 6

• Factores de coagulación
• Insulina
• Hormona de crecimiento
• Eritropoyetina
• Interferón alfa
• Vacuna anti-hepatitis B
• Anticuerpos monoclonales recombinantes
• Proteína C
• Beta-glucocerebrosidasa
• DNAsa

Question 7

Indicación terapéutica de los factores de coagulación

Answer 7

Hemofilia

Question 8

Indicación terapéutica de la insulina

Answer 8

DB

Diabetes mellitus

Question 9

Indicación terapéutica de la GH

GH: Hormona del crecimiento

Answer 9

Deficiencia de la hormona en niños

Question 10

Indicación terapéutica de EPO

EPO: Eritropoyetina

Answer 10

Anemia

Question 11

Indicación terapéutica del interferón alfa

Answer 11

Hepatitis B y C, cáncer

Question 12

Indicación terapéutica de la vacuna contra hepatitis B

Answer 12

Inmunización contra hepatitis B

Question 13

Indicación terapéutica de los anticuerpos recombinantes

Answer 13

Asma, artritis reumatoidea

Question 14

Indicación terapéutica de la proteína C

Answer 14

Sepsis severa

Question 15

Indicación terapéutica de beta-glucocerebrosida

Answer 15

Enfermedad de Gaucher

Question 16

Indicación terapéutica de DNAasa

Answer 16

Fibrosis quística

Question 17

Microorganismos que pueden expresar la proteína

Answer 17

• Procariotes
• Eucariotes
• Bacillus subtilis
• Escheria coli
• E. coli
• Saccharomyces cerevisiae
• Hansenula polymorpha
• Pichia pastoris
• Células de mamífero de ovario de hámster chino (CHO)
• Células de riñón de hámster bebé (BHK)

Question 18

Microorganismo que expresa proteínas solubles en forma de agregados intracelulares o cuerpos de inclusión, sin plegamiento, lo que implica su estructuración in vitro

Answer 18

Procariotes

Question 19

Microorganismo que introduce modificaciones postraduccionales como glicosilaciones, eliminación de la metionina inicial y ruptura proteolíticade un precursor

Answer 19

Eucariotes

Question 20

Es ampliamente utilizado para la producción de proteínas con fines terapéuticos, diagnósticos o vacunales

Answer 20

Escheria coli

Question 21

Ventajas de E.coli

Answer 21

• Mayor velocidad
• Su genoma es conocido
• Crecimiento rápido
• Fácil manipulación genética
• Existencia de vectores de expresión estables

Question 22

Desventajas de E.coli

Answer 22

• Tienen proteasas que destruyen a las proteínas recombinantes
• No realiza modificaciones postraduccionales
• Produce endotoxinas

Question 23

Ventajas de saccharomyces cerevisiae, hansenula polymorpha y pichia pastoris

Answer 23

• Alta velocidad de crecimiento
• Adaptabilidad a los cambios
• Puede alcanzar grandes concentraciones celulares
• No produce endotoxinas
• Glicosilan proteínas

Question 24

Desventajas de saccharomyces cerevisiae, hansenula polymorpha y pichia pastoris

Answer 24

• Produce hiperglicosilaciones
• Baja eficiencia en la secreción de la proteína

Question 25

Ventajas de CHO y BHK

Answer 25

• Proteínas de manera bien plegada
• Modificaciones postraduccionales

Question 26

Desventajas de CHO y BHK

Answer 26

Muy costoso

Question 27

Sistemas de expresión de proteínas recombinantes

Answer 27

• Selección e identificación del gen responsable de la producción de la proteína de interés
• Introducirlos en plásmidos
• Insertarlos en una bacteria, levadura o célula animal
• Se seleccionan las células transformadas y aquellas que producen la proteína de interés en grandes cantidades
• Colocan en crio-viales y son guardadas en refrigeración a -80ºC

Question 28

Métodos para el diseño de proteínas (2)

Answer 28

• Diseño racional o mutagénesis dirigida
• Evolución dirigida

Question 29

Pasos para el diseño racional

Answer 29

• Análisis estructural de proteína (estructura 3D, función y nivel de estabilidad)
• Diseño y predicción de la proteína mutante

Question 30

¿Qué hace la mutagénesis dirigida?

Answer 30

Introduce la mutación en una secuencia de a.a. para modelar la proteína nativa

Question 31

Pasos de la mutagénesis dirigida

Answer 31

• Purificación
• Función y conformación (comprobar si la proteína tiene las propiedades que diseñamos)

Question 32

¿Qué es la evolución dirigida?

También llamada mutagénesis al azar

Answer 32

Mutación aleatoria del gen que codifica la enzima de interés

Question 33

¿Para que sirve la purificación?

Answer 33

Para obtener la mayor cantidad de producto con respecto al inicial, con el menor desperdicio posible y con la pureza exigida como mñinima para el producto

Question 34

Sustancia formada por un microorganismo completo atenuado o muerto, o fracciones del mismo, capaces de inducir una respuesta inmune protectora y duradera

Answer 34

Vacuna

Question 35

¿Para qué sirven las vacunas?

Answer 35

Prevenir y controlar futuras infecciones