Immunologiska metoder Flashcards
(10 cards)
Vad menas med affinitet?
Mått på dragningskraft mellan ett antigen och en antikropp exempelvis.
Vad menas med aviditet?
Styrkan av bindningen mellan exempelvis ett antigen och en antikropp.
Vad är immunoprecipitation?
Immunologiskt teknik där man fäller ut ett proteinantigen från en lösning genom att använda en antikropp med affinitet till just det antigenet.
Kan vara fördelaktigt då man vill analysera förekomsten av ett specifikt protein i ett prov där många finns.
Vad är immunoblotting?
Då man exempelvis efter en elktrofores överför proteiner till ett membran på vilket man sedan kan detektera proteiner med antikroppar.
Vad är immunoradial diffusion?
Immunologisk teknik som används för att kvantifiera antigen i en biologisk lösning. Fungerar ungefär som en diskdiffusion.
En gel är coated med antigen och om antikroppar binder in fås ett klart område som kan avläsas.
Vad är:
Direkt-
Indirekt -
Sandwich- ELISA?
Direkt = Yta är coated med antigen. Antikroppar om de finns binder direkt till antigen.
Indirekt = Yta är coated med antigen. Primärantikropp binder in, konjugerad sekundärantikropp får binda in.
Sandwich = Yta är coated med antikropp. Antigen om det finns i prov binder till antikroppen på ytan. En sekundär primärantikropp binder till antigenet och en konjugerad sekundärantikropp binder till primärantikroppen.
Vad är FACS?
Fluorescence activated cell sorting. Speciell typ av flödescytometri som kan separera heterogena blandningar av celler.
Vad är ELISPOT?
Enzyme-linked immunospot essay.
Detektion av cytokiner i cytokinproducerande celler.
Cytokinspecifika antikroppar läggs på en yta. Aktiverade T-celler adderas till brunnarna. Cytokiner som T-cellerna producerar fångas av antikropparna. Dessa visualiseras sedan med en konjugerad sekundärantikropp som fläckvis ger färgomvandling.
Vilka är för- och nackdelarna med immunologiska metoder?
Fördelar: Kommersiella kit finns, specificitet och känslighet är höga, snabba metoder.
Nackdelar: Dyra metoder, falska resultat kan fås om antigen förändras.
Vad är luminex?
Luminex är en metod som likt ELISA detekterar antigen i pateintprov. En bead är täckt med captureantikroppar med en -OH grupp som är mycket reaktiv och binder till de flesta capture molekyler. Man kan sedan välja capture molekyl beroende på vilket målproteinet är. En reporter kommer sedan binda till det bundna målproteinet och kan då detekteras.
