Intro Flashcards
(10 cards)
O que significa a sigla CRISPR?
Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats” (Repetições Palindrômicas Curtas Agrupadas e Regularmente Interespaçadas).
Refere-se a sequências de DNA bacteriano que armazenam “memórias” de vírus invasores para defesa futura.
Qual a função natural do sistema CRISPR-Cas em bactérias e archaea?
Funciona como um sistema imune adaptativo, permitindo que esses microrganismos detectem e cortem o DNA de vírus (bacteriófagos) que os infectaram previamente, conferindo resistência.
Qual é o papel da enzima Cas9 no sistema CRISPR?
A Cas9 é uma endonuclease que corta o DNA alvo em locais específicos, guiada pelo RNA guia (gRNA). É a “tesoura molecular” da edição genética.
Como o RNA guia (gRNA) funciona no sistema CRISPR-Cas9?
O gRNA é uma molécula sintética que combina:
- crRNA (sequência complementar ao DNA alvo) +
- tracrRNA (que se liga à Cas9).
Juntos, direcionam a Cas9 para o gene que será editado.
Quais são as principais aplicações da tecnologia CRISPR-Cas9?
Edição de genes em pesquisas científicas.
Terapia gênica (ex.: corrigir mutações em doenças como anemia falciforme).
Agricultura (plantas resistentes a pragas).
Biotecnologia (microrganismos modificados).
Qual a diferença entre edição, silenciamento e ativação gênica usando CRISPR?
Edição: Modificação direta do DNA (ex.: correção de mutações).
Silenciamento: Bloqueio da expressão gênica (usando Cas9 inativa + repressores).
Ativação: Estimulação da expressão gênica (usando ativadores ligados à Cas9).
O que são edições “off-target” e por que são uma preocupação?
São cortes não intencionais em regiões do DNA semelhantes ao alvo, que podem causar mutações perigosas. Motiva o desenvolvimento de versões mais precisas da Cas9 (ex.: Cas9 de alta fidelidade).
Quais são os componentes mínimos necessários para um sistema CRISPR-Cas9 funcionar in vitro?
Enzima Cas9 (ou variante como Cpf1).
RNA guia (gRNA).
DNA alvo (com sequência complementar ao gRNA).
Como o CRISPR-Cas9 se compara a outras técnicas de edição genética, como TALENs e ZFNs?
CRISPR: Mais rápido, barato e versátil (usa RNA para direcionamento).
TALENs/ZFNs: Requerem proteínas customizadas para cada alvo, sendo mais trabalhosas e caras.
Quais são os desafios éticos associados ao uso da tecnologia CRISPR em humanos?
Edição de linhagem germinativa (muda genes hereditários, com impactos desconhecidos).
“Bebês designer” (preocupações com eugenia).
Desigualdade no acesso às terapias.