Cryptococcus neoformans Flashcards
(12 cards)
Taxonomie
Basidiomycota, levure
complexe neoformans
Organismes unicellulaires eucaryotes
Reproduction asexuée par bourgeonnement ou scission
Epidémiologie
Responsable d’infections chez l’immunodéprimé avec atteinte de l’immunité adaptative cellulaire (lymphocytes T CD4++)
- Populations à risque :
o VIH < 200 CD4/mm3 +++ (dans le monde, 15% des décès liés au VIH sont dus à C. neoformans : 180.000 décès/an)
o TOS ; Immunosuppresseurs, dont corticoïdes fortes doses
o Hémopathies malignes, allogreffés de CSH ; Cancer solide
Caractéristiques de Cryptococcus neoformans
- Levure saprophyte de l’environnement
- réservoir : déjections de pigeons et autres oiseaux, fruits en décomposition, sol, débris de végétaux
- Reproduct° asexuée par bourgeonnement
- Non colorée
- Capsule:
○ polysaccharidique (glucuronoxylomannane)
○ Facteur de virulence (il l’utilise pour mieux infecter)
-Absence de filament
Coloration
- Gram +
- Coloration HES : levure rose pâle et capsule réfringente
-coloration PAS, MGG et imprégnation argentique : colore levure mais pas la capsule
-Coloration bleu alcian et mucicarmin : capsule en bleu et rouge
-Coloration à l’encre de chine diluée: large halo clair à bord net autour de la levure= capsule
Prélèvement qui permet le diagnostic de cette mycose
- Ponction lombaire : Mesure de la pression d’ouverture ! Examen direct à l’encre de Chine (capsule), Culture (Sabouraud, min 3 sem), Antigène cryptococcique
- Sur sang : Antigène cryptococcique sur sérum, Hémocultures (cryptococcémie)
- Examen mycologique des urines
( +++ réservoir prostatique)
Examen diagnostique de la cryptococcose Neuro méningée
Imagerie : I.R.M. cérébrale
Examen direct du LCR :
–macroscopie : liquide clair, limpide
–biochimie : leucocytes aug, possible pléiocytose à lymphocyte
- hyperprotéinorachie
- hypoglycorachie
–Microscopie : Test à l’encre de Chine diluer sur une goutte du culot de centrifugation : levures sphériques entourées d’un Halo claire à bord net (capsule)
Culture du prélèvement sur milieu de Sabouraud + ATB (chloramphénicol, gentamicine)
à 30-35°C pdt 2-5jours
attendre 3semaines avant de rendre résultat (-)
Uréase + (en 3h), Sensible au cycloheximide (Actidione®)
Biologie moléculaire dans le LCR : PCR syndromique
Détection d’antigène capsulaire dans le LCR : test diagnostic rapide, sensible, spécifique
Méthode : agglutination au latex, ELISA, immunochromato
Dépistage et titrage : titre sérique élevé de mauvais pronostic
Examen diagnostique des autres formes cliniques (hors neuro-méningées):
- Bilan d’extension de l’infection
- Détection d’antigène capsulaire dans le sérum
- Antifongigrammes : étude de la sensibilité de l’amphotéricine B, fluconazole, 5-FC
Antigène cryptococcique
- Détection du glucuronoxylomannane capsulaire
- Détection immunologique : Agglutination, Immunochromatographie
- Dans sérum ou LCS
- Très sensible et spécifique, facteur pronostic
- Rares réactions croisées…
Arguments cliniques
Atteinte neuro-méningées : la plus fréquentes:
Céphalées fébriles et hypertension intracrânienne+++
Syndrome méningé
Signes encéphalitiques (confusion, vertiges, convulsions, coma…) Grave:40% de mortalité, jusque 70% de séquelles
Attente pulmonaire systématique : souvent symptomatique chez le VIH +
Toux, dyspnée, douleur thoracique, fièvre Scanner:pneumopathie interstitielle (verredépoli)
Atteintes cutanés : généralement secondaire à la dissémination hématogène
Autres atteintes = dissémination : os, foie, rate, ganglions, prostate = réservoir à l’origine de rechutes
Physiopathologie
Inhalation de basidiospores de l’environnement aéroportées, exceptionnellement par voie cutanée au cours d’un traumatisme
= Inhalation de basidiospores
= Inoculation par traumatisme tellurique/ végétal (- fréquent)
Pathogenèse
La spore gagne les voies aériennes pour se transformer en levure dans l’alvéole pulmonaire. Cette levure y est phagocytée par les macrophages, puis reste en dormance.
* Épisode d’immunoD=Réactivation : multiplication avec ou sans mort cellulaire, libération de la nouvelle levure, dissémination par voie hématogène
* La levure à l’état de dormance est comme un « cheval de Troie » qui va gagner la circulation sanguine et passer dans le cerveau par transcytose.
Identification
morphologie à l’examen direct microscopique : levure sphérique et capsuler ne filamentant pas
Croissance à 37°
Colonies de levures (Sabouraud) : Beiges et coulantes avec le tps, Incuber minimum 3 semaines !
Milieu de culture spécifique : milieu à la L-Dopa ou aux graines de Niger : différencie C. neoformans et C. gattii (foncées) des autres levures (claires)
Milieu CGB (canavanine-glycine-bleu de bromothymol) : différencie C. gattii (bleu) de C.
neoformans (incolore)
Sensible au cycloheximide (Actidione®)
Spectrométrie de masse MALDI-TOF
Activité uréasique sur milieu liquide urée-indole:
uréase +
Galerie biochimiques d’identification
Génotypage par séquençage
Envoie de la souche au CNRMA : Centre National de Référence Mycoses et Antifongiques
traitement
Traitement curatif antifongique en urgence :
Association d’antifongiques systémiques en urgence !
Surtout pas de corticoïdes !
–traitement de induction : amphotéricine B (IV lente) + 5-fluorocytosine (IV)
à adapter à la fonction rénale : forme liposomal moins néphrotoxique
Dosage pharmacologique de la 5-FC
Durée : VIH =1sem , Non-VIH = 2 sem, jusqu’à négativation des cultures
L-AmB : fongicide mais diffuse mal dans LCS
5-FC : diffuse très bien dans le LCS mais ne pas utiliser en monothérapie
Résistance : Echinocandines
–Traitement d’entretien/ de consolidation : relais par fluconazole (VO) pdt 6-8semaines
Diffuse bien dans le LCS mais fongistatique
Prise en charge de l’hypertension intracrânienne : ponction lombaire évacuatrice
Prophylaxie secondaire : fluconazole VO : Jusqu’à restauration du système immunitaire! (6mois-1an)
Trithérapie antirétrovirale ? Attendre 1-2 mois ! (IRIS= Le syndrome de reconstitution immune regroupe l’ensemble des manifestations inflammatoires survenant lors de la reconstitution d’une réponse immune excessive et insuffisamment régulée vis-à-vis d’antigènes)
Mesures prophylactiques
ttt de maintenance par fluconazole ou prophylaxie secondaire pour Les immunoD persistant, LT CD4<100/mm3 et pdt 6mois-1an
à arrêter quand LTCD4+ >200/mm3