Decalcification Flashcards
(41 cards)
Quel est le but de la decalcification ?
-Enlever le calcium (sels de calcium) des tissus
Tissu normaux : os, dents
Tissu pathologique: artères, lésions caséeusse
-Essayer d’avoir le moins possible d’altérations ou de déformation des structures pendant le processus de décalcification.
Quel est le fixateur recommander pour la decalcification ?
Formaldéhyde tamponnée 10% pour 2 à 5 jours
Pourquoi le Formaldéhyde tamponnée 10% est il recommander pour la decalcification ?
Il prévient le gonflement du collagène (qui est un artéfact de la décalcification)
Quels sont les critères essentiels pour une bonne decalcification ? (5)
- Enlèvement complet du calcium
- Distorsion minimale du tissu, absence de dommages
- tenir compte de la concentration du décalcifiant
- restreindre le temps d’action au maximum - Préservation des structures nucléaires
- perte de basophilie nucléaire si trop longtemps - Ne pas nuire aux colorations subséquentes
- les acides extraient certaines substances ce qui peut rendre les colorations moins bonnes - Vitesse de décalcification raisonnable
- temps de décalcification vs besoins du laboratoire
- si augmenter [ ] du décalcifiant pour augmenter la vitesse = altération du spécimen
L’utilisation de la chaleur n’est pas recommandée car elle augmente les dommages causés par le décalcifiant.
Vrai ou Faux
Vrai
Quels sont les étapes de la decalcification ? (5)
- Selection du specimen
- Fixation du tissu
- Decalcification
- Fin de la decalcification
- Neutralisation e l’acide et lavage (pour empêcher le gonflement des fibres de collagène par l’acide du décalcifiant)
Quel est le fixateur de choix pour la moelle osseuse ?
Helly
Quel sont les critères pour la Selection du specimen?
Coupe avec une scie à dents minces
Pas plus de 4 ou 5 mm d’épaisseur
2 à 5 mm → idéal
Surface de coupe à jeter, après la décal. (endommagée par la scie → l’enlever avec le bistouri ou microtome)
Quels sont les critères pour la Fixation du tissu ?
Décalcifiant = acides → si pas fixé, altération des structures par les acides du décalcifiant
Certains fixateurs peuvent décalcifier un peu (ceux qui contiennent des acides)
Ex : Bouin, Zenker (acide acétique) Donc, les petites pièces peu calcifiées n’ont souvent pas besoin de décalcification
Le formol : devient décalcifiant à la longue → formation d’acide formique
Moelle osseuse : fixateur de choix = Helly
Fixateur de routine : Formol
Quels sont les critères pour la decalcification ?
Acides forts
Acides faibles
Résines échangeuses d’ions
Agents chélateurs
Quels sont les critères pour la Fin de la decalcification ?
Procédés physiques (Torsion du tissu, Aiguille, Coupe au bistouri)
Rayons X
Procédés chimiques (Tester le liquide décalcifiant)
Quels sont les critères pour la Neutralisation de l’acide et lavage ?
a- Thiosulfate de sodium ou Lithium 5% : 12 hres;
b- + Lavage à l’eau courante;
c- Mêmes résultats dans 2 bains d’éthanol 50%.
Les acides fort (inorganique)……..
agissent plus rapidement que les acides faibles (< 48 heures)
utilisés pour biopsies (cas urgents)
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-Intolérant;
- Très rapide (le plus rapide);
- Pour éviter formation acide nitreux (HNO2) :
a) → ajoute urée 0,1%;
b) → ou formaldéhyde 10%.
- Pour biopsies urgentes;
- Déconseillé pour colorations des crêtes de moelle
osseuse (coloration Giemsa);
- Arrêter décalcification à temps, sinon altère
colorations
Acide nitrique (HNO3) 5 à 10%
Les Acides faibles (organiques)……..
-temps d’action plus long (jusqu’à 15 jours)
- conservent mieux structures cellulaires et affinités tinctoriales.
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-Décalcifiant de choix;
- utilisé seul en solution aqueuse 5 à 10%, ou tamponnée ou avec formol;
- besoin grand volume de liquide et un changement de la solution toutes les 24 à 48 heures;
- tolérant (mais plus lent) :
a) on peut laisser tissus plus longtemps dans le liquide sans causer de dommages aux tissus.
- si à 25% → aussi rapide que l’acide nitrique mais solution devient trouble;
Acide formique (H-COOH)
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- pour les petites pièces;
- bonne conservation des affinités tinctoriales;
- coloration jaune des tissus → enlevé par blanchiment à l’étape de la coloration (avec carbonate de Lithium 1%).
Acide picrique [C6H2(NO2)3OH]
Quels sont les étapes de la résine échangeuse d’ions ?
1- Mettre le tissu dans la solution décalcifiante;
2- Ajouter une résine à la solution acide;
3- La résine captera et retiendra le calcium libéré par le tissu
Quel méthodes de decalcification est meilleur pour preserver les details cellulaires ?
La résine échangeuses d’ions
La méthode de La résine échangeuses d’ions est tres rapide (< 48h)
Vrai ou faux
Faux
Méthode pas très rapide (peut prendre jusqu’à 20 jours)
Avec la methodes de la résine échangeuses d’ions, il est Impossible de vérifier la fin de la décalcification avec test chimique (le Calcium reste dans la résine).
Vrai ou faux
Vrai
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- Basée sur la migration du calcium par le courant électrique (retrait du calcium);
- 2 à 6 heures de décalcification pour tous les spécimens;
- Doit rincer tissus dans eau alcaline à la fin pour neutraliser les acides (lavage avec eau
seulement n’est pas assez)
L’électrolyse
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-Formation de composés solubles et non ionisés (composés de chélation);
- Combinaison du calcium avec l’EDTA;
- L’EDTA se lie au Calcium pour former des complexes non ionisés et solubles
Les agents chélateurs
Quels méthode de decalcification a une action lente pour les petites pieces et ne donne aucune distortion au tissu?
Les agents chélateurs
