Espectroscopia de masa Flashcards
¿La espectroscopia es considerada una tecnica espectroscopica?
NO es una de dichas técnicas. No utiliza ninguna radiación del espectro electromagnético
(para irradiar la muestra y observar la absorción de dicha radiación).
¿Que caracteristica tiene la tecnica de espectroscopia de masa?
La muestra es ionizada
¿Para que se utiliza la espectroscopia de masa?
Se utiliza para medir la masa o el peso molecular de una molécula ionizada.
• Se obtiene información estructural, midiendo las masas de los fragmentos
producidos cuando se rompe una molécula.
• La más común es la de ionización-electrónica.
¿Que es el ion molecular?
Cuando la molécula
orgánica pierde un
electrón y se convierte
en ión.
¿Que es el peak base?
Es el peak más intenso
en el espectro. Se le
asigna un 100% de
abundancia
¿Que es el radical cationico?
Especie con carga
positiva (+) y con un
número impar de
electrones
¿Fragmentos cationicos?
Cationes formados por la descomposición de un ión molecular. Corresponden a carbocationes estables
Cromatografía de Gases - Espectrómetro de Masas
La columna del cromatógrafo de gases separa una mezcla en fase gaseosa en sus
componentes. El espectrómetro de masas explora el espectro de masas de los
componentes a medida que abandonan la columna.
A medida que la muestra pasa a través de la columna, los componentes más
volátiles se mueven a través de la columna más rápidamente que los componentes
menos volátiles. Los componentes separados dejan la columna en distintos
momentos, pasando a través de la línea de transferencia hacia la fuente de iones del
espectrómetro de masas, donde las moléculas se ionizan y pueden fragmentarse.
¿Que es el MALDI-TOF?
Permite el análisis de biomoléculas
como las proteínas, los péptidos, los azúcares,
los lípidos y moléculas orgánicas grandes
como polímeros, los dendrímeros y
otras macromoléculas que tienden a hacerse
frágiles y fragmentarse cuando son ionizadas
por métodos más convencionales
¿Cual es la finalidad del MALDI-TOF?
Se basa en la identificación de un perfil proteico específico de
cada bacteria
¿Que caracteristicas debe cumplir la matriz en el MALDI-TOF?
La macromolécula es primero implantada en una matriz sólida, que a menudo consiste de un material orgánico, cuya composición dependerá de la muestra a analizar. Se utiliza una matriz para proteger a la biomolécula de ser destruida y para facilitar la vaporización y la ionización
¿Como es el procedimiento para el MALDI-TOF?
La muestra es entonces irradiada con un láser pulsado, como un láser de
nitrógeno.
La energía del láser expulsa iones de la matriz electrónicamente excitados,
cationes y macromoléculas neutros, que crean una densa nube de gas por encima
de la superficie de la muestra. La macromolécula es ionizada por las colisiones y formación de complejos con pequeños cationes.
¿Cuales son los usos del MALDI-TOF?
Es un instrumento muy utilizado en proteómica para la identificación de proteínas, en particular, en la identificación por huella
peptídica de bacterias.
Restricciones: cultivos puros
¿Cuales son las ventajas del MALTI-TOF? En la identificación a partir de la colonia
La técnica MALDI-TOF permite identificar un microorganismo en pocos minutos y de
esta manera adelantar 24-48 h el resultado microbiológico
¿Como es la identificacion a partir de la tecnica MALDI-TOF?
Se basa en análisis del
espectro proteico generado por un microorganismo y la comparación de su
espectro con los perfiles proteicos existentes en la base de datos.
Después del análisis, el software proporciona no solo el resultado de identificación sino
también el grado de fiabilidad de dicha identificación.
Existen 3 principales niveles de fiabilidad:
A, identificación fiable, a nivel tanto de género como de especie.
B, identificación fiable a nivel de género.
C, identificación poco fiable
