Cours 2: Les techniques de neurophotoniques Flashcards
(120 cards)
1
Q
Vrai ou faux? La lumière est une onde et on l’utilise pour observer des objets très petits
A
Vrai, les humains sont devenus très bon avec la lumière (lentille) afin d’observer des protéines, des bactéries ou autres organismes vivants
2
Q
Quel est la différence entre un microscope et un téléscope?
A
L’agencement des lentilles qui permet de voir un objet très loin ou très près/très petit
3
Q
Réviser la diapositive 8
A
Ok
4
Q
Qu’est-ce qui a grandement changé dans l’évolution des microscopes depuis les 500 dernières années? (3)
A
- Élimination des bruits de fond
- Bonne résolution
- Meilleure marquage, meilleur contraste
5
Q
Qui a créé le premier microscope? Décris le brièvement
A
Hooke au 17e siècle
Il était formé de deux lentilles. On pouvait voir des cellules avec ce dernier
6
Q
Qu’est-ce qui a permis d’améliorer le contraste depuis le 20e siècle? (5)
A
- Les lasers
- L’amélioration des lentilles
- Les microscopes
- Les caméras (hypersensible, refroidi, diminution du bruit électronique)
- Outil génétique afin de modifier le génome des cellules pour y introduire de la fluorescence
7
Q
Quels sont les différentes caractéristiques des objectifs? (5)
A
- Immersion
- Grandissement (X)
- Ouverture numérique (NA)
- Distance de travail
- Corrections des aberrations
8
Q
Quels sont les différents types d’immersion et pourquoi les utilise-t-on? (4)
A
- Air: En culture cellulaire pour savoir si la culture est prête
- Eau: Échantillons vivants. On met l’objectif dans l’eau directement
- Huile: Les échantillons dans le verre (lamelle de verre, échantillon fixé)
- Silicone
9
Q
Pourquoi a-t-on autant de choix de matière pour les objectifs?
A
On utilise beaucoup d’interface différente dans nos échantillons, donc on a plusieurs abbérations possibles
10
Q
Pourquoi utilisé l’huile pour regarder dans les échantillons de verre?
A
Car son indice de réfraction est très près de celle du verre
11
Q
Qu’est-ce que l’ouverture numérique?
A
C’est le cône de correction de l’objectif
12
Q
Quels sont les différents types de corrections des abérrations? (2)
A
- Chromatique
- Plan
13
Q
Que veut dire l’acronyme WD sur l’objectif?
A
Distance de travail
14
Q
Que retrouve-t-on en majorité dans les substances qui font de la fluorescence?
A
Des cycles aromatiques
15
Q
Vrai ou faux? Plus les cycles aromatiques sont collés, plus ils émettent de la fluorescence dans le rouge
A
Vrai
16
Q
Réviser diapositive 14 du cours 2
A
Ok
17
Q
Quels sont les deux filtres nécessaires pour observer la fluorescence?
A
- Filtre d’excitation
- Filtre de détection (émission) pour isoler une couleur en particulier
18
Q
Décris le diagramme de Jablonski brièvement
A
Les photons partent d’un état de base, soit à 0. On les excite, donc ils montent en énergie au niveau S1. Il y a une petite perte d’énergie de certains photons qui vont alors aller faire de la phosphorescence, soit un processus plus lent que la fluorescence. En revenant à leur état basale les photons vont donc libérer l’énergie absorbé en fluorescence.
19
Q
Réviser la diapositive 15 du cours 2
A
Ok
20
Q
Pourquoi utiliser la lumière comme vecteur d’information? (6)
A
- La lumière est rapide
- Longueur d’onde: Elle est petite, donc utilise une unité petite, donc capable d’interférer avec des entités très petites (donne une bonne résolution).
- On est capable de la contrôler, de l’utiliser pour observer des phénomènes (fluorescence)
- Elle se propage dans l’air, les tissus beaucoup plus facilement que les électrons
- Détecteurs: permet de faire les caméras avec l’effet photoélectrique
- Sondes
21
Q
Qu’est-ce que l’effet photoélectrique?
