Réplcation de l'ADN

Question 1

Quelle est la définition d’un noyau minimum?

Answer 1

Le noyau minimum est fait de 3 chaînes (alpha, têta et epsilon).
Alpha: a l’activité polymérase, qui permet d’attacher les nucléotides.
Epsilon: l’activité 3’-exonucléase, qui jour un rôle d’édition et de correction.
Têta: activité inconnue.

Ces 3 sections forment l’ADN polymérase III dont la masse total est de 165 kDa.

Question 2

Quelle est la définition d’un réplisome?

Answer 2

C’est une structure multi-protéique qui réplique l’ADN (1 à chaque fourche de réplication), fait d’un primosome, de l’holoenzyme Pol III et d’autres protéines.

Question 3

Quelle est la définition d’un primosome?

Answer 3

Contient la primase et les protéines qui amorce la réplication, fait partie du répliosome.

Question 4

Quelle est la définition d’un fragment d’Okasaki?

Answer 4

Fragments obtenus lors de la réplication du brin d’ADN retardé (brin qui doit être tourné en boucle pour maintenir la position 3’ vers 5’ de la polymérase.
La polymérase ajoute des petits bouts à l’aide de plusieurs amorces différentes, ce qui mène à la synthèse de fragments d’ADN répliqués qui se rejoignent (Okasaki).

Question 5

Quelle est la définition de l’hélicase?

Answer 5

L’hélicase permet de dérouler la double hélice en brisant des ponts H (consomme de l’ATP). Elle va ajouter SSB (stabilise simples brins) sur les brins en les ouvrant pour les empêcher de se recoller.

Question 6

Quelle est la définition de la gyrase?

Answer 6

Relaxation du super enroulement en le contrant en créant un super enroulement négatif. Ceci relaxe la double hélice d’ADN pour permettre la réplication par la suite.

Question 7

Quel est le rôle de toutes les protéines et enzymes dessinées à la diapositive 31?

Answer 7

1. La gyrase qui combat le super enroulement en créant un super enroulement négatif.
2. Les hélicases ouvrent les ponts H et garni les simples brins de SSB (protéines qui stabilisent le simple brin).
3. Les brides mobiles bêta servent à attacher le complexe (polymérase) sur le simple brin.
4. L’ADN polymérase III est maintenu dans les brides et réplique l’ADN.
5. Amorce sur le brin continu, et sur le brin discontinu chaque fois que l’on brise la boucle, on met une nouvelle amorce (crée les fragments d’Okasaki).
6. La ligase crée un pont phosphodiester entre les fragments d’Okasaki pour les relier entre eux.

Question 8

Quelles sont les étapes de la PCR? (Réaction de polymérisation en chaîne)

Answer 8

1. Chauffage à 95 C pour la séparation des brins de l’ADN (dénaturation).
2. Refroidissement à 55C pour hybrider les amorces avec des brins d’ADN (les associer)
3. Chauffage à 75 C pour que l’ADN polymérase synthétise les nouveaux brins d’ADN en allongeant les amorces.

Question 9

Quel est le rôle des ingrédients de la PCR?

Answer 9

ADN polymérase: fabriquer des copies d’une séquence d’ADN. De ce fait, la concentration d’ADN double à chaque cycle des PCR.