I.2. Microscopie et préparation des échantillons

Question 1

réfraction d’un rayon lumineux

Answer 1

dévié à l’interface entre les deux milieux par arpport à sa direction d’incidence
quand passe d’un milieu à l’autre

Question 2

indice de réfraction

Answer 2

mesure combien un milieu ralentit la vitesse de la lumière

Question 3

la direction et l’angle de déviation sont déterminés par

Answer 3

les indices de réfraction des deux milieux formant l’interface

Question 4

lentille convexe

Answer 4

focalise des rayons lumineux en un point spécifique, le foyer

Question 5

distance focale

Answer 5

distance entre le centre de la lentille et le foyer

Question 6

la puissance d’une lentille dépend de

Answer 6

la distance focale

plus la distance focale est courte, plus on agrandit un objet

Question 7

5 types de microscopes optiques

Answer 7

à fond clair
à fond noir
à contraste de phase
confocal
à fluorescence

Question 8

microscope composés

Answer 8

image agrandie est formée par 2 lentilles ou plus

Question 9

microscope à fond clair

Answer 9

utilise la lumière
permet d’observer des objets ou des être vivants entre 1µm et 1mm
miroirs pour dévier les rayons lumineux dans la trajectoire choisie
image foncée sur fond brillant

Question 10

résolution d’un microscope

Answer 10

capacité d’une lentille à séparer ou distinguer des petits objets qui sont près l’un de l’autre, donc à rendre l’image plus nette

Question 11

formule résolution d’un microscope

Answer 11

d=0.5gamma / n sin teta

Question 12

ouverture angulaire

Answer 12

teta

moitié de l’angle du cône de lumière qui vient de l’échantillon et pénètre dans la lentille

Question 13

ouverture numérique

Answer 13

n sin teta

Question 14

objectif à immersion

Answer 14

huile à immersion à un indice de réfraction similaire au verre, donc augmente la résolution car on substitue l’air pour l’huile

Question 15

distance de travail

Answer 15

distance entre la surface antérieure de la lentille et la surface de la lame couvre-objet/l’échantillon après la mise en point

Question 16

microscope à fond noir

Answer 16

autour de l’échantillon apparait noir, tandis que l’objet est brillant
utilisé pour observer des organismes vivants non colorés ou peu contrastés

Question 17

microscope à contraste de phase

Answer 17

transforme de légères différences d’indice de réfraction et de densité cellulaire en différences d’intensité lumineuses observables
bon pour cellules vivantes

Question 18

microscope confocal

Answer 18

rayon laser focalisé touche un point de l’échantillon

ordinateur compile les images générées pour reconstruire une image 3D

Question 19

microscope à fluorescence

Answer 19

éclaire l’échantillon avec une lumière UV, violette ou bleue
échantillons contrastés par un colorant appelé fluorochrome
image de l’objet résultante de la lumière fluorescente émise par le spécimen

Question 20

buts de la préparation des échantillons

Answer 20

augmenter la visibilité
accentuer les particularités morphologiques spécifiques
préserver les échantillons en vue d’études ultérieures
fixés et colorés

Question 21

fixation d’un échantillon

Answer 21

procédé par lequel les structures internes et externes des cellules et des organismes sont conservées et fixées en place

Question 22

2 types de fixation

Answer 22

à la chaleur

chimique

Question 23

fixation à la chaleur

Answer 23

conserve la morphologie générale mais pas les structures intracellulaires

Question 24

fixation chimique

Answer 24

protège les structures cellulaires fines et la morphologie des microorganismes plus grands et plus délicats

Question 25

coloration

Answer 25

rend les structures internes et externes de la cellule plus visibles en augmentant le contraste avec l'arrière-plan

Question 26

deux propriétés en communes à tous les colorants

Answer 26

possèdent des groupes chromophores | peuvent se lier au cellules par interactions ionique, covalente ou hydrophobe

Question 27

groupes chromophores

Answer 27

doubles liaisons conjuguées, donnent la couleur au colorant

Question 28

coloration simple

Answer 28

un seul colorant est utilisé | basique ou acide

Question 29

colorant basiques

Answer 29

possèdent des charges positives qui se fixent à des molécules chargées négativement crystal violet, bleu de méthylène, safranine

Question 30

colorants acides

Answer 30

possèdent des charges négatives qui se fixent à des molécules chargées positivement éosine, rose bengale

Question 31

coloration différentielle

Answer 31

distingue les microorganismes sur la base de leur coloration | Gram, acido-alcoolo-résistante

Question 32

coloration gram

Answer 32

méthode de coloration la plus largement utilisée en bactériologie divise les bactéries en gram + (violet) et gram - (rouge)

Question 33

4 étapes coloration gram

Answer 33

fixation coloration primaire (violet de cristal) lavage et décoloration contre coloration (safranine)

Question 34

coloration alcoolo-résistante

Answer 34

particulièrement utile pour identifier des espèces acido-alcoolo-résistantes de genre Mycobactérium rouge = acido-alcoolo-résistante bleu = non acido-alcoolo-résistante

Question 35

3 étapes de coloration alcoolo-résistante

Answer 35

chauffage avec mélange de fushine basique et phénol décoloration avec un mélange alcool-acide contre coloration avec bleu de méthylène

Question 36

coloration négative

Answer 36

on utilise souvent de l'encre de chine ou de la nigrosine pour révéler les capsules qui entourent certaines bactéries

Question 37

coloration des endospores

Answer 37

coloration de Shaeffer-Fulton | endospores apparaissent vertes/bleu dans une cellule rouge/rose

Question 38

coloration des flagelles

Answer 38

un mordant est utilisé afin d'épaissir les flagelles avant de les colorer

Question 39

microscopie électronique

Answer 39

un faisceau d'électrons est utilisé pour produire une image la longueur d'onde d'un faisceau d'électron est plus courte que celle de la lumière, résultant en une meilleure résolution

Question 40

différents outils de microscopie électronique

Answer 40

microscope électronique à transmission (TEM) microscope électronique à balayage cryotomographie électronique microscope à balayage de sondes

Question 41

microscopie électronique à transmission

Answer 41

électrons sont diffractés lorsqu'ils traversent l'échantillon faisceau d'électrons focalisé par lentilles magnétiques pour former une image visible agrandie de l'échantillon sur un écran fluorescent doit être sous vide échantillons très fins

Question 42

ombrage métallique

Answer 42

TEM | échantillon enduit d'une fine couche de métaux lourds

Question 43

cryodécapage

Answer 43

TEM | échantillons congelés sont fracturés le long des lignes de plus grande fragilité

Question 44

microscopie électronique à balayage

Answer 44

produit une image à partir des électrons réfractés par la surface de l'objet plutôt qu'à partir des électrons transmis produit une image 3D de la surface du micro-organisme avec une grande profondeur de champ

Question 45

photomultiplicateur

Answer 45

dans électronique à balayage | amplifie la lumière des électrons secondaire et donne l'effet de profondeur

Question 46

cryotomographie électronique

Answer 46

échantillons plongés dans un liquide très froid et observés alors qu'ils sont encore congelés préserve l'état natif des structures cellulaires

Question 47

2 types de microscopie à balayage de sonde

Answer 47

à effet tunnel | à force atomique

Question 48

microscope à effet tunnel

Answer 48

détermine les caractères de surface en balayant la surface de l'objet avec une sonde ponctuelle grossissements de 100 milions atomes

Question 49

microscope à force atomique

Answer 49

déplace une sonde effilée à la surface de l'échantillon tout en maintenant constant la distance entre la pointe de la sonde et cette surface étude de surfaces qui ne conduisent pas bien l'électricité