פרק 9 - הדמיית תאים Flashcards
(18 cards)
מה קוטר תא אנימלי?
10-20 ננומטר
והוא שקוף
מה המגבלה של מיקרוסקופ?
לא ניתן לראות בו אובייקטים קטנים יותר מאורך גלי האור
מה הדרך היחידה להימנכ מהרס של רכיבי התא?
הדרך היחידה להימנע מהרס של רכיבי התא במהלך הכנת דגימה, היא צפיה בתאים חיים.
לצורך כך, מיקרוסקופ אור הינו יעיל במיוחד.
איך משמרים תאים לדגימה?
ע”י שימוש ב-
FIXATIVE
כמו גלוטראלדהיד
שיוצר קשרים עם קב’ אמינו חופשיים בחלבונים
ועושה ביניהן
CROSS-LINKING
ככה שהן נעולות ומקובעות
מה הסיבה העיקרית לשימוש במיקרוסקופ פלורסנטי?
משתמשים בשיטה זו בעיקר לזיהוי חלבונים ספציפיים או
מולקולות בתאים וברקמות
מה ההבדל העיקרי בין
מיקרוסקופ פלורסנטי
למיקרוסקופ אור?
הם דומים
למעט העובדה שהוא עובר דרך
2 פילטרים
איזה פילטרים מופיעים במיקרוסקופ פלורסנטי ולאיזו מטרה?
האחד מסנן את האור בטרם הגעתו לדגימה, והשני מסנן את האור המגיע
מהדגימה.
הפילטר הראשון מעביר רק את אורכי הגל המעוררים את הצבע הפלורסנטי,
בעוד שהפילטר השני חוסם את האור הזה ומעביר רק את גלי האור שמוקרנים מהצבע
הזורח.
מה מטרת הפילטר הראשון של
מיקרוסקופ פלורסנטי?
הפילטר הראשון מעביר רק את אורכי הגל המעוררים את הצבע הפלורסנטי,
מה מטרת הפילטר הראשון של
מיקרוסקופ פלורסנטי?
בעוד שהפילטר השני חוסם את האור הזה ומעביר רק את גלי האור שמוקרנים מהצבע הזורח
איזה צבע הוא פלורוסין?
צבע ירוק
במיקרוסקופ פלורסנטי
איזה צבע הוא רודמין?
צבע אדום
במיקרוסקופ פלורסנטי
מה עושים נוגדנים במיקרוסקופ פלורסנטי?
נוגדנים הם חלבונים בעלי ספציפיות לאנטיגן מסוים, ולכן משמשים ככלים יקרי -ערך לאיתור
מולקולות בתא, תוך שימוש במיקרוסקופ פלורסנטי
מה נותן לנו
מיקרוסקופ קונפוקלי?
מאפשר לקבל בפלורסנציה תמונות ברורות ותלת -ממדיות.
המיקרוסקופ ממקד בכל רגע קרן אור לנקודה בודדת בעומק מסוים ברקמה. הפלורסנטיות
המשתקפת מהדגימה נאספת לדטקטור ומשמשת להרכבת התמונה.
כיום משתמשים בפלורסנצית חלבונים לא רק כדי לזהות את מקומם בתא, אלא כדי ללמוד
על קשריהם עם מולקולות אחרות. מה הן 3 השיטות?
FRET
Photoactivation
(Bleach) FRAP
FRET
מה זה
מסייעת לזהות אינטראקציות בין מולקולות סמוכות
Photoactivation
מסנתזים מולקולה פלורסנטית לא -פעילה ומכניסים לתא, ואח”כ
מפעילים אותה ע”י הקרנת קרן אור. השיטה מאפשרת לעקוב אחר תהליכים פנים-
תאיים מורכבים ומהירים, כמו מסלולי איתות או תנועת חלבוני שלד התא.
(Bleach) FRAP
שיטה שבה מדכאים איזור זריחה פלורסנטית ע”י לייזר, ומודדים
את הזמן שלוקח לאיזור לשוב ולזרוח. השיטה משמשת למדידת דיפוזיה, קצבי העברה= טרנספורט, או קצבי קישור וניתוק של חלבונים
מה נותן לנו מיקרוסקופ
SEM?
יוצר תמונה תלת -ממדית של פני השטח של
הדגימה. ראשית יש לקבע את הדגימה, לייבש, ולצפות בשכבה דקה של מתכת. אח”כ
הדגימה “מופצצת” באלקטרונים. החיסרון בשיטה זו הוא שניתן לראות רק את פני השטח.
