Producción de individuos haploides Flashcards
(41 cards)
¿Qué son la ginogénesis y la androgénesis?
La producción de haploides in vitro a partir de gametos femeninos o masculinos respectivamente
¿Qué es la ginogénesis?
La estimulación in vivo o in vitro de una oosfera o sinérgida para que crezca sin ser fertilizada
¿Qué es la androgénesis?
La estimulación in vitro de un núcleo generativo o vegetativo de un grano de polen para que crezca hasta obtener un individuo haploide sin fertilizaciṕon
¿Dónde se obtienen con regularidad individuos haploides mediante androgénesis?
Se dan más fácilmente en algunas semillas, especialmente en angiospermas. En concreto, Solanáceas, crucíferas, gramíneas y ranunculáceas
¿Qué métodos poseemos para realizar la androgénesis in vitro?
Cultivo de anteras o cultivo de pólen
¿Qué son las anteras?
Porción terminal del estambre que contiene polen en los sacos polínicos
¿De qué maneras se puede proceder la esterilización para el cultivo de anteras?
Se pueden esterilizar los capullos florales aun cerrados o esterilizar los estambres cerrados aislados de flores abiertos
¿QUé diferencia el cultivo de anteras directo e indirecto?
Directo: se diferencia directamente el grano de polen
Indirecto: se desarrolla callo a partir de grano de polen y posteriormente se desarrolla embrión o vástago adventicio
¿Dónde se ha realizado la mayor parte de la investgación en cultivo de anteras?
Anteras aisladas sobre medio líquido o sólido
¿Cuáles son los factores de cultivo de las anteras?
- Material inicial
- Pretratamiento
- Estadio de desarrollo de la anetra
¿Qué hay que tener en cuenta para elegir el material inicial para cultivo de anteras?
- Plantas sanas y vigorosas
- depende familia, especie o incluso variedad
- En cereales son mejores tallos 1º que laterales (excepto en arroz)
¿Cómo es el pretratamiento para el cultivo de anteras?
Bajas temperaturas 4-8 ºC aplicadas a las yemas florales jóvenes o a las anteras
Aplicación de ethrel sobre las yemas cerradas
Incisión en la parte superior de la inflorescencia o incluso corte en la pared de la antera
¿Por qué se aplica frío en el pretratamiento?
Estimula la androgénesis. El frío consigue que la división de la microspora forme 2 núcleos idénticos en lugar de uno generativo y otro vegetativo
¿Qué hay que tener en cuenta para elegir un estadio de desarrollo adecuado?
El mejor momento es cuando los granos de polen no se han dividido por 1º vez. Aunque no siempre la primera división se corresponde con un estadio morfológico y el desarrollo microsporas periferia atrasado respecto a centro
¿Cómo es el medio de cultivo de las anteras?
- Medio líquido o con sistema de doble placa
- Sacarosa 2-4%
- Nutrientes minerales según el medio (Medio MS modificado o medio de macronutrientes de Nitsch
- pH 5,8 antes autoclavado
- No se añaden fitorreguladores para evitar formación de callo desde tejidos diploides
¿Cómo es el cultivo de anteras cuando el medio es líquido?
Las anteras se deben de mantener en flotación y los granos de polen que se liberan originan embriones en el fondo de la placa
¿En qué consiste el método de la doble placa?
Anteras en una capa fina de medio líquido, sobre placa de agar con carbón activo
¿Cuál es la función del carbón activo?
Adsorbe las sustancias tóxicas (polifenoles etc que dan color marrón a anteras descompuestas) y adsoorbe ABA (inhibe enbriogénesis)
¿Cómo es la técnica del cultivo de anteras?
- En placas Petri con medios adecuados se colocan las anteras a razón de 5 anteras por 10 mL de medio
- Temperatura 28ºC día/22ºC noche
- Irradiación 0.8 Wm⁻²
¿Qué ocurre con el polen de estas anteras cultivadas?
Suele desarrollarse multinucleado, abortando la mayoría posteriormente, y suele efectuar pocas divisiones en el cultivo¿?
¿Qué ocurre con las microsporas?
Puede formar un callo o segmentarse y originar un proembrión multicelular, que eventualmente desarrolla un embrión y una planta haploide¿?ª
¿Qué tipo de cultivo de anteras desarrolla más problemas y por qué?
El desarrollo indirecto. Porque suelen generarse quimeras/mezclas de niveles de ploidía y, frecuentemente, los haploides no pueden competir con los tejidos diploides
¿Qué tejidos diploides hay en la antera?
Tejido conectivo, tapete, septum y pared de la antera
¿Cuáles son las causas de las quimeras/plantas con diferentes niveles de ploidía?
a) Endomitosis
b) Fusión núcleos idénticos dentro de una microspora haploide
c) Regeneración del septum y de la pared de la antera
d) Duplicación espontánea del haploide
e) Aberraciones durante la meiosis
