pruebas diagnosticas Flashcards
pruebas para proteínas circulantes
Western
ELISA
pruebas para proteínas en células
citomertrías de flujo
Pruebas para RNA
northern
RT-PCR
pruebas para DNA
southern
PCR
Secuenciacion
Sonda ADN
para ver una secuencia específica de un gen
PRIMER
secuencia de nucleótidos
Enzimas de restricción
proteínas que cortan ADN
anticuerpos
detectan proteínas
Tipos de ELISA
Directo, indirecto y Sanwich
ELISA indirecto
usa un anticuerpo secundario marcado que se une al primario
Anticuerpo primario: derecta directamente antigeno
Anticuerpo secundario: detecta union de antígeno anticuerpo
ELISA directo
un anticuerpo primario marcado con enzima se une al antigeno de interes
ELISA tipo sandwich
usa un anticuerpo de captura y otro de detección para captar el antígeno
Uso de citometría de flujo
identificación, cuantificación y clasificación de celulas en una muestra
tamaño y proteínas
marcadores CD
proteínas en superficie celular que identifican distintos tipos de célula
parámetros de la citometría de flujo
fluorescencia, tamao, granularidad
Enfermedades en las que se usa la citometría de flujo
Leucemias y VIH
Southern Blot
detecta secuencias específicas de ADN
Cualitativo, para mutaciones grandes
ELISA
para proteínas circulantes, cuantitativo
Northern blot
detecta secuecias específicas de ARN
cualitativo
Western Blot
detecta proteínas específicas
cualitativa: la electroforesis muestra el tamaño
que detectan los microarreglos
expresión génica y variaciones geneticas
Diferentes tipos de gen en una misma muestra
preparación de muestra para microarreglos
se extrae mRNA, se convierte cDNA y se marca con fluorescencia
analisis de datos en microarreglos
escaner laser detecta la fluorescencia en cada zona del chip
Objetivo de PCR
amplificar fragmentos específicos de ADN
No detecta tamaño, solo si hay gen y a veces cuantifica