Exploration cellulaire

Question 1

Quelle est la taille d’une cellule ?

Answer 1

10 à 2O microns (µm)

Question 2

Quelle est la résolution maximale de la microscopie photonique ?

Answer 2

200nm

Question 3

Quelle est la résolution maximale de la microscopie électronique ?

Answer 3

0,1nm

Question 4

Qu’est-ce qu’un microtome ?

Answer 4

C’est une machine qui coupe des tranches de 5 à 6 microns d’épaisseur.

Question 5

Quelles sont les particularités du microscope à contraste de phase ?

Answer 5

• Il permet de voir des cellules vivantes
• Il a une résolution supérieure à 200nm
• Il permet d’observer sans préparation

Question 6

Quelles sont les particularités du microscope en lumière blanche ?

Answer 6

• Il permet l’analyse des tissus et organes par histologie

- Les colorants sont peu spécifiques

Question 7

Quelles sont les particularités du microscope en fluorescence ?

Answer 7

• Similaire au microscope en lumiere blanche
• Permet de visualiser un groupe de molécules qui passerait inaperçu en lumière blanche
• Détection de structures spécifiques
• Souvent utilisé avec la technique d’immunohistochimie

Question 8

Qu’est ce que l’immunohistologie ?

Answer 8

Utilisation d’un anticorp spécifique de la molécule d’intérêt couplé a un fluorochrome. Il permet d’étudier un type de protéine dans une cellule.

Question 9

Quelles sont les particularités du microscope confocal à balayage laser ?

Answer 9

• Microscope en fluorescence auquel on a ajouté un laser
• Permet de voir en 3D
• Gain de netteté

Question 10

Quelles sont les particularités de la tomographie à électrons ?

Answer 10

• C’est une microscopie électronique
• Il permet une reconstitution 3D
• Il nécessite une préparation spéciale de congélation : bain d’azote liquide

Question 11

Comment se passe l’isolement des cellules à partir d’un tissu ?

Answer 11

• Digestion protéique
• Séparation des populations (centrifugation, attachement au plastique, tri par cytométrie de flux)
• Mise en culture

Question 12

Quelles sont les étapes de la technique de blot ?

Answer 12

• Électrophorèse sur un gel d’aggarose
• Transfert sur un filtre de nitrocellulose par capillarité
• Hybridation avec un marqueur spécifique
• Révélation

Question 13

Qu’est-ce que la technique d’hybridation in situ, FISH ?

Answer 13

C’est la détection d’ADN ou d’ARN par des sondes complémentaires marquées au fluorochrome

Question 14

Dans quel cas est utilisée la GFP ?

Answer 14

Dans le cas d’absence d’anticorp spécifique d’une protéine d’intérêt.
On construit un gène hybride codant pour la protéine, mais sur lequel on rajoute une portion de gène animal codant pour la GFP.

Question 15

Que permet la technique FRAP ?

Answer 15

Elle permet d’étudier le temps de diffusion d’une protéine

Question 16

Comment est utilisée la technique FRAP ?

Answer 16

On utilise une protéine couplée à la GFP. Un laser permet d’éteindre la GFP sur une zone puis celle-ci se reesprime quelques temps après. Cela permet d’étudier la vitesse et le déplacement des protéines.

Question 17

En microscopie optique, la résolution est limitée par quelles lois ?

Answer 17

Les lois de diffraction e la lumière.

Question 18

Que déclarent les lois de diffraction de la lumière ?

Answer 18

2 molécules à moins de 200nm ne peuvent pas être distinguées.

Question 19

Qu’est ce qui a été mis au point pour résoudre le problème de diffraction de la lumière ?

Answer 19

Le nanoscope, il a une résolution 10x supérieurs aux autres microscopes photoniques soit 20nm.

Question 20

Que met en évidence le nanoscope ?

Answer 20

Les molécules fluorescentes uniquement.

Question 21

Que permet l’électro-physiologie ?

Answer 21

La mesure de l’activité des canaux ioniques par la technique du patch clamp : étude des flux ioniques cellulaires par des sondes fluorescentes ou des sondes à pH.