Manipulación de genes: análisis de ác. nucleicos Flashcards
Es el primer paso para los estudios de biología molecular y para las técnicas de DNA recombinante, secuenciación y mutagénesis
Extracción de DNA
Fuente de ácidos nucleicos
- Sangre
- Suero
- Biopsia
- Plasma
- Orina
- Heces
- LCR
- Líquiso sinovial
- Líquido amniótico
- Esputo
- Semen
- Raspado bucal
- Folículo capilar
- Etc
¿De qué depende la elección del método de extracción del DNA?
Del tipo de ác. nucleico que se va a extraer (ej: RNAm), del organismo de origen de esos ác. nucleicos (ej: animal) y de la fuente del ác. nucleico (ej: sangre)
Pasos para la extracción del DNA (6)
- Lisis de la célula
- Separación
- Purificación
- Precipitación
- Lavado
- Disolución
Estudio por el que se hace pasar un haz de luz a través de la muestra
Electofotometría
En la electofotometría, mientras más luz se absorba…
Mayor concentración
¿Cuánta luz puede absorber el DNA y RNA?
260nm
¿Cuánta luz absorben las proteínas?
280nm
¿Cuánta luz absorbe el fenol?
270nm
Unión específica de colorantes fluorescentes al ácido nucleico
Fluorometría
Colorante utilizado en fluorometría
Hoechst 33258
