PAL (Hématologie)

Question 1

Où se trouve la phosphatase alcaline:

Answer 1

Dans les granulations spécifiques des stabs et neutrophiles matures.

Question 2

Quel est la technique PAL:

Answer 2

Une réaction cyto-enzymatique en utilisant des substitues de naphtols et des sels de diazonium.

Question 3

Principe de PAL:

Answer 3

• les phosphatases alcalines libèrent du napthol à partir d’un substrat (naphtol AS-BI phsophate
• le napthol libéré se joint à un sel de diazonium (solution FRV-alkaline) et forme un précipité brun

Question 4

La réaction PAL est maximale à quel pH:

Answer 4

9.5

Question 5

L’intensité du précipité est proportionnelle à:

Answer 5

L’activité enzymatique dans chaque granulocyte neutrophile.

Question 6

Le pointage du PAL est déterminé par:

Answer 6

Comptage de 100 granulocytes neutrophiles ou stabs consécutifs. Chaque cellule comptée est marquée d’un pointage dépandant de son degré de positivité.

Question 7

Quels sont les fixatifs utilisés:

Answer 7

• 25 ml de solution citrate (acide citritque + citrate de sodium)
• 65 ml d’acétone
• 8 ml de formaldéhyde à 37%

Question 8

Entreposage du fixatif:

Answer 8

Au fridge, stable pendant 4 semaines. Amener entre 18-26oC avant l’utilisation.

Question 9

Quels sont les réactifs:

Answer 9

1. fixatif
2. solution naphtol AS-BI alkaline (pH 9.5)
3. solution FRV-alkaline (fast red violet LB base)
4. solution nitrite de sodium
5. solution hematoxylin, Gill no3

Question 10

Sang utilisé:

Answer 10

Sang prélevé sur héparine

Question 11

Préparation du frottis:

Answer 11

• Le frottis doit être coloré pour l’activité enzymatique en dedans de 8 heures après le prélèvement
• sinon, fixation et entreposage dans le congélateur
• le frottis soit être sécher au moins 1 heure avant la fixation et 3 heures post fixation avant de les placer dans le congélateur

Question 12

Contrôle de qualité:

Answer 12

• positif: femme enceinte dans le dernier trimestre de la grossesse ou quelques jours post-partum
• négatif: imerger un frottis dans l’eau bouillante pendant 1 minute afin d’inactiver l’enzyme

Ils peuvent être préservés pendant 1 année lorsqu’ils sont entreposés dans du parafilm à -70oC

Question 13

Quels sont les causes d’erreurs:

Answer 13

1. Une basse température diminue le pointage PAL
2. une tempréature plus que 30oC augmente l’activité de la phosphatase alcaline
3. les contraceptifs oraux, le cortisol et le stress peut augmenter les résultats

Question 14

Le PAL est augmenté dans les conditions suivantes:

Answer 14

1. infections
2. maladie de Hodgkin
3. myélome multiple
4. réactions leucémoides
5. myélofibrose
6. polyglobulie absolue primitive
7. traitements par les corticostéroides
8. troisième trimestre de la grossesse

Question 15

Le PAL est diminué et parfois nul dans les conditions suivantes:

Answer 15

1. leucémie myéloide chronique
2. hémoglobinurie paroxystique nocturne

Question 16

Sites pour ponctions de la moelle osseuse:

Answer 16

1. crête iliaque postérieure
2. sternum
3. crête iliaque antérieure
4. vertèbres de la colonne vertébrale

Question 17

Tube Wintrobe:

Answer 17

1. cellules adipeuses et périvasculaires (2%)
2. plasma
3. buffy coat composé de cellules méloide: érythroide (5%)
4. globules rouges

Question 18

Quel est le principe du colorant Wright/Giemsa:

Answer 18

Coloration panoptique composée de colorants de Ramanowsky. La combinaison d’éosine et de dérivé oxydé du bleu de méthylène (Wright`s - azure A, azure B, azure C, violet de méthylène) et (Giemsa - azure II)

Question 19

Principe de l’éosine:

Answer 19

Colorant d’aniline acide qui forme un sel avec les éléments basiques des cellules, tels le cytoplasme, l’hémoglobine et quelques protéines et colore en rouge-orangé.

Question 20

Principe des dérivés basiques du bleu de méthylène:

Answer 20

Ils se combinent avec les constituants acides de la cellule telle que l’ARN cytoplasmique et le matériel nucléaire, tel l’ADN et les colorent en bleu-violet.

Question 21

Wright/Giemsa contient:

Answer 21

• 4.5g colorant Wright
• 1000 mL de méthanol absolue (sans acétone)
• 0.1g Giemsa

Question 22

Principe de la coloration au Bleu de Prusse:

Answer 22

• en présence d’une solution acide de ferrocyanure de potassium, le fer ionique des cellules est converti en ferrocyanure ferrique qui se colore en bleu-vert ou bleu noir

Question 23

La coloration au Bleu de Prusse est utilisée pour:

Answer 23

• Identifier les sidéroblastes, sidérocytes et le fer dans les cellules réticulo-endothéliales.
• Estimation du fer de réserve dans le matériel périvasculaire (riche en macrophages)

Question 24

Quel sont les réactifs au Bleu de Prusse:

Answer 24

• 2% ferrocyanure de pottasium
• 0.5% HCl
• 10% formol (fixateur)