A
L’effet photoélectrique est lorsqu’on envoie des photons sur surface des électrons vont se détacher de cette surface ce qui va venir faire un courant électrique qu’on peut alors mesurer et ainsi déterminer le nombre de photons qui a heurté la surface.
22
Q
Quels sont les fluorophores chimiques? (4) Pourquoi a-t-on besoin de plusieurs fluorophores différents?
A
- FITC
- ATTO
- Alexa
- Aromates
On a souvent besoin pour une seule émission de plusieurs fluorophores qui ont des spectres d’absorption et d’émission différents
23
Q
Vrai ou faux? Plus il y a de cycle aromatique un à la suite de l’autre, plus on est dans le rouge
A
Vrai
24
Q
Comment la GFP se protège-t-elle de l’environnement dans lequel elle se trouve?
A
Elle adopte une forme de baril
25
Comment a-t-on fait pour changer la couleur d'émission de la GFP?
Des changements génétiques
26
Pourquoi veut-on faire des protéines de plus en plus vers le rouge?
Car les tissus biologiques et l'eau absorbe et diffracte la lumière rouge, donc on peut aller plus profond dans les tissus
27
Quels sont les limites d'avoir des protéines fluorescente dans le rouge?
1. L'absorption et la diffusion de la lumière rouge par les tissus va également nuire à la fluorescence fait par la protéine
2. De plus, à cause des nombreux cycles aromatique
28
Vrai ou faux? La YFP est sensible au chlore
Vrai.
On voyait cela comme un désavantage au début, car le chlore venait diminuer sa fluorescence.
En revanche, plus récemment on voit cela comme une sonde nous permettant de voir s'il y a du chlore dans la cellule avec les niveaux de fluorescence de cette protéine
29
Comment peut-on confirmer qu'un gène s'est bien intégré dans un animal transgénique?
Dans ces animaux, on peut remplacer le gène marqué en y ajoutant un gène codant pour une protéine fluorescente afin de savoir si le gène a bien été intégré dans le génome
30
Quels sont les avantages des sondes et des protéines fluorescentes?
1. Peuvent s'intégrer dans le génome des animaux pour savoir si les gènes intégrer dans le génome des souris ont fonctionnés
2. Injection de virus pour marquer un type de cellule en particulier
3. Fluorophore chimique sont très sensible, robuste, signal intense
31
Quels sont les limites des sondes et des protéines fluorescentes?
1. Les protéines fluorescentes doivent être combiné à des anticorps. Ainsi, pour transmettre cela à l'échantillon on doit s'assurer qu'ils peuvent passer au travers de la membrane, mais également que l'échantillon est fixé et non vivant.
2. Perméabilisation de la membrane (endommage la cellule). La taille est importante
32
Vrai ou faux? Les lasers ont des spectres de longueurs d'onde très fine, donc peuvent être utilisé sans filtre
Vrai
33
Quels sont les avantages des sources d'illumination?
1. Ils ne sont pas divergeant dans l'espace, donc le diamètre du faisceau varie très peu
2. Intervalle de longueurs d'onde très petite, donc peu variable
34
Quels sont les inconvénient des sources d'illumination?
1. Plus que le diamètre d'un faisceau est petit, plus qu'il va diverger lors de longue distance
35
Quelles sont les caractéristiques du microscope à épifluorescence? (5)
1. Tout est illuminée
2. Image simultanée
3. La lumière hors focus est captée
4. Rapide
5. Possède une caméra
36
Comment fonctionne le microscope à épifluorescence?
