Inst 5- PCR Flashcards
(9 cards)
Vad betyder förkortningen PCR?
Polymerase Chain Reaction – en metod för att amplifera DNA.
Varför använder man PCR? I vilka områden används PCR?
För att snabbt skapa många kopior av DNA, används i forskning, diagnostik och rättsmedicin.
Vilka ämnen ingår i reaktionsblandningen?
DNA, primers, DNA-polymeras, nukleotider (dNTPs) och buffert.
Vad är en primer? Varför behöver man två primrar?
Kort DNA-sekvens som binder till mål-DNA, en primer för varje sträng.
Vanligtvis består en PCR av en serie av 20-40 upprepade temperaturförändringar, så kallade cykler. En och varje cykel består av tre steg, vilka? Beskriv hur PCR fungerar i varje steg.
Denaturering (94°C) – separerar strängar, annektering (55°C) – primrar binder, förlängning (72°C) – polymeras syntetiserar DNA.
I PCR används det DNA-polymeras (Taq-polymeras) istället för det mänskliga DNA-polymeras, varför?
Taq-polymeras tål hög temperatur och krävs för denatureringen.
Vilka är de huvudsakliga stegen i PCR?
De tre stegen i PCR är denaturering (separera DNA-strängar), annealing (bindning av primers) och förlängning (syntes av nytt DNA).
Vad är en termocykler?
En termocykler är en maskin som automatiskt reglerar temperaturcyklerna som krävs för PCR-processen.
Vad är denaturering i PCR?
Denaturering är det första steget i PCR, där DNA-strängarna separeras genom att upphettas till en hög temperatur.
