Mikro Flashcards
(90 cards)
- Regulacija metabolizma kod prokariota
= Bazira se na regulaciji genske ekspresije
= Konstitutivna ekspresija
= Inducibilna ekspresija - ekspresija gena koja je u skladu sa trenutnim potrebama ćelije
- Regulatorni proteini
- Najznačajniji signal koji reguliše ekspresiju = količina nutrijenata u spolj. sredini
= Regulatorni proteini - regulatorne sekvence
- Aktivatori - Pojačivači
- Represori - Operatori (prigušivači u promotorima)
Represori
= Mehanizmi:
1. Fizička blokada vezivanja RNK pol za promotor - češće
2. Sprječavanje prelaska RNK pol. iz zatvorene u otvorenu konformaciju (nakon vezivanja za promotor)
= Lac operon
- Lac represor
> Inaktivira ga alolaktoza, koja označava prisustvo laktoze, a odsustvo glukoze
= Represori kojima je potreban korepresor za aktivaciju
- Korepresor ugl. krajnji produkt neke reakcije -> negativna povratna sprega
= Enzimska represija - vid regulacije gdje se enzimi sintetišu samo ako nema supstrata - sve dok ima supstrata, sinteza enzima inhibirana
- Kod biosinteze (ima enzima samo ako nečega fali)
- Inicirana korepresorima (ima dovoljno produkta -> nisu potrebni enzimi za biosintezu -> nema sinteze samih enzima)
Aktivatori
= Mehanizmi:
1. Vezivanje jednim domenom za DNK, drugim za RNK pol - pomoć u regrutaciji - najčešće
2. Vezivanje za RNK pol. nakon njenog vezivanja za promotor - promjena iz zatvorene u otvorenu konformaciju
= Aktivatori kojima je potreban inducer za aktivaciju
- Lac operon
> Aktivator - CAP protein
> Inducer - cAMP (kad je povećana količina usljed nedostatka glukoze, vezuje se za CAP, koji je aktivator)
= CAP protein - regulacija ekspresije velikog broja operona u prokariotskom genomu
= Enzimska indukcija - enzimi se sintetišu samo ako je supstrat prisutan
- Kod katabolizma
- Inicirana inducerima
- Opšte osobine strukture i životnih ciklusa virusa, plake virusa i određivanje brojnosti
Opšte osobine
= Virusi - obligatni intracelularni paraziti i najmanji MO
- Metabolički inertni van ćel. domaćina
= Građa:
- Nukleinska kis.
- Proteinski omotač (kapsid)
- (ponekad) dodatni omotač ćelijskog porijekla (animalni virusi)
= Virion = NK + proteinski kapsid
- Kad ima dodatni omotač - nukleokapsid
= Nukleinska kiselina (genom):
- Jednolančani/dvolančani
- Linearni/kružni
- RNK/DNK
= Jednolančani genomi:
(+) lanac - identična sekvenca kao iRNK -> odmah se translatira
(-) lanac - sekvenca komplementarna iRNK -> ne translatira se odmah
= RNK virusi - kraći genomi od DNK virusa
= Neki virusi mogu imati i DNK i RNK fazu, ali nikad istovremeno u virionu
= Proteinski omotač (kapsid)
- Kapsomere - proteinske subjedinice
- Veličina genoma -> složenost građe
- Samoasembliranje - povezivanje kapsomera u kapsid je spontan proces
= Dodatni omotač - od fosfolipida, porijeklom od ĆM domaćina
- Animalni virusi napuštaju ćeliju pupljenjem, pri čemu dobijaju omotač
- U njemu virusni proteini koji prepoznaju novog domaćina
= Virusni enzimi
- Neki virusi sintetišu sopstvene enzime, pored onih koje koriste od domaćina
- Lizozimi
- RNK replikaza (RNK-zavisna RNK pol. - koriste je (-)RNK virusi)
- Reverzna transkriptaza (RNK-zav. DNK pol.)