La lumière d'excitation passe au travers d'un premier filtre d'excitation. La lumière qui passe va par la suite réfléchir sur un miroir dichroïque. Elle passe alors dans les objectifs et les lentilles ou elle sera focaliser sur l'échantillon. Les photons vont alors venir exciter l'échantillon. L'échantillon émet de la fluorescence qui retourne vers le microscope. Passe au travers des lentilles sans être focaliser, puis au travers du miroir dichroïque sans être réfléchit. Il passe alors au travers du filtre à émission, puis au détecteur CCD, soit une caméra qui permet d'avoir une image instantanée.
37
Quelles sont les caractéristiques du microscope à fluorescence point-scan? (5)
1. La lumière est focalisée
2. Un détecteur permet de détecter la fluorescence pixel par pixel
3. Il y a un cône ou pinhole qui enlève la lumière hors focus
4. C'est un microscope sensible
5. Possède un détecteur PMTs
38
Comment fonctionne le microscope à fluorescence point-scan?
On a un faisceau d'excitation avec un plus petit intervalle de longueur d'onde. Le faisceau d'excitation réfléchit sur le miroir dichroïque. Il passe dans les lentilles et objectifs en étant directement focaliser sur l'échantillons, à un point précis. L'échantillon fait de la fluorescence. Cette lumière d'émission retourne dans les objectifs et lentilles en divergeant. Il passe au travers du miroir dichroïque, puis au travers d'un filtre à émission. Enfin, la lumière hors focus est couper par le pinhole. La lumière focus continu vers le détecteur unique. Ce dernier va venir refaire l'image pixel par pixel avec un système d'effet photoélectrique.
39
Réviser la diapositive 27 du cours 2
Ok
40
À quel degré doit-on mettre le miroir dichroïque?
45 degrés
41
Pourquoi est-il plus avantageux d'acheter un miroir dichroïque dispendieux?
Plus le miroir est épais plus il reste droit, mais plus il est dispendieux. En effet, lorsque le miroir est moins cher, il est souvent plus mince et courbe facilement, donc lorsque la lumière réfléchit sur ce dernier, elle diverge
42
Réviser les diapositives 30-31 du cours 2
Ok
43
Quels sont les deux types de détecteurs caméra?
1. emCCD
2. CMOS
44
Quelles sont les caractéristiques de la emCCD? (6)
Elle se nomme la electron multiplying charged coupled device.
1. Nombre limité de noeud pouvant être converti en voltage
2. Très utile pour l'appliquer avec des images ayant un signal faible
3. Elle est refroidi, donc diminu les bruits de fond
4. Taille des pixel: environ 10 micromètre par côté
5. Son temps de lecture est d'environ de 10MHz à 100 kHz
6. Elle fonctionne en faisant un transfert d'électron de la pixel vers une case. Cette case passera dans un amplificateur, puis le courant sera mesuré afin d'obtenir le nombre de photons, donc l'intensité de la fluorescence dans cette pixel.
45
Réviser la diapositive 32 du cours 2
Ok
46
Quelles sont les caractéristiques de la CMOS?
Elle se nomme la complementary metal-oxide-semiconductor.
1. Chaque pixel à sa propre conversion charge à voltage
2. Elle requiert un processus lithographique avancé
47
Vrai ou faux? L'efficacité quantique d'une caméra dépend également de la longueur d'onde
Vrai.
L'effet photoélectrique est également dépendant. Donc si le courant est plus grand dans une case, on va voir une grande différence en comparaison au autre, car il faut également tenir compte de l'amplificateur. Le matériel va également jouer un rôle. Par exemple, certains matériels sont plus efficace dans l'infrarouge ou autre.
48
De quoi dépend la résolution de la microscopie à champ-large? (3)
1. Des lentilles
2. Des objectifs
3. Tailles des pixels
49
Que peut-on dire du signal hors focus de la microscopie à champ-large?
Ce dernier contribue au signal détecté, mais ce dernier est partout et diffus, donc il vient diminuer le contraste de l'échantillon.
50
Quels sont les avantages de l'excitation confocal?
1. Réussi à focaliser un réseau qui est hyper petit, limité par la diffraction
51
Quels sont les inconvénient de l'excitation confocal?
