Skripta Flashcards
(24 cards)
Svrha analitickog postupka?
Da proizvede tacne i pouzdane podatke
Sta je validacija metode?
- Proces kojim se utvrdjuje da je analiticka metoda koja se koristi za specifican test pogodna za primenu.
- U najsirem smislu, vaidacija neke analiticke metode je potvrdjivanje da analiticka metoda koja se koristi odgovara svojoj nameni.
- Preciznije, validacija neke analiticke metode je potvrdjivanje, sa visokim stepenim sogurnosti, da ce neka sprcificna metoda postojano davati tacne rezultate testiranja i omoguciti procenu kvaliteta proizvoda.
Cilj validacije
Definisanje opsega dozvoljene varijabilnosti uslova ispitivanja, pri kojima analiticka metoda i dalje omogucava dobijanje tacnih, preciznih i pouzdanih rezultata.
Validacija analiticke metoda je jedan od sastavnih delova dobre laboratorijske prakse.
Koje analiticke metoda zahtevaju validaciju?
- Analiticka metoda koja je u rutinskoj upotrebi treba biti validovana.
- Kako je razvoj instrumentacije brz, metode testiranja mogu biti zastarele i moraju biti zamenjene novim metodama. Ove nove metode takodje moraju biti validovane.
- Validacija standardnih metoda je preporucljiva u slucaju kada u dokumentaciji o standardnoj metodi nema nikakvih informacija o tipu i rezultatu validacije.
- Potrebno je validovati metode kod kojih postoji sumnja da je tokom vremena doslo dopromena u prethodno postavljenoj metodi
- Kada se postavljena metoda koriguje ili se planira njena primena u druge svrhe.
Kada se radi revalidacija?
- Neophodna je u slucaju promene analiticke procedure
- Ukoliko je novi parametar van operacionog opsega
- Kada je promenjen tip instrumenta sa razlicitom preformansama.
- U slucaju da dodje do promene u nacinu sinteze aktivne supstance ili promena u sastavu finalnog proizvoda
Koje promene ne zahtevaju revalidaciju?
Ukoliko su parametri testa pogodnosti sistema i dalje ispunjeni.
Sta je verifikacija analitickih metoda?
- Verifikacija analitickih metoda se sprovodi za vec prethodno validovane metode
- verifikacija podrazumeva proveru kako se metoda ponasa u konkretnim uslovima i na uzorcima na kojima ce se primenjivati.
- podrazumeva proveru manjeg broja parametara nego validacija (tacnost, preciznost, limiti…)
- za cilj ima da demonstrira da prethodno validovana analiticka metoda moze da ispuni analiticke zahteve kada se sprovodi u konkretnoj laboratoriji
Nabroj osnovne komponente kvaliteta analitickih podstaka u laboratoriji
- Kvalifikacija analitickih instrumenata- dokazuje pogodnost instrumenata namenjenih za upotrebu
- Validacija analiticke metode- dokazuje da analiticke provedura sluzi svojoj svrsi
- Test pogodnosti sistema- potvrdjuje da sistem radi u skladu sa ocekivanjima analiticara
- Provera kvaliteta kontrole- potvrdjuje tacnost analize uzoraka- standardi ili uzorci sa poznatim kolicinama analita se analiziraju i rezultati se porede sa stvarnim vrednostima
Tipovi analitickih procedura koje je potrebno validovati
- Testovi identifikacije
- Kvantitativni testovi za odredjivanje necistoca
- Limit testovi za kontrolu necistoca
- Kvantitativno odredjivanje sadrzaja AS kao i odredjivanje saddzaja drugih komponenata prisutnih u proizvodu
- Analiticke metode za ispitivanje rastvorljivosti
- Odredjivanje velicine cestica
Validacioni pojmovi
- Specificnost
- Selektivnost
- Tacnost
- Preciznost
- Reproduktivnost na uzrm nivou
- Reproduktivnost na sirem nivou
- Linearnost
- Opseg
- Limit detekcije (LOD)
- Limit kvantifikacije (LOQ)
- Robustnost
Val. parametri za razlicite analiticke procedure
- Identifikacija - specificnost
- Testiranje necistoca- tacnost, preciznost, ponovljivost, reproduktivnost na uzem nivou, specificnost, LOD, LOQ, linearnost, opseg
- Ispitivanje sadrzaja- 1.3.4.5.6.10.11.
Parametri koji se najcesce procenjuju pri validaciji HPLC metode
- Slecificnost i selektivnost
- Tacnost
- Preciznost
- Linearnost
- Opseg
- LOD LOQ
- Stabilnost
- Robustnost
Dodatne tehnime za povecavanje sigurnosti u selektivnost
- Ispitivanje separacoje svih potencijalnih intecferenci
- Testovi degradacije uzorka
- Skupljanje frakcija koje odgovaraju pojedinim pikovima na hromatogramu i analiza istih razlicitim tehnikama
- Specificna on-line detekcija (LC-MS)
- Upotreba druge hromatografske metode
- Promena uslova na HPLC metodi
Šta je limit detekcije i kako se određuje?
Najmanja količina analizirane supstance koja može da se detektuje određenom metodom, tj. ona količina analizirane supstance koja daje odgovor detektora 3 puta veći od signala šuma.
3 metode za određivanje limita detekcije
- vizuelna evaluacija
- standardna devijacija odgovora zasnovana na SD ,,blanka”
- standardna devijacija odgovora zasnovana na nagibu kalibracione krive
Definiši robusnost
Pokazuje koliko su tačnost i preciznost stabilne u odnosu na male promene u metodi, npr. promena instrumenata. Visoku robustne metode nisu toliko precizne i spesifične, ali su konstruisane tako da zadovoljavaju svrhu. U ICH smernicama robustnost nije definisana, već je zamenjena pojmom reproduktivnost.
Koji parametar je bitan kod određivanja selektivnosti kod HPLC i koje vrednosti?
Potrebno je testirati separaciju potencijalnih interferenci od analita određivanjem rezolucije, rezolucija treba da je veće jednako 2.. Drugi način za postizanje selektivnosti je upotr3eba različitih detektora.
Tačnost, kako se odredjuje kod hplc
Tačnost je slaganje rezultata dobijenih analizom sa tačnim istinskim vrednostima. Istinke vrednosti mogu biti dobijene korišćenjem zvanične referentne metode.
Reproduktivnost na užem i širem nivou
na užem- Slaganje kompletnog merenja koje je izvršeno vise puta u jednoj laboratoriji. Analiza se vrši više dana, na razl instrumentima i od strane više analitičara.
na širem- istražuje preciznost između laboratorija.
Ponovljivost kod HPLC metoda
Ponovljivost metode je preciznost u istim radnim uslovima u kratkom vremenskom periodu- od nekoliko dana. Ponovljivost upoređuje sve operacije na uzorku, od strane jednog analitičara, u istim uslovima.
Linearnost
Predstavlja mogučnost konstruisanja pravilnih rezultata koji su direktno ili preko tačno definisanih matematičkih parametara linearno proporcionalni konc analizirane supstance. Lin se može ispitati pripremom rastvora dobijenih razblaživanjem rastvora standardne supstance u najmanje 5 koncentracija. Jednačina prave y=ax+b
Zašto se koristi uv vis dad detektor i koja mu je mana
Ovi detektori snimaju spektre online tokom čitavog vremena trajnja analize. Spektri se upoređuju i ukoliko se razlikuju, pik se sastoji od najmanje dve različite komponente.
Limit kvantifikacije
Najmanja koncentracija koja može da se tačno kvantifikuje. Uhromatografiji je to koncentracija koja daje pik najmanje 10 puta veći od signala šuma. LK se određuje analizom uzorka sa poznatom c analita i utvrđuje se najniži nivo na kom analit može biti kvantifikovan.
Šta je response faktor i formula
nzm
