Histološke tehnike i analize Flashcards
koraci izrade histološkog aparata
- uzimanje uzorka
- fiksacija
- uklapanje
- rezanje i montiranje
- bojenje
uzimanje uzoraka i fiksacija
- uzimanje uzoraka
- za histu -> zdrava tkiva -> za vrijeme kirurskog zahvata ili sa trupla(oprezno)
. - fiksacija
- cilj -> održati strukturu što vjernije živom -> fiksativi spriječavaju autolizu i povećavaju afinitet za boje
- formalin, alkohol, kalijev bikromat -> najčešće se koriste kombinacije više njih
prije uklapanja
- ispiranje fiksacijskog sredstva
- dehidracija
- stavljanje preparata u niz otopina različitih konc. alkohola
- stavljanje u intermediji -> ispire se alkohol, daje se prozirnost, otapalo za uklapanje
uklapanje
- svrha -> stvrdnuti komadić tkiva da bi se ono moglo rezat na tanke rezove
- sredstva: parafin ili celoidin
.
Parafin: - uzorak se ubaci u tekuću otopinu parafina(ima temp tališta parafina) -> parafin ispuni tkivo -> posuda s tkviom se izvadi -> parafin se stvardnuo pa time i uzorak -> parafinski blok
- brzo, dobivaju se tanki rezovi ali promijenjena topografska struktura zbog brzog rpdiradnja oparafina
.
Celoidin: - uzorak se ubaci u celoidinu otopinu s eter-alkoholom -> na sobnoj temp -> celoidin postepeno prožima tkivo dok eter ishlapi -> celoidinski blok
- sporije i dobivaju se stvarni odnosi u stanici
rezanje i montiranje
Parafinski blok
- tanki rezovi -> rezanje mikrotom
- predmetno staklo -> smjesa bjelanjaka i glicerina za lijepilo i prekrimo vodom -> grijanje -> voda ispari, rez ostaje priljepljen za staklo -> prije bojenja deparafiniranje alkoholom -> sad se boja
Celoidinski blok
- rezanje mikrotom uz vlaženje alkoholom
- bojanje -> dehidracija -> bistrenje -> predmetno staklo -> kanadski balzam -> pokrovno stakalce
bojanje - općenito
- cilj -> istaknuti i razlučiti pojedine strukturne komponente -> da se olakša analiza
- boje -> neutralne soli s kiselim i bazičnim radikalima
- bazična boja -> boje se bazofilne tvari tj kisele -> DNA, RNA -> jezgra, ribosomi, međustanilna tvar
- kisela boja -> boje se acidofilne tvari tj bazične -> citoplazma, vezivo
- eoizin i hemalaun
bojanje eozinom i hemalaunom
Eozin
- kisela boja -> boji acidofilne tj bazične tvari -> u crveno
Hemalaun
- hematoksilin + kalijev alanuan
- bazična boja -> kisele tvari boji plavo
druge boje osim eozina i hemalauna
- pikrinska kiselina -> žuto boji acidofilne tvari
- orange G -> boji krvne žile narančasto
- orcein + rezorcin-fuksin = po Weighertu -> elastična vlakna smeđe i ljubičasto
posebni postupci izrade histološkog preparata
- mikrotom na smrzavanje -> mijenja se kemijski sastav preparata -> brzo izvođenje -> kod operacijskih zahvata
- dekalcinacija -> za tvrda tkvia kosti i zube -> stavlja se tkivo u dušićnu ili pikrinsku kiselinu
- impregnacija -> soli srebra ili zlata -> tkivo redcuira metal pa se ono taloži -> živčano tkivo