1. On excite quand même tout ce qui est hors focus, donc vient nuire au contraste de l'image
52
Quelles sont les caractéristiques du PMT ou photomultiplying tube?
1. Les photons incident frappent la photocathode qui contient un amplification (10*8) et des photoélectrons (photodiode)
2. Elle a une zone active de 1-2 cm*2
3. Très sensible (zone active large)
4. Réponse spectral (longueur d'onde de la lumière
5. Ils sont refroidi, donc diminu les bruits de fond
53
Pour quoi utilise-t-on les détecteurs PMTs? (4)
1. La spectroscopie à niveau bas de lumière
2. Miscroscopie confocal ou STED
3. Spectroscopie raman
4. Spectroscopie fluorescente
54
Réviser la diapositive 36 du cours 2
Ok
55
Vrai ou faux? Le temps de résidence de la particule fluorescente dans le focus va nous indiquer sur la diffusion de cette particule dans l'échantillon
Vrai
56
Que peut-on conclure avec la vitesse de diffusion de la particule dans l'échantillon?
En faisant une autocorrection, cela va nous permettre de savoir la taille de la particule. Ainsi, plus la particule diffuse lentement, plus elle est grosse et vice-versa.
57
Vrai ou faux? Plus le rayon de la particule est large, plus elle bouge lentement dans l'échantillon, car elle reçoit des coups des autres particules de chacun de ces côtés assez également. Au contraire, une petite particule va venir bouger plus rapidement, car ses coups ne seront pas égales des deux côtés
Vrai
58
Comment le microscope confocal acquiert-il ses images?
Il fait des plans focal de l'échantillon. Cela exige une reconstruction de l'image avec un système ordinateur, mais permet une image avec une meilleure résolution.
59
Quel est le rôle du sténopé?
Il bloque les signaux hors focus
60
Vrai ou faux? Le microscope confocal vient balayer l'échantillon pixel par pixel afin de reconstruire une image claire
Vrai
61
Quels sont les différents types de scanner du microscope confocal? Quelles sont leurs caractéristiques?
1. galvo-galvo scanner: uniforme, mais lent
2. Resonant scanner: Miroir en résonance. Il est rapide, mais pas le même temps passé sur chaque pixel à cause de l'accélération et de la décélération du miroir, donc c'est non-uniforme
3. Polygonal scanner: Les côtés de l'hexagone sont aberrant, donc il faut tout les enlever.
4. Laser scanning microscopie: On utilise un laser pour scanner la fluorescent. On veut que les pixels soit plus petit que le laser, ainsi une particule fluorescence n'apparaitra pas seulement sur un pixel, donc on sensibilise ainsi le microscope.
62
Réviser la diapositive 40 du cours 2
Ok
63
Qu'est-ce que la résolution?
La séparation minimale entre deux objets qui permet d'obtenir un certain niveau de contraste entre eux.
En d'autres mots, les particules ont besoin d'être à une distance plus grande que la taille du laser (limite de résolution en confocal dépend de la taille du laser)
64
Réviser la diapositive 42 du cours 2
Ok
65
Quelles sont les différentes sources de bruits?
1. Le bruit hors focus
2. Le bruit électrique
3. Le bruit de la cathode qui frappe un photon (crée une charge)
4. Bruit de lumière ambiante
66
Comment peut-on faire la différence entre un bruit et un fluorophore alors?
Le laser corrèle dans l'espace et dans le temps tandis que le bruit de fond est aléatoire et ne corrèle pas dans le temps. Ainsi, un vrai fluorophore va venir apparaitre dans plusieurs images du laser tandis que le bruit ne sera pas détecté partout.
67
Qu'est-ce que le photoblanchissement?
Le fluorophore émet un nombre de photons limité, donc la molécule devient juste noir et n'émet plus de lumière.
68
Vrai ou faux? Plus on élimine avec un laser intensément, plus le photoblanchissement est fort
Vrai
69
Quel phénomène s'agence avec ce qu'on appelle le blinking?
la phosphorescence
70
Qu'est-ce que la phosphorescence?
