proteomica C Flashcards
La forma de una proteina es fundamental para su funcion
VoF
verdadero
secuencia primaria
Secuencia única en una cadena polipeptídica
Desnaturalizacion de proteinas
Se da por cambios de temperatura, pH o exposicion a sustancias químicas
La estructura de la proteína cambia perdiendo su forma, pero sin perder su secuencia primaria
Funcion de las chaperonas
ayudar a plegar las proteinas
La presencia y la actividad de las proteinas depende de
- Expresión del gen
- Velocidad a la que los ARNm se trasnducen en la proteína
- La activación de la proteína o su tasa de degradación
2 tecnicas para caracterizar proteinas
ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS: sirve para separar
ESPECTOMETRIA DE MASAS: sirve para identificar
Separacion de proteínas
Se realiza mediante electroforesis dimensional
1. Se hace en un gel de poliacrilamida Separación por carga y peso molecular
El procedimiento inicial no garantiza la separación de todas las proteína pero si identifica manchas que indica diferentes proteinas.
2. Se usa la tinción de nitrato de plata o tinciones fluorescentes, Análisis bioinformática Espectometría de masas
uso del Western blot
para el estudio de anticuerpos monoclonales
Detecta proteínas que han sido separadas por electroforesis
y transferidas a una membrana de nailon
uso del ELISA
ensayo de inmunoabsorción enzimática
útil para el análisis semicuantitativo de la expresión de proteínas en extractos celulares
uso de la inmunohistoquimica
La localización de las proteínas en tejidos o en organismos enteros
uso del marcaje inmunológico
Localización subcelular de la distribución de proteínas
- En este las partículas de oro se unen a los anticuerpos y se visualizan mediante microscopía electrónica
uso de anticuerpos primarios o secundarios
La localización de dos o más proteínas diferentes en un tejido
- es muy útil para evaluar directamente si las diferentes proteínas se expresan en las mismas células