- Neuraminidaza (virus influence)
Podjela i klasifikacija virusa
= Klasifikacija - na osnovu arhitekture genoma i načina replikacije
= Podjela virusa:
- Prema domaćinu kog napadaju
> Arhea
> Bakterijski (bakteriofagi)
> Virusi eukariota (animalni, biljni, protozoa, gljive)
- Prema simetriji kapsida
> Spiralni - ugl biljni
> Iksoedarni - ugl. životinjski
> Kompleksni - u pravom smislu bakteriofagi
» Glava iksoedarna, repić spiralan, dodatne strukture - bazalna ploča, kukice za pričvršćivanje
Životni ciklus virusa
= Virus ne uspije da inficira domaćina - abortivna infekcija
= Lizogeni ciklus
- Lizogena konverzija
- Lizogena indukcija
= Litički ciklus
= Virulentni i umjereni bakteriofagi
Plake virusa i određivanje brojnosti
= Pri zasijavanju u Petri šolju, potrebno je da odnos broja faga i broja bakterija - multiplicitet infekcije (MOI) - bude oko 0,01
- Veći MOI -> liziranje svih bakterija, povećanje vjerovatnoće adsorpcije više virusnih čestica na 1 bakteriju
= Formiran bakterijski tepih sa plakama -> grupacijama umnoženih bakteriofaga koji potiču od jednog viriona
- Svijetle plake - pokazatelj isključivo litičkog ciklusa (virulentni fagi) -> samo lizirane ćelije i bakteriofagi
- Mutne plake - prisutan i lizogeni i litički ciklus (umjereni fagi) -> lizirane ćelije, bakteriofagi + lizogene bakterije
= Brojnost:
br. faga/ml = br. plaka/(razređenje * zapremina)
- Adaptivni imunitet - B ćelije i antitijela
= Antitijela - rastvorljivi proteini koje proizvode B ćelije i plazma ćel. kao odg. na izloženost antigenima
- 1 antitijelo = 1 antigen
- Imunoglobulini -> 2 teška + 2 laka lanca
> Vezani disulfidnim vezama - heterodimer
> Sva 4 imaju po 1 C (const) domen i 1 V (varijabilni) domen -> V domeni teškog i lakog lanca se različito kombinuju i prave kombinacije specifične za antigen
= IgG - najčešći imunoglobulin u cirkulaciji
- Visoka konc - sek. imunski odg.
- 2 identična mjesta za 2 epitopa
= IgA - u pljuvačkoj, suzama, mukoznom sekretu GIT, urinarnog, respiratornog trakta
= IgM, IgD, IgE
= Većina antitijela ne ubija ćel. patogena -> blokira interakciju između ćel. patogena/njihovih produkata i ćel. domaćina
= Neutralizacija - blokiranje vezivanja toksina za rec. na domaćinu antitijelima
= Vezivanje antigena za antitijelo -> supstrat za Fc receptore fagocita
B ćelije
= Specijalizovani limfociti koji imaju na površini antitijela sa funkcijom receptora BCR
= Proizvode antitijela
= Rec. BCR veže antigen -> fagocitoza patogena B ćelijom -> izlaganje njihovih antigena na površini -> kompleks sa MHII -> prezentacija Th2 ćel. -> proizvodnja citokina -> stimulacija proliferacije antigen reaktivnih B ćelija -> diferencijacija nekih u plazma ćelije koje proizvode rastvorljiva antitijela
= Humoralni imunitet - primarni imunski odgovor posredovan antitijelima
= Memorijske B ćelije -> sekundarni imunski odgovor -> brzo povećanje konc. antitijela
= Imunološko pamćenje - osnova za vakcinaciju
- Sinteza ATP kod razl. metaboličkih tipova
= Nemogućnost korišćenja izvora energije direktno -> konverzija u jedinjenja bogata energijom (fosfatna)
- Hidroliza njihovih hem. veza -> oslobađanje energije
= ATP - najznačajnije energijom bogato jedinjenje
- Fosfoanhidridne veze između fosfatnih grupa - hidroliza -> energija
= ATP, ADP, AMP - sva tri prisutna u ćel - njihov odnos kao indikator energetskog stanja
= 3 načina sinteze ATP-a:
- Fosforilacija na nivou supstrata
- Katabolički procesi (npr. fermentacija)
- ADP preuzima energiju od drugih fosfatnih jedinjenja -> ATP (direktno) - Fotofosforilacija
- Organizmi koji vrše fotosintezu
- Svijetla faza fotosinteze -> konverzija svjetlosne energije u hemijsku -> ADP+Pi = ATP
> Troši se energija za formiranje fosfoanhidridne veze - Oksidativna fosforilacija
- ADP + Pi = ATP tokom disanja, pri reoksidaciji redukovanih intermedijernih nosača elektrona (NADH, FADH2)
- ATP sintaza
= Druga jedinjenja bogata energijom:
- Bogatija od ATP:
> Fosfoenolpiruvat
> 1,3-difosfoglicerat
> Acetil-fosfat
> Acetil-CoA
- Siromašnija od ATP:
> Glukozo-fosfati
> Glicerol-fosfati
- ATP posreduje kao nosač između njih
- Viroidi i prioni
= Subvirusne infektivne čestice
= Nekompletni virusi - nedostaje proteinski kapsid ili NK
= Oboljenja biljaka i životinja
Viroidi
= Cirkularni jednolančani RNK sa međusobno komplementarnim regionima -> struktura ukosnice
- Stabilnost RNK u spolj. sredini
= Ne kodiraju nijedan protein - potpuna zavisnost od proteinske mašinerije domaćina
= Replikacija - RNK replikaza domaćina, model kotrljajućeg obruča (konkatemeri)
- Viroid ribozimskom aktivnošću sam razdvaja konkatemere
- Repliciraju se u nukleusu ili u hloroplastima (sistematski karakter)
= Novi viroidi se prenose do susjednih ćel. plazmodezmama
= Biljni patogeni
- Utiču na rast
= Različiti viroidi - visok stepen homologije -> srodnost
= Nastali od regulatornih RNK koje interferiraju sa norm. ekspresijom biljnih gena
Prioni
!72. Patogenost i virulencija
Pogledati sa preze
- Taksije, regulacija dvokomponentnim sistemom
= Taksija - vid usmjerenog kretanja ka signalnoj supstanci (atraktant) ili od signalne supstance (repelent)
Hemotaksija
= Hemoreceptor detektuje prisustvo -> signalna kaskada
- Hemoreceptor -> Senzor kinaza (autofosforilacija) -> Fosforilacija citoplazmatičnog regulatora odgovora -> Fli protein, koji utiče na promjenu smjera rotacije flagele (u smjeru kazaljke na satu, prije toga se pod uticajem Mot proteina kretala suprotno od smjera kazaljke na satu) -> Promjena smjera kretanja
= Atraktanti - nizak nivo fosforilacije (rijetko dovode do promjene pravca kretanja)
= Repelenti - česta promjena kretanja pravca, sve dok se ćelija ne udalji od repelenta
= Fototaksija - kretanje u odnosu na izvor svjetlosti
- Skotofobotaksija - težnja da fototrofi “bježe” od mraka - vraćaju se na talasnu dužinu optimalnu za vršenje fotosinteze
> Energetsko stanje ćelije = signal koji obavještava ćel. da se našla u mraku
- Prava fototaksija - ćel. ima fotoreceptore u membrani
= Aerotaksija, osmotaksija, hidrotaksija…
- Pregled animalnih virusa i posljedice infekcije animalne ćelije virusom
Pogledati posljedice infekcije u idućih par pitanja
Litički proces - jel nužno rezultuje u liziranju ćel, ili je pupljenje? - vrv neki jedno neki drugo al ne kontam
Perzistentna infekcija - jel ove virusne partikule koje se produkuju ne napuštaju ćeliju, ako je već ne liziraju, ili je to ovo pupljenje?
- Simbioze među mikroorganizmima
= Konzorcijumi i lišajevi
- Opšte osobine strukture i životnih ciklusa virusa, plake virusa i određivanje brojnosti x2
vratiti se na karticu 2
- Mikrobiologija okeana
Užas živi
= Pelagijski vs priobalni mikroorganizmi
Oksinogeni fototrofi
= Prochlorococcus - bakterija
= Trichodesmium - cijanobakterija
Anoksigeni fototrofi - Alphaproteobacteria
- Respiratorne infekcije
- Uticaj pH na rast mikroorganizama
= Većina MO - neutrofili (pH 6-8)
= Acidofili
- Ugl. gljive + bakterije Lactobacillus, Thiobacillus + arhea Sulfolobus
- Ekstremni acidofili (pH 2) - Acidithiobacillus
= Alkalofili
- Okeani, slana jezera, bazno zemljipte
- Arhee i bakterije
> Bakt. Bacillus firmus - koristi Na+ motornu silu umjesto protonske kao izvor energije
= Svi MO moraju da održavaju neutralan pH unutar ćelije zbog biomakromolekula
- Ekstremni acidofili ili alkalofili ne mogu postići sasvim neutralan pH (maks 3 jedinice razlike)
> Razvili alternativne puteve dobijanja energije van oksidativne fosforilacije i protonske motorne sile (npr Bacillus firmus)
> + Adaptacije kao način zaštite unutarćel. mol.
= Gajenje u laboratorijskim uslovima - dodavanje pufera u medijum
- Egzotoksini i endotoksini
Ima stvari koje mi nisu sto posto čiste ali nije strašno
- Primjena MO u industrijskoj proizvodnji
- Sinteza peptidoglikana
= Murein
= Gradivna jedinica: disaharid-tetrapeptid
- Disaharid:
> N-acetilglukozamin
> N-acetilmuraminska kiselina
> Vezane beta-1,4-glikozidnom vezom
- Tetrapeptid:
> L-Ala
> D-Glu
> Diaminopimelinska kiselina/Lys
> D-Ala
= Rast ćelije -> nove komponente -> inkorporiraju se
- Autolizin - liza beta-1,4 glikozidnih veza -> pukotina -> umetanje monomera
= Sinteza - u ćel.
- Prekursori koji se nosačima iznose u spoljašnju sredinu
= UDP - citoplazmatični nosač prekursora
= Baktoprenol-fosfat - membranski nosač prekursora
1) N-acetil muraminska kis. se veže za UDP
2) Dodavanje 5 AK -> pentapeptidni intermedijer (Parkov NT)
3) Prenošenje intermedijera na membranski nosač
4) N-acetilglukozamin se vezuje za UDP
5) N-acetilglukozamin se prenosi na Parkov NT -> disaharid-pentapeptid
5.1) - Kod Staphylococcus aureus (G+) se dodaje i pentaglicinski međumost na prekursor
6) Membranski nosač prenosi prekursor u spoljašnju sredinu -> transglikozilacija -> ugradnja monomera u rastući lanac peptidoglikana
7) Umrežavanje susjednih lanaca peptidoglikana
a) G- -> Transpeptidacijom (diaminopimelinska kiselina jednog peptidnog mosta i pretposljednji D-Ala drugog)
b) G+ -> Transpeptidacijom se povezuju pentaglicinski međumostovi
= Penicilin sprječava transpeptidaciju (umrežavanje) -> pucanje ćel. zida
- Zato on ne djeluje na metabolički inertne ćel. u stanju mirovanja
= Drugi antibiotici inhibiraju sintezu zida na razl. nivoima
- Pregled razmjene genetičkog materijala kod prokariota i njen biološki smisao
! 60. Gama i delta proteobakterije
= Proteobakterije - najbrojniji i metabolički najraznovrsniji razdio bakterija
= Gama i delta proteobakterije - klase
- Ciklična i neciklična fotofosforilacija
= Fotofosforilacija - način sinteze ATP-a na račun protonske motorne sile, povezan sa svijetlom fazom fotosinteze
Anoksigena fotosinteza -> ciklična fotofosforilacija
= Zelene i purpurne bakterije
1) Reakcioni centar
2) LHC I - antena pigmenti
3) LHC II - antena pigmenti
4) Citohrom bc1 kompleks
= Svjetlosnu energiju apsorbuju antena pigmenti u membranama - bakteriohlorofil a
-> Prenos energije do ekscitona u reakcionom centru - specijalnog bakteriohlorofila a
-> Smanjenje redoks potencijala ekscitona
-> Prenos elektrona na bakteriofeofitin
-> Prenos elektrona na kinone
-> Prenos elektrona na citohrom bc1 kompleks
-> Redukcija citohroma c2
-> Vraćanje elektrona na eksciton - ciklus
= Protonska motorna sila koja nastaje pri prenosu elektrona -> reverzni transport elektrona sa kinona na NAD (kad se prenosi na njega, a ne na redukovani hinon)
Oksigena fotosinteza - neciklična fotofosforilacija
= Alge i cijanobakterije
= Z šema - transport elektrona liči na slovo Z
- Kooperacija fotosistema I i II
= PSII -> Svjetlosnu energiju apsorbuju antena pigmenti -> susjedni pigmenti -> reakcioni centar
- Eksciton u reakcionom centru - hlorofil a
-> Predaja elektrona nizu nosača - hinoni, citohromi, plastocijanin
-> Elektroni dopiru do PSI koji je izgubio elektron
