strumentazione, vetrino a fresco, vetrino a goccia pendente e colorazione policromatica

Question 1

le cappe sono di due tipi: quali? quali sono le differenze?

Answer 1

CAPPA BIOLOGICA: crea un ambiente sterile per proteggere l’operatore e sterilizzare il 10% dell’aria presente in laboratorio.

CAPPA CHIMICA: aspira e basta.

Question 2

cosa significa sterile

Answer 2

privo di microrganismi

Question 3

come si divide il laboratorio e da cosa sono costituite le sue zone

Answer 3

il laboratorio si divide in due zone:

-ZONA REFRIGERANTE presenta 2 frigoriferi con una temperatura tra gli 0 e i 4 gradi e due freezer alla temperatura di -20 gradi.

-ZONA DI TERMOSTATAZIONE dove sono presenti tutti gli strumenti per dare calore

Question 4

cosa si intende per sterilizzazione

Answer 4

il processo chimico o fisico per eliminare i microrganismi

Question 5

a cosa serve e come viene utilizzata la stufa

Answer 5

serve per la sterilizzazione a SECCO di vetreria e strumenti resistenti al calore, la sua temperatura va dai 50 ai 290 gradi.

CICLO DI STERILIZZAZIONE IN STUFA: scaldare gli strumenti a 180°C per 30 minuti o a 160°C per un’ora, ricoprendoli con la carta stagnola.

si può usare anche a 50/60 gradi per asciugare semplicemente gli strumenti.

Question 6

a cosa serve la lampada germicida

Answer 6

serve a mantenere sterili gli strumenti e la vetreria dopo il passaggio in stufa

Question 7

a cosa serve l’autoclave e come viene utilizzata

Answer 7

serve per la sterilizzazione a UMIDO degli strumenti non resistenti al calore.

STERILIZZAZIONE IN AUTOCLAVE: scaldare gli strumenti a 121°C per 15/20 minuti.

Question 8

a cosa serve il termostato (o incubatore), come funziona e da cosa è costituito

Answer 8

serve a ispezionare la crescita dei microrganismi, le sue temperature vanno dagli 0 agli 80°C.

la temperatura deve rimanere sempre costante,

presenta un doppio sportello in vetro chiamato SPORTELLO DI ISPEZIONE

Question 9

classifica i microrