6 - croissance et division cellulaire 1 Flashcards
(45 cards)
1
Q
phases du cycle de division celR (CDC) (3)
A
- pour synthèse ADN (phase S)
- pour séparation chr (mitose, phase M)
- phases G1 et G2 -> croissance celR
2
Q
phase G1 (gap)
A
taille de cell atteint seuil critique, décide si fait phase S ou G0 (quiescence) selon envt
3
Q
phase S (synthèse)
A
réplication ADN
4
Q
phase G2 (gap)
A
taille de la cell double
5
Q
phase M
A
duplication cytoplasme + génome, répartis en 2 parts égales (phases PMAT)
6
Q
def temps de génération (3)
A
- temps nécessaire pour terminer cycle celR (G1+S+G2+M)
- pr 1 ind/pop
- cells humaines = 24h VS E. coli = 20 min
7
Q
détermination longueur de chq phase (3)
A
- pr 1 pop aléatoirement distribuée à travers ≠ phases du CDC : 2 façons
- 1) proportion de chq phase ds 1 pop
- long de phase proportionnelle à sa fraction ds la pop
- 2) cytométrie en flux (avec marqueurs de comptage)
- utilisation de tricium-thymidine et autoradiographie / BrdU, anti-BrdU, DAPI et microscopie de fluorescence
8
Q
détermination longueur de la phase avec 3H-thymidine (3)
A
- marquage des cells pour voir nvelle réplication ADN
- remplacement de thymine endogène par 3H-thymidine
- grains argent exposés à radioactivité visibles
9
Q
détermination longueur de la phase avec BrdU, anti-BrdU, DAPI (2)
A
- BrdU = Ac utilisé en combi avec anti-BrdU -> fluorescence
- DAPI montre noyaux cells, quelles cells en phase S
10
Q
analyse par cytométrie en flux (3)
A
- coloration avec DAPI -> mesure Qt ADN/cell par fluorescence (FL)
- mesure ampliture FL pr det phase (FL proportionnelle à phase)
- mesure pr chq cell indL -> aperçu de pop
11
Q
cultures synchronisées pout analyses biochimiques (4)
A
- par exploitation forme cells en culture
- par trieuse de cells (FACS = fluorescence activated cell sorter)
- forme ≠ des cells en culture pdt phase M (confo ronde fibroblastes en phase M)
- FACS : tag cells avec Ac puis séparation cells
12
Q
de quoi dépend division celR chez cells animales (3)
A
- de facteurs externes
- facteurs de croissance
- dépendance d’ancrage
13
Q
qd les cells se divisent-elles
A
qd conditions favorables
14
Q
facteurs de croissance (GF) (3)
A
- GF (growth factors) = mitogènes
- influence de division ds sérum (produit par coagulation) mais pas ds plasma (produit par centrifugation)
- coagulation sang -> lib° PDPF (facteur de croissance dérivé des plaquettes)
15
Q
facteurs de croissance : PDPF (4)
A
- act° 1 RTK (récepteur tyrosine kinase) -> stimulation division cells entourant vaisseaux (=boost multiplication celR pr régération tissus)
- act° Ras par RTK -> act° cascade MAPK aboutissant sur FT E2F
- cibles de E2F -> gènes encodant prot pr entrée en phase S
- Myc -> act° FT E2F pr faire entrer cell ds phase de division
16
Q
dépendance d’ancrage et RTK (6)
A
- dépendance ancrage donnée par la MEC
- cells aplaties -> bcp + jonctions cell-matrice (=point de contact focal)
- jonctions avec MEC = points contacts focaux + hémidesmosomes
- liens avec MEC -> utilisation intégrines
- intégrines -> confo active ou inactive
- liaison intégrine actine avc α et β subunits -> liaison avec talin (prot acc) + vinculin (adaptateur)
17
Q
point de contact focal (4)
A
- extrémités des filaments actine liés aux intégrines
- contiennent pTyr -> act° voies signalisation par MEC
- FAK (focal adhesion kinase) = tyrosine kinase recrutée aux points de contact focaux
- autophosphorylation de FAK + liaison de prot kinase Src
18
Q
que peuvent faire tyrosines kinases Src (2)
A
- autophosphorylation
- act° voie de signalisation Ras via prot à domaines SH2
19
Q
qu’activent les 2 voies (mitogènes et points de contact focaux)
A
même voie signalisation avec même résultat : cascade MAPK
20
Q
que régulent les composantes cytoplasmiques (2)
A
- initiation phase S
- phase M
21
Q
que forme fusion de 2 cells
A
hétérocaryons (fusion par utilisation agents mitogènes, électrofusion)
22
Q
activateur de phase S (SPF) (2)
A
- début immédiat de phase S par noyau en G1
- SPF actif seulement ds cells en G1
23
Q
activateur de phase M (MPF) (2)
A