= PSI -> ista dešavanja, paralelno, sa različitim nosačima (Fe-S protein, feredoksin, flavoprotein) -> Redukcija NADP+ u NADPH
- PSI nadoknađuje izgubljeni elektron na račun PSII
= PSII nadoknađuje elektrone iz molekula vode
= Takođe učestvuje protonska motorna sila za sintezu ATP-a
= Previše redukovanog NADPH (anaerobni uslovi npr.) -> preusmjeravanje neciklične fotofosforilacije u cikličnu
- Ciklus - sa feredoksina iz PSI se vraćaju elektroni na PSII
-> Nema nastanka NADPH, ali nastaje ATP
- Virulentni bakteriofagi, T4 fag
= Bakterijski virusi koji u domaćinu uvijek ulaze u litički ciklus
= T4 bakteriofag - E. coli
= Odlike:
- Kompleksna simetrija
- Iksoedarna glava
- Spiralni kontraktilni repić
- Duže i kraće kukice
= Dvolančana linearna DNK
= Terminalno ponavljanje gena
= Cirkularna permutacija
= Rani, srednji i kasni geni
= Adsorpcija - duge kukice prepoznaju receptore -> skraćuju se -> kontakt kratkih kukica i bazalne ploče sa površinom
= Probijanje pore -> injekcija genoma -> penetracija
= Transkripcija ranih gena - bakt. RNK Pol, isti promotori kao bakt. (sigma70 faktor)
1) Enzim koji modifikuje citozin u 5-hidroksimetilcitozin - zaštita od restrikciono-modifikacionog sistema bakterije
2) Enzim nukleaza - isijeca DNK domaćina
3) Enzim virusna DNK Pol - replikacija paralelno sa tsk srednjih gena
4) Alternativni sigma faktor - mijenja afinitet bakterijske RNK pol -> tsk srednjih gena
= Tsk srednjih gena -> novi sigma faktor
= Tsk kasnih gena
1) Lizozim
2) Proteini kapsida
= Replikacija bakterijskog genoma -> više kopija genoma sa ljepljivim krajevima -> spajaju se u konkatemer
- Konkatemer - više kopija genoma spojenih u jedan lanac, razdvojeni cos mjestima
= Maturacija - pakovanje genoma u proteinske glave po nepreciznom headful mehanizmu
- Više DNK materijala nego što je veličina samog genoma -> rezultuje u terminalnom ponavljanju gena
= Svaka novoformirana virusna partikula nosi različite ponovljene gene -> cirkularna permutacija
= Ćelijska liza -> rezultat svijetle plake
= 100 novih viriona po jednom ciklusu infekcije
- ! Mikrobiologija zemljišta
- Tipovi metabolizma u kruženju ugljenika i sumpora
Ugljenik
= Veliki i mali krug u kruženju
= Veliki krug:
- Fiksacija CO2 (aerobni i anaerobni uslovi)
- Razgradnja organskih jedinjenja -> oslobađanje CO2
= Mali krug:
- Oslobođeni CO2, anaerobni uslovi -> metanogeni -> prevođenje u CH4 (H2 donor elektrona)
> Metanogeni - arhee (produkuju metan u anaerobnom disanju)
- Metanotrofi koriste CH4 za dobijanje C i energije -> oslobađanje CO2
> CH4 je donor elektrona
> O2 finalni akceptor elektrona
Sumpor
= Veliki broj oksidacionih stanja - najvažnija -2, 0, 6
= Sulfidi nastaju:
- Razgradnjom organskih materija (heterotrofni organizmi) - aerobno/anaerobno
- Geohemijski
- Aktivnošću sulfat-redukujućih bakterija - anaerobno disanje, sulfati (SO4) kao finalni receptori elektrona
= Hipertermofilne arhee - redukuju elementarni sumpor -> H2S
- Vezuje se za Fe -> pirit
= Hemolitotrofne sumporne bakterije, aerobni uslovi - oksiduju H2S do sulfata (SO4) - forma dostupna biljkama
- Granične zone gdje H2S stiže iz anaerobnih u aerobne uslove
- Transdukcija kod prokariota
- Evolucija MO i mikrobijalnog genoma