Fixation, préparation des tissus et colorations usuelles - Dre Marjorie Perron

Question 1

Quel est le principal but de la fixation tissulaire?

Answer 1

Conserver les tissus en prevenant l’autolyse et la putréfaction

Question 2

Quels sont les facteurs influençant la fixation?

Answer 2

1. Type de fixateur (pH, concentration)
2. Volume de fixateur
3. Durée de fixation
4. Température
5. Vitesse de pénétration
6. Épaisseur tissulaire
7. Densité tissulaire

Question 3

Comment classifie-t-on les fixateurs selon leur action sur les protéines?

Answer 3

Coagulants et non coagulants

Question 4

Nommez des exemples de fixateurs coagulants.

Answer 4

Méthanol
Éthanol
Acétone
Acide nitrique
Acide chlorhydrique Acide trichloroacétique Acide picrique
Acide chromique Chlorure mercurique

Ne fait pas partie de l’examen

Question 5

Nommez des exemples de fixateurs non coagulants.

Answer 5

Formaldéhyde
Glutaraldéhyde
Acide acétique
Tétroxyde d’osmium
Bichromate de potassium

Ne fait pas partie de l’examen

Question 6

Comment classifie-t-on les fixateurs selon leur composition?

Answer 6

Simples ou composés

Question 7

Nommez des exemples de fixateurs simples.

Answer 7

Formaldéhyde
Glutaraldéhyde
Méthanol
Éthanol
Tétroxyde d’osmium
Bichromate de potassium
Chlorure mercurique
Acide picrique
Acide acétique

Question 8

Nommez des exemples de fixateurs composés

Answer 8

B5
Zenker
Helly
Bouin
Bouin-Hollande
Carnoy
Méthacarn

Question 9

Quel est le mode d’action des fixateurs du type aldéhyde?

Answer 9

Crosslinking
Fixation sans dénaturation des protéines

Question 10

Nommez une indication, avantage et incovénient du formaldéhyde.

Answer 10

Indications
- Fixateur de routine

Avantages
- Peu couteux et stable
- Fixateur standard pour colorations, IHC et analyses d’ADN

Inconvénients
- Temps de fixation minimal de 6-8h
- Surfixation ou sous-fixation
- Cancérigène

Question 11

Nommez une indication, avantage et incovénient du glutaraldéhyde.

Answer 11

Indication
- Microscopie éléctronique

Avantages
- Fixe rapidement
- Excellente préservation des détails ultrastructuraux cytoplasmiques et nucléaires

Inconvénients
- Mauvaise pénétration (petit fragments)
- Très couteux
- Entreposage et stabilité

Question 12

Nommez des exemples de fixateurs contennent de l’acide picrique.

Answer 12

Bouin
Bouin-Hollande

Question 13

Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs contennant de l’acide picrique.

Answer 13

Indication
- Tous les tissus, surtout biopsies

Avantages
- Décalcification
- Beaux détails nucléaires

Inconvénients
- Explosif (conserver humide)
- Déconseillé pour IHC

Question 14

Nommez des exemples de fixateurs contennant du mercure.

Answer 14

B5
Zenker
Helly

Question 15

Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs contennant du mercure.

Answer 15

Indication
- Organes lymphoïdes et hématopoïétiques

Avantages
- Fixe les tissus rapidement
- Détails histologiques excellents

Inconvénients
- Dépots de fixation
- Difficulté d’entreposage et de disposition

Question 16

Nommez des exemples de fixateurs à base d’alcool.

Answer 16

Méthanol
Éthanol
Carnoy
Methacarn

Question 17

Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs à base de méthanol/éthanol.

Answer 17

Indication
- Frottis cytologiques, les empreintes et les congélations

Avantages
- Antigènes bien préservés
- Fixe rapidement

Inconvénients
- Faible pénétration
- Temps de fixation doit être monitoré rigoureusement

Question 18

Nommez une indication, avantage et incovénient des fixateurs Carnoy/Methacarn.

Answer 18

Indication
- Examens extemporanés

Avantages
- Antigènes bien préservés (mieux avec Methacarn)
- Fixe rapidement

Inconvénients
- Artefactes de rétraction (plus avec Carnoy)
- Dissout les lipides

Question 19

Quels sont les types de dépots pigmentés causés par les fixateurs?

Answer 19

Pigment de formaldéhyde
Pigment de mercure
Pigment de chrome
Pigment coloré

Question 20

Nommez deux agents fixateurs qui sont aussi des décalcifiants.

Answer 20

Bouin
Zenker

Question 21

Quels sont les inconvénients de la décalcification?

Answer 21

Altération des antigènes nucléaires (ER, PR, p53 et Ki-67)
Altération de l’ADN

Question 22

Quelles sont les prinicpales étapes dans la préparation des tissus pour produire une lame?

Answer 22

1. Mise en cassette
2. Fixation
3. Circulation
4. inclusion en paraffine
5. Coupe au microtome
6. Étalement
7. Séchage
8. Coloration
9. Montage

Question 23

Quelles sont les propriétés de la coloration à hématoxyline et éosine?

Answer 23

Hématoxiline
- Colorant basique
- Colore les composants cellulaires basophiles (acides)
- Teint les noyaux
- Nuances de bleu (après étape de bleuissement)

Éosine
- Colorant acide
- Colore les composant cellulaires acidophiles (basiques)
- Teint le cytoplasme et fibres du tissu conjonctif
- Nuances de rose vers rouge

Question 24

Quel est le résultat attendu d’une coloration H&E adéquate?

Answer 24

Résultat final
Bleu: noyaux
Rose (de + pâle à + foncé): cytoplasme, fibres conjonctives (surtout le collagène), fibrine
Rouge intense: érythrocytes, colloïde et éosinophiles

Question 25

Quel est le résultat attendu d’une coloration HPS adéquate?

Answer 25

Résultat final
Bleu: noyaux
Rose: cytoplasme, fibres musculaires et fibres élastiques
Rouge: érythrocytes, fibres musculaires
Jaune (safran): fibres de collagène