manipulacion de genes Flashcards
(21 cards)
caracteristicas de modificaciones genticas
al azar, ectopicas, inesperadas y con patrones de espresión suboptimos
organismos que han dado soluciones para modificar el genoma eucariotico
procariotes
tecnicas para modificar genes en eucariotas
DNA recombinante
microinyeccion de DNA en pronucleos
modificaciones en celulas madre embrionarias
Microinyeccipn de DNA en pronucleos
se inserta el gen en un vector Se realiza una microinyeccion en el pronucleo del huevo fertilizado y se implanta en madre sustituta
problemas con la micorinyeccion del DNA
baja tasa de supervivencia de huevos inyectados
insercion ALEATORIA del gen en cromosomas
expresion insuficiente del gen
modificaciones geneticas en celulas madre embrionarias
manipulacion por recombinacion homologa tras obtener celulas madre desde blastocistos, despues reintroduciendolos
transferencia nuclear para clonacion
se transfiere el nucleo de una celula somatica a un ovulo sin nucleo, ambos en etapa G0/G1
CRISPR CAS
clustered regularly interspaced short palindromic repeats : repeticiones palindromicas cortas agrupadas regularmente interespaciadas y proteínas asociadas (cas)
como funciona el CRISPR CAS
- fragmentos virales se incorporan al genoma bacterano con secuencias palindromicas cortas intersepaciadas
- transcripción y generacion de pre-crRNA (RNA no codificante)
- formacion de crRNA maduro
- ensamblaje con proteínas Cas para defensa
aplicaciones de sistema CRISPR CAS
terapias genicas, terapia celular, edicion genetica en embriones humanos
problemas que presenta la creacion de animales transgenicos mediante microinyeccion
pocos huevos inyectados sobreviven
el gen se inserta al azar
no todas las celulas del animal reciben el gen
el gen no se expresa suficiente
como permite CRISPR CAS el diseño de terapias genicas
permite corregir mutaciones especificas como en la distrofia muscular Duchenne
aplicaciones de CRISPR CAS en terapia celular
modificaciones en vivo de celulas para reintroducirlas, como en el tx de la enfermedad de Parkinson o de Huntington
aplicaciones de la edicion de ovulos humanos con CRISPR CAS
corregir genes defectuosos en mujeres que tienen hipoacusias hereditarias
de donde se obtienen las celulas madre embrionarias para modificaciones geneticas
de los blastocistos
animales transgenicos
animales que han recibido genes externos mediante tecnicas de manipulacion genetica
como se mantienen las celulas madre embrionarias en cultivo
con factores inhibitorios de la diferenciacion
Primer paso de CRISP Cas
fragmentos de DNA viral o plasmidos se incorporan al genoma bacteriano con secuencias palindromicas
segundo paso de CRISPR CAS
transcripcion y generacion de RNA no codificante procesado por proteínas CAS
ultimos pasos de CRISP Cas
formacion de crRNA maduro y ensamble con proteínas Cas