Cromatografia Liquida Flashcards

Question

quais as características ideais para o detector clae ?

Answer 1

⁕Ampla faixa linear - Maior comodidade no dimensionamento do volume de amostra - Analisar na mesma corrida espécies de concentrações diferentes. ⁕Baixo volume interno -Grande volume: Alargamento dos picos registrados. ⁕Resposta Rápida - Sinal que represente o exato instante de detecção. - Detector lento: Picos deformados (baixo e largo) e com cauda longa.

Answer 2

⁕No momento da passagem do analito pelo detector, pode ocorrer uma alteração do índice de refração. Essa alteração em relação ao valor da FM livre de analito é detectada. ⁕ A detecção só é possível quando o índice de refração do analito é diferente do IR da MF. ⁕Esse detector é normalmente utilizado quando os analitos não absorvem na região λ do UV-VIS. ⁕Baixa sensibilidade ⁕Não permite a utilização em análises por gradiente ⁕Temperatura deve ser constante ⁕Análises de carboidratos e açúcares em geral.

Answer 3

⁕Baseia-se na absorbância da luz pelo analito ao passar pelo detector. ⁕Seletivo pois só detecta os compostos que absorvem no λ em que o detector for ajustado. ⁕É o detector mais utilizado em CLAE pois grande maioria das substâncias absorvem radiação UV. Ex: olefinas, aromáticos, C=O, C=S, N=O. ⁕A FM utilizada não pode absorver no λ selecionado. ⁕A pureza da FM é extremamente importante (traços de impurezas podem absorver intensamente no λ utilizado) => utilizar solventes grau HPLC. ⁕O λ é variável entre 200 nm e 800 nm, selecionado através do monocromador (UV=lâmpada de deutério e Vis= lâmpada de tungstênio); ⁕Possui maior aplicação pois permite selecionar o comprimento de onda mais adequado para os componentes a serem analisados; ⁕Maior sensibilidade: escolha do λ de maior absorbância; ⁕Maior seletividade: escolha do λ onde o analito de interesse absorve e outros não; ⁕Permite a utilização de análise por gradiente: escolha do λ onde os constituintes da FM não apresentam variação de absorbância. ⁕O λ é selecionado através do monocromador; ⁕O feixe de luz é emitido pela lâmpada de deutério ou tungstênio e incide na cela por onde passam os componentes da amostra que absorvem parte da luz dependendo de sua absortividade molar e concentração; ⁕A quantidade de luz não absorvida é detectada pela fotomultiplicadora. ⁕ATENÇÃO: Seleciona-se o λ que pode não ser o mais adequado para todos os componentes da amostra. Isso resulta na perda de sensibilidade.

Answer 4

Baseia-se na possibilidade de muitos compostos serem oxidados ou reduzidos quando se aplica um potencial elétrico. ⁕ Em um processo eletroquímico, um par de eletrodos é colocado na cela e um potencial suficientemente elevado é aplicado provocando uma reação de oxidação ou redução gerando uma corrente que é medida em um detector eletroquímico. ⁕A corrente gerada é proporcional a concentração do composto. ⁕Coulométrico: O elemento flui através de um eletrodo de grafite poroso onde praticamente 100% das espécies eletroativas são oxidadas ou reduzidas e portanto a sensibilidade é muito alta (10-15 g = fentograma). ⁕ É possível montar um conjunto de detectores coulométricos em série o que permite aplicar um potencial crescente em cada cela de forma a oxidar ou reduzir seletivamente cada componente em cada uma das celas.

Answer 5

⁕Ruído: Distúrbio na linha de base que não está relacionado ao soluto eluído: sistema com problemas (FM mal misturada, variação na temperatura, analitos de amostras anteriores com eluição tardia, lâmpada ruim, sistema de bombeamento). ⁕Deriva (drift): inclinação da linha de base (alterações na temperatura, FM (gradiente) e pressão na cela de detecção)

Answer 6

⁕Número de pratos teóricos (N): Número indicativo da performance da coluna. É a medida da largura do pico em relação ao seu tempo de retenção. ⁕É o parâmetro que mais precisamente define a qualidade de um sistema cromatográfico.

Answer 7

Prato teórico: segmento da coluna onde se atinge um equilíbrio termodinâmico entre FM, FE e analito. < H; > N; => maior eficiência da coluna

Answer 8

Fornece uma medida quantitativa da habilidade da coluna em separar duas substâncias.

Answer 9

Razão de distribuição do analito entre a FM e FE. >K; > afinidade pela FE

Answer 10

Indica a separação entre duas substâncias. α; melhor a separação

Answer 11

``` Farmacêutica Bioquímica Produtos alimentícios Produtos químicos Poluentes Química forense Clínica médica ```

Answer 12

CL ⁕Passagem da fase móvel por gravidade ⁕Uso de tubos de vidro como colunas cromatográficas detecção visual ⁕Análise química das frações coletadas ``` CLAE ⁕Colunas com micropartículas=> Melhor resolução: quanto menor as partículas, mais uniforme é a vazão através da coluna ⁕Bombas de alta precisão e exatidão ⁕Solventes ultra-puros grau HPLC ⁕Detectores seletivos e sensíveis ```

Answer 13

CLAE: Opera com fase líquida com vazão 1 mL/ min (= 500 mL gás/ min.) em altas pressões. EM: Opera em fase gasosa, sob alto vácuo, até 10 mL gás/min. ⁕O uso de uma interface é necessário para ter compostos sequencialmente separados em CL e introduzidos para análise no EM. ⁕As taxas de fluxo usadas na CL-EM devem ser menores que as usadas para a CLAE. Isso é para garantir a ionização completa e manter a sensibilidade de detecção da EM. ⁕CLAE: Introdução e separação dos constituintes da amostra ⁕INTERFACE: Fonte de ionização à pressão atmosférica ⁕ANALISADOR DE MASSAS: Íons são separados pela sua razão massa/carga e posteriormente, são detectados.

Answer 14

HPLC >> Interface >> analisador de massas>> Detector. ⁕CLAE: Introdução e separação dos constituintes da amostra ⁕INTERFACE: Fonte de ionização à pressão atmosférica ⁕ANALISADOR DE MASSAS: Íons são separados pela sua razão massa/carga e posteriormente, são detectados.

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