Une certaine partie des fluorophores vont dévié du cycle normal de fluorescence. La phosphorescence prend plus de temps que le cycle de fluorescence. Durant ce cycle la molécule va complètement s'éteindre et devenir noir
71
Réviser la diapositive 45 du cours 2
Ok
72
Quelles sont les différences entre le microscope et le champ large et confocal? (7)
1. Avec le microscope à champ large, on voit tout en même temps, il n'y a aucun aspect temporel.
2. Pour le microscope à champ large, la résolution est dictée par les lentilles et la caméra
3. Pour ce qui est du confocal, on doit enregistrer chaque pixe une à la fois, donc c'est beaucoup plus long
4. Pour le microscope confocal, la résolution est dictée par à quelle point le faisceau est focaliser sur l'image (à quel point on peut focaliser le laser), la longueur d'onde ainsi que les objectifs.
5. Pour le confocal, on dépend uniquement du laser, donc la résolution reste stable. En épifluorescence on dépend uniquement de l'émission des fluorophores.
6. Dans l'épifluorescence, le signal bruit ne dérange pas les images tandis que pour le confocal, l'image peut être dérangée par les bruits de fond
7. Enfin, le confocal à une meilleure détection, une meilleure sensibilité et en plus, le sténopé permet d'éliminer le signal hors focus.
73
Quelles sont les trois façons qu'on peut contrôler l'émission de fluorescence d'une molécule?
1. Chimiquement: En utilisant un agent oxydant ou un agent réduisant (STORM -> échantillon à besoin d'être fixé)
2. Avec la lumière
- Stimulated emission depletion (STED)
- Photoactivable fluoresent proteins (PALM)
- Photoconvertible fluorescent proteins (RESOLFT)
3. Avec la diffusion
- Only visible when bound (PAINT)
74
Vrai ou faux? Pour augmenter la résolution, on a seulement des petis trucs qui modifie les molécules, donc le changement n'est pas au niveau optique (microscope)
Vrai
75
Explique la stimulated emission depletion (STED) microscopie?
On va exciter tout l'échantillon. Par contre, en STED un autre laser d'une différente longueur d'onde (souvent dans le rouge) va venir créer une émission également rouge pour le photo. Ainsi, vu que la longueur d'onde émise n'est pas celle attendu, on ne le détecte pas dans nos filtre. Ainsi, il nous reste seulement un point focal au milieu qui permet la super miscroscopie.
76
Vrai ou faux? En STED on change la taille du faisceau d'émission sans changer la taille du faisceau d'excitation
Vrai
77
Quel est l'avantage du STED?
Très bonne résolution
78
Quels sont les inconvénients du STED?
1. On peut overlaper les deux faisceaux
2. La résolution dépend de la puissance du STED, souvent beaucoup de blanchissement
79
Vrai ou faux? Un gain en résolution spatiale signifie une diminution de la résolution temporelle
Vrai
80
Qu'est-ce que le deux photons emission?
C'est que si nous avons deux photons qui ont la moitié de l'énergie nécessaire avoir le même effet sur le fluorophore qu'avec un seul photon. Par contre, les deux photons doivent arriver simultanément dans la molécule
81
Si le photon à une énergie deux fois moins grande que peut-on dire que de longueur d'onde?
Elle est deux fois plus grande, donc on tend plus vers le rouge.
82
Quels sont les avantages du deux photons?
1. On enlève complètement l'idée du cône de fluorescence. Cela nous permet d'avoir une résolution beaucoup plus grande.
2. De plus, on utilise une lumière rouge, donc on peut étudier les tissus biologiques plus en profondeurs.
3. Pas besoin de sténopé, car on excite seulement un point dans l'échantillon
83
Quels sont les inconvénients du deux photons?
