Transcription des Eucaryotes : déroulement. Flashcards
Qu’est-ce que requiert l’initiation de la transcription par l’ARN polymérase II ?
Formationd’un complexe multiprotéique sur l’ADN, constitué de la polymérase, de tous les facteurs de transcriptions et dumédiateur.
Quels sont les facteurs de transcription impliqués dans le complexe multiprotéique formé a l’initiation ?
TFII A B D E F H.
Quelle est la particularité du facteur TFII D ?
Constitué entre autres par la TBP, TATA Binding Protein. Utilisé par les trois polymérases, considéré comme un facteur universel.
Ou se fixe le facteur TBP ?
Dans le petit sillon de l’ADN, induisant une courbure dans celui ci.
Quelle est la première étape de la transcription eucaryote ?
Formation du PIC (fermé) au niveau de la TATA box et association avec l’initiateur.
Déroulement de l’ADN et ouverture du PIC puis CTD phosphorylé par TFIIA : le CTD n’agit plus avec TBP, et initiation de la transcription.
Quelle est la vtesse de l’élongation ?
20 à 40 nucléotides par seconde.
Qu’est-ce qu’un médiateur ?
Il s’agit d’un complexe de 25 protéines qui fait le lien entre les activateurs se liant a l’ADN et la polymérase II. Permet d’établir le contact entre tous les TF.
Quels sont les deux éléments importants situés en amont du +1 ?
Le PSE à -58 pb, site de reconnaissance d’un TF SNAPc qui assure la transcription. ASsocié à un DSE.
Le DSE, site sur lequel se fixe un activateur donné qui stabilise SNAPc, assurant la transcription.
Lorsque l’ARN pol I rentre en phase d’élongation, est-ce que les TF liés se détachent ou restent en place au niveau du promoteur ?
Ils restent en place au niveau du promoteur.
Décrire les promoteurs internes de type I de la pol III.
Ce sont des ARNr. Possèdent 3 séquences conservées, consitutant les sites de fixation des facteurs généraux de la polymérase III : TFIIIA, C et B.
Décrire les promoteurs internes de type 2 de la pol III.
ARNt interne : possède 2 boites entre lesquelles il y a des introns ce qui signifique que la distance entre les deux séquences peut être variable. Quand TFIIIC se fixe, permet a TFIIIB de se fixer, mettant en place PIC.
Décrire les promoteurs externes de type 3 de la pol III.
C’est un promoteur ARNsn externe situé en amont du site +1 et possède trois éléments : TATA et PSE avec DSE en amont. Bien que TATA seul et PSE seul = pol II, les deux ensembles reconnaissent la pol III.
Pour les promoteurs de type 3 comment entraine ton la fixation de la pol III ?
par l’action de SNAPc et TFIIIB.
Décrire la technique du GST pulldown.
Le facteur 1 est inséré dans un vecteur de clonage en 3’ de l’ADNc codant pour la gst. Le vecteur est transféré dans des bactéries qui synth une protéine chimère qui porte gst + facteur d’interêt. Chrom d’affinité qui retient le facteur 1, puis on ajoute le facteur 2 qui se fixe si il agit avec facteur1 . Puis marquage sur gel dénaturant.
Quel lien entre chromatine et transcription ?
Si euchromatine, pas de transcription.