- induit condensation chr
- MPF actif avec ttes phases de croissance celR (G1, S, G2)
24
Q
inhibiteur de formation du MPF (2)
A
- montré par fusion G2/S -> présent ds cells en phase S
- noyau G2 entre jamais en phase M si autre noyau en phase S
25
que permettent act° de SPF et MPF
passage "points de contrôle" par cell, passage 1 phase à 1 autre
26
3 points de contrôle du CDC (5)
- entrée dans phase S
- entrée dans phase M
- sortie de phase
- act° MPF après phase S, 1 seule fois pdt CDC (sauf méiose)
- act° SPF après phase M, 1 fois ds CDC
27
que sont MPF et SPF
des kinases cycline dépendante (CDK), dimères d'1 kinase et cycline dont niveaux celR dépendent de phase du CDC
28
identification du MPF (7)
- à partir d'1 facteur promoteur de maturation (MPF) chez oeufs de grenouille
- division rapide chez grenouille
- MPF actif ds cells en métaphase II + progression croissance celR de prophase I à métaphase II (méiose)
- facteur actif de mitose provoque maturation oeufs
- détection présence de MPF
- MPF compo de 2 prot -> p34 et p56
- id° fractions actives
29
prot p56 de MPF (3)
- p56 = cycline
- act° MPF aux C° élevées
- synthèse pdt interphase et dégradation pdt mitose
30
prot p34 de MPF (4)
- p34 = serine/thréonine kinase
- inact° sans cycline (qd pas ds 1 phase de pic) -> blocage site actif de prot par boucle T
- act° p34-cycline par CAK (CDK activating kinase)
- MPF -> kinase cycline dépendante (CDK)
31
rôle hélice PSTAIRE
liaison kinase avec cycline
32
structure de cycline (4)
- 2 grpes de 5 hélices
- motif MRAIL -> liaison CDK à certains substrats seulement
- sans MRAIL, liaison autre grpe de substrats
- définit affinité de kinase à 1 type de prot
33
action de liaison avec cycline (2)
- élément essentiel pr act° kinase p34
- enlève boucle T du site actif de kinase
34
que fait MPF activé par sa cycline (2)
- phosphorylation prot nécessaires pr entrée en phase M
- 3 substrats de MPF : condensines + lamines nucléaires (H1) + MAPs
35
substrats de MPF : condensines (3)
- α-condensine 1 et 2
- implication ds condensation chr
- act° condensines par phosphorylation
36
substrats de MPF : lamines nucléaires (2)
- α-lamine + DAPI + α-phosphoHistone H1
- phosphorylation lamines nucléaires (FI ds noyau) nécessaire pr désassemblage
37
substrats de MPF : MAPs (2)
- aug° instabilité dynamique (catastrophine > MAP)
- phosphorylation prot acc aux MT (MAPs) -> aide remodelage du réseau
38
fin phase M : inact° MPF (3)
- inact° MPF par ubiquitine ligase -> APC (Anaphase Promoting Complex) -> ciblage cycline pr dégradation
- act° APC ds phase M par liaison avec sous-unité Cdc20
- synthèse Cdc20 en G2 + liaison seulement à 1 APC phosphorylée par MPF
39
qu'activent les cyclines (2)
- cyclines G1/S + cyclines phase S activent 1 kinase cycline dépendante (CDK) + changement gamme de substats phosphorylés
- régulation complexes de kinase -> det début-fin chq phase
40
par quoi diffèrent substrats de S-CDK et M-CDK (2)
- site phosphorylation SPXK est entre site actif de kinase
- motif RXL pr liaison patch hydrophobe (MRAIL) sur cycline de phase S
41
prot rétinoblastome (Rb) (2)
- 1 des subtrats de G1/S-CDK
- inhibiteur FT E2F = inhibition division celR
42
prot Cdc6 (4)
- subtrat de S-CDK
- essentielle pr initiation réplication ADN
- synthèse Cdc6 en G1 seulement
- après phosphorylation, Cdc6 = cible de ubiquitine ligase SCF
43
ubiquitine ligase SCF (3)
- dégradation cyclines G1/S qd phosphorylées par S-CDK + cyclines S qd phosphorylées par M-CDK
- SCF = Skp/Cullin/F-box
- dégradation cibles phosphorylées uniquement
44
levure fissipare VS bourgeonnante
- levure fissipare : 1 CDK + 1 cycline S + 1 cycline M
- levure bourgeonnante : 1 CDK + 3 cyclines G1/S + 2 cyclines S + 4 cyclines M
45
survol cycle CelR au niv moléculaire (7)
- 1) taille de cell active G1/S-CDK
- 2) act° synthèse de S-cyclines par G1/s-CDK
- 3) dégradation G1/S-cyclines phosphorylées par S-CDK par SCF
- 4) act° transcription M-cyclines par S-CDK
- 5) act° M-CDK + phosphorylation S-cyclines et APC
- 6) dégradation S-cyclines phosphorylées par SCF
- 7) dégradation M-cyclines par APC