1. Perte en gain de résolution à cause de la grosse longueur d'onde
2. Nécessite des lasers spéciaux
3. Nécessite un laser pulser (énergie moyenne la même, mais une plus grande intensité en même temps, puis une pause).
84
Quels sont les différences entre l'excitation à un photon et à deux photons?
1. 1P, il y a une seule transition, donc souvent c'est de la lumière bleue.
2. 2P avec la lumière rouge on est capable d'excité une seule région si les deux photons arrivent simultanément, donc on va plus profond dans le tissus.
3. 2P problème de transmission dans le tissu
4. On excite beaucoup moins, donc en 1P on excite 1/10 du centre tandis qu'en 2P on va exciter 1/100 du centre pour la même chose, donc la fluorescence est beaucoup plus faible, car la densité de photons diminue.
85
Comment mesure-t-on le temps de vie de fluorescence?
On excite les fluorophores, on détecte les photons. Donc on regarde le délais entre l'excitation et l'émission d'un photon, donc à partir de cela, on est capable de déterminer combien de temps la particule est resté dans un état excité avant de devenir un photon.
Par contre, c'est une technique très longue, car on fait photon par photon. Pour chacun des fluorophores, il existe un histogramme de temps de vie.
86
Quels facteurs peuvent venir changer le temps de vie des fluorophores? (3)
1. Environnement
2. Ions
3. pH
87
Quel est le but du FRET (Fluorescence resonance energy transfer)?
Pour savoir la distance entre deux molécules. C'est un effet dipolaire en fait.
88
Comment définit-on la membrane d'une cellule?
C'est un isolateur. Une barrière de diffusion semi-perméable.
89
Qu'est-ce que le potentiel de membrane?
La différence de potentiel électrique entre l'intérieur et l'extérieur des cellules. Il se tient normalement entre -60-80 mV.
90
Que contient le gradients électrochimiques intérieur de la cellule?
Contient principalement des ions de potassium ainsi que des anions organiques
91
Que contient le gradient électrochimique extérieur de la cellule?
Il contient une grande proportion de Na+ et de Cl-
92
Lors de la dépolarisation de la cellule, que peut-on dire des canaux?
La dépolarisation se produit lorsque le potentiel de membrane est supérieur à -70 mV.
1. Entrée de Na+
2. Sortie de Cl-
93
Lors de l'hyperpolarisation de la cellule que peut-on dire des canaux?
L'hyperpolarisation se produit lorsque le potentiel de membrane est inférieur à -70 mV.
1. Entrée de K+
2. Sortie de Cl-
94
Vrai ou faux? Les pompes à ions nécessite une source d'énergie extérieur
Vrai
95
Donne des exemples des sources d'énergie des pompes à ions (3)
1. L'hydrolyse d'une molécule d'ATP
2. Réaction d'oxydoréduction
3. Lumière
96
Quel type d'énergie utilise un transporteur?
L'énergie d'un autre gradient électrochimique existant
97
Quels sont les trois types de transporteurs? Décris-les.
1. Uniport: transporte une molécule dans le sens de son gradient de concentration
2. Symport: Transporte deux molécules dans le même sens
3. Antiport: Transport deux molécules dans des sens opposés
98
Décris le co-transporteur KCC
- C'est un co-transporteur de potassium et de chlore.
- Il existe plusieurs isoformes dont KCC1, KCC2, KCC3, etc.
- Il fonctionne avec le gradient électrochimique du potassium.
- Il transporte une molécule de chlore et une molécule de potassium à la fois.
- Dans des conditions normales, il transporte le chlore hors de la cellule
- Il est exprimé dans toutes les cellules.
99
Décris le transporteur NKCC
- C'est un transporteur de sodium-potassium-chlore
- Il utilise le gradient électrochimique du Na+
- Il transporte un ion de potassium, 1 de sodium et deux de chlore
- Il est électroneutre
- Dans des conditions normales, il fait entrer le Cl- dans les cellules
- Le NKCC1 est exprimé dans tous les organes et le NKCC2 dans les reins.
