Processamento Histológico - Impregnação

Question 1

Objetivo

Answer 1

Preenchimento dos espaços vazios ocupados anteriormente pelo xileno, por substancias que proporcionam consistência firme do tecido.
O meio de impregnação deve ser igual ao de inclusão.
Substancias mais utilizadas: parafina
Outras: celoidina, gelatina, ceras esterificadas e polietileno.

Question 2

Parafina

Answer 2

Sólida à temperatura ambiente
É insolúvel em água e etanol
Solúvel nos agentes diafanizadores
Deve ter um PF cerca e 35ºC superior à TA
2 tipos de parafina:
Mole - PF=46/55ºC; tecidos moles, conjuntivos e conjuntivo fetal
Dura - PF=56/58ºC; tecidos duros, fibrosos ou tecido ósseo

Question 3

Parafina de boa qualidade

Answer 3

Homogénea
Compacta
Opalina
Amolece pouco a pouco
Fusão inicia pelos bordos

Question 4

Parafina de má qualidade

Answer 4

Granulosa
Manchas compactas
Liquefaz-se desigualmente
Fusão aleatória

Question 5

Aditivos da parafina:

Answer 5

A parafina tem tendencia para secar a longo prazo, tornando os cortes muito dificeis.
Para isso usam-se aditivos, para melhorar a sua eficácia:
Polímeros Plásticos - aumentam consistencia, elasticidade, flexibilidade, durabilidade. Permite cortes finos, uniformes e em série.
Borracha - aumenta elasticidade, sustentação da amostra e impede formaçã de rugas
Cera de abelhas - aumenta elasticidade e evita rugas nos cortes; fornece consistencia.

Question 6

Celoidina

Answer 6

É constituída por nitrocelulose
Dissolvida em éter e etanol
Aqui não se recorre ao calor mas sim à evaporação do solvente
Diminui a retração
É ideal para órgaos inteiros, ossos descalcificados, olhos e tecido nervoso
É uma técnica muito lenta
Os cortes podem ter espessuras superiores a 10-15mm
O arquivo em blocos é pouco prático
E juntamente com os solventes é inflamavél

Question 7

Gelatina

Answer 7

Derivada da hidrólise do colagénio
Dá suporte a tecidos delicados e fragmentos pequenos
O bloco tem que ser antes endurecido com formalina a 10%
O corte é difícil
É altamente contaminada por causa da sua constituição em glicidos

Question 8

Ceras esterificadas

Answer 8

Têm um ponto de fusão inferior à parafina
Permitem cortes mais finos
O endurecimento deve ser feito progressivamente e leva à retração do tecido
Têm um custo elevado

Question 9

Polietileno

Answer 9

Polímero simples e inerte
Constituído por ceras hidrossolúveis, pelo que há uma passagem direta da fixação para a impregnação.
É possível preservar substancias solúveis nos solventes orgânicos –> Vantagem
Desvantagem –> os resultados obtidos não são bons e não são os indicados para um diagnóstico correto

Question 10

Fatores que influenciam a impregnação

Answer 10

Agente diafanizador
Temperatura
Vácuo

Question 11

Fatores que influenciam a impregnação - agente diafanizador

Answer 11

solubilidade com a parafina condiciona a rapidez da sua eliminação
volatilidade do diafanizador faz com este desapareça mais rapidamente ou mais lentamente

Question 12

Fatores que influenciam a impregnação - temperatura

Answer 12

Temperatura alta - provoca retração e dureza dos fragmentos, dificultando o corte
Temperatura baixa - a impregnação não se dá pois a parafina não funde

Question 13

Fatores que influenciam a impregnação - vácuo

Answer 13

Elimina as bolhas de ar - isto facilita a microtomia

Elimina o agente diafanizador - Isto facilita a penetração da parafina

Question 14

Efeitos de uma má impregnação

Answer 14

Demasiado longa - retração e endurecimento excessivo dos tecidos
Demasiado curta - os fragemntos ficam com consistência heterogénea, o que dificulta o corte