CHROMATOGRAPHIE Flashcards
(7 cards)
1
Q
Définition de la chromatographie
A
Utilise une phase stationnaire à l’intérieur d’une colonne et une phase mobile pour entrainés les solutés à travers la colonne. Les solutés avancent à des vitesses différentes dépendant de leur affinité avec la phase stationnaire. Il en résulte une séparation des solutés qui quittent la colonne avec un temps de passage différents.
2
Q
On distingue deux techniques chromatographiques :
A
- La chromato à avancement limité
- La chromato par élution
La force agissante est la migration différentielle
3
Q
La chromatographie d’adsorption
A
- Delta F = Frétention (PS) – Félution (PM) = Migration différentielle
- Choix éluant = f (solubilité et polarité)
4
Q
La chromatographie de partage
A
- Séparation = f (distribution du soluté dans 2 solvants immiscibles)
5
Q
La chromatographie par échange d’ions
A
- La PS est une résine échangeuse d’ions positif ou négatif
- La PM fait traverser les solutés dans la colonne
- Le soluté avec une affinité de charge va se fixer sur la résine
- Le tampon d’élution permet de rétablir la résine à son état en inversant la charge du soluté et l’extraire de la colonne
6
Q
La chromatographie sur gel = tamisage
A
- Séparation du soluté = f (taille, forme et masse molaire)
7
Q
La Chromatographie d’affinité
A
- Préparation colonne : La PS est préparée en couplant un ligand spécifique.
- Échantillon : Le soluté est passé dans la colonne et la molécule cible se lie avec le ligand.
- Lavage : On élimine les molécules non liées en les rinçant avec un tampon.
- Élution : Pour récupérer la molécule cible, on change les conditions (comme le pH ou la concentration en sel) de manière à rompre la liaison, ce qui permet de la récupérer.