100
Quelle est la structure du GABA a R?
C'est un pentamère de 2 unités alpha, 2 unités bêta et une unité gamma.
101
Quels sont les ligand du GABA a R? (4)
1. Agonistes (molécule qui active) comme l'acide gamma-aminobutyrique (GABA), muscimol, etc.
2. Modulateurs allostériques positifs (augmente l'activité) comme les benzodiazépines, barbiturates, éthanol, etc.
3. Antagonistes (molécules qui diminue l'activité) comme le bicuculline, gabazine
4. Les bloqueurs de canal comme le picrotoxine.
102
Vrai ou faux? Le GABA a R est perméable au Cl- et au CO3-
Faux, il est perméable au Cl- et aux HCO3-
103
Vrai ou faux? De petits changements de concentration de Cl- intracellulaire peuvent changer la polarité du courant Cl- de l'inhibiteur à excitateur
Vrai
104
Quel impact ont l'augmentation de la concentration du Cl- intracellulaire?
Au delà d'un certain seuil affectera le potentiel au repos du Cl qui deviendra positif comparé au potentiel de repos de la membrane
105
Réviser la diapositive 73 du cours 2
Ok
106
Vrai ou faux? L'entrée des ions Cl- inhibe les neurones
Vrai, ainsi il faut donc maintenir une faible teneur en Cl- dans la cellule pour permettre son entrée
107
Lire et réviser les diapositives 75 à 77
Ok
108
Comment fait-on pour mesurer l'électrophysiologie d'une cellule?
On prend un pince qui mesure le voltage/courant, puis on vient pincer la membrane externe du neurone
109
Quels sont les avantages de cette technique d'électrophysiologie?
1. Les mesures sont très précises
2. Contact direct sur le neurone
110
Quels sont les inconvénients de cette technique d'électrophysiologie?
1. On peut seulement mesurer un neurone à la fois
2. On doit affecter son intégrité pour la mesurer (brise la membrane)
111
Réviser les diapositives 78-79 du cours 2
Ok
112
Quelles seraient les caractéristiques d'un indicateur idéal?
1. Sensible à l'ion d'intérêt/sensible à la gamme d'ion interessante
2. Ne doit pas affecter la cellule
3. Doit se lier et se délier de la cellule et ne pas lui nuire
4. Dépendant du cas, doit avoir une liaison rapide ou lente
5. Doit être très intense pour qu'on puisse bien le détecter
6. il ne doit pas être intense lorsqu'il n'est pas lié, car cela nuit à notre delta f.
7. Le problème c'est que lorsqu'il n'est pas lié, on ne peut pas voir les cellules
113
Quelle est la différence entre électrophysiologie et l'imagerie?
Avec l'imagerie, on peut suivre plusieurs neurones à la fois, même un réseau complet si on veut. Par contre, avec l'électrophysiologie, c'est seulement un neurone à la fois et on le blesse. Par contre, l'électrophysiologie nous offre des mesures beaucoup plus précise.
114
Réviser les diapositives 82 à 85 du cours 2
Ok
115
Pourquoi le calcium est-il un bon fluorophore?
On peut voir en imagerie, la fluorescence augmenter et diminuer avec l'entrée et la sortie du calcium.
De plus, le calcium est toxique pour la cellule, donc elle va toujours essayer de ne pas avoir en elle. Ainsi, lorsqu'il y a une entrée la fluorescence est très intense. C'est ce qui fait de lui un bon indicateur.
116
Réviser les diapositives 86 à 89 du cours 2
Ok
117
Vrai ou faux? Il est possible de moduler les ions avec des outils génétiques
Vrai
118
Donne des exemples de sondes artificielles (génétiquement modifié) qui module l'activité des ions?
1. Channelrhodopsin-2 qui fait entrer les ions Ca2+ dans les neurones
2. Natronomonas pharaonis halorhodopsin
119
Réviser la diapositive 90 du cours 2
Ok
120
