Análisis de ácidos nucleicos Flashcards

1
Q

Tipos de acido nucleico que se pueden extraer

A

ssDNA
daDNA
RNA
mRNA
rRNA

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Q

Organismos de origen del acido nucléico

A

Procariota
Plantas
Mamiferos
Viruz

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3
Q

Fuentes para obtener acidos nucleícos

A

Sangre
suero
Plasma
Biopsia
Orina
Heces
Líquido cefalorraquídeo
Líquido sinovial
Líquido amniótico
Esputi
Semen
Raspado bucal
Folículo capilar
ETC

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4
Q

Características del Fenol cloroformo

A

Ventajas: Se obtien ADN de buena calidad y cantidad

Desventajas: Usas reactívos tóxicos / Perdidas significativas de ADN

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5
Q

Ventajas y desventajas del metodo de columnas para extraer ADN

A

Es rapido y se extrae una buena cantidad

Desventaja: Es muy CARO

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6
Q

Cuanto ADN pones en el espectrofotometro

A

1 microlitro

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7
Q

¿cómo funciona el espectrofotometro?

A

libera ondas dode a una mayor cantidad de luz abosorvida sera mayor la concentración ADN

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8
Q

Ondas de absorción del ADN

A

260 nm (nanometros)

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9
Q

Ondas de absorción de las proteínas

A

280 nanometros

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10
Q

Ondas de absorción del fenol

A

270 nanometros

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11
Q

Tinción que se usa en la fluorometría

A

Hoescht 33258

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12
Q

Componentes necesarios para la PCR

A

Secuencia de AND
Enzima DNA polimerasa
Desoxirribonucleotidos
Primers (oligonucleotidos)

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13
Q

¿De qué bacteria se extrae la enzima polimerasa de ADN?

A

Thermophilus aquaticus

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14
Q

Temperaturas que aguanta la Thermophilus aquaticus (Taq)

A

Soparta 95%

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15
Q

Temperaturas que aguanta la Thermophilus aquaticus (Taq)

A

Soparta 95%

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16
Q

Buffer o amortiguador necesario par la PCR

A

pH de 8.4

17
Q

Es el cofactor de la Taq polimerasa

A

Cloruro de Magnesio

18
Q

¿Quiénes forman a los iniciadores?

A

Los diseñamos nostros

19
Q

¿Para qué se utilizan los iniciadores?

A

Reconocer secuencias blanco en el ADN molde

20
Q

En que bases nitrogenadas es alto el inciador

A

Guanina y Citocina

21
Q

Pasos para la PCR

A

Desnatrualización
Hibridación
Extención

22
Q

¿Que pasa en la fase de desnaturalizacion de la PCR?

A

separación de cadena de ADN
a 95 grados por 20 o 30 segundos

23
Q

¿Que pasa en la fase de hibridación de la PCR?

A

Los primers se alinearan al extremo 3’
Estara a temperaturade alineamiento de 50 a 60 grados

24
Q

¿Que pasa en la fase de extensíon de la PCR?

A

La Taq polimerasa actuara sobre el complejo de primers

Se dNTP’s complementara para crear cadenas completas
A una temperatrua de 72°C

25
Q

Formula para obtener la tempertura de alineamiento

A

(4(cantidad de guanina)+(cantidad de citosina)) + (2(cantidad de adenina) + (cantidad de timina)

26
Q

¿La PCR permite ver la cantidad de polimofismos?

A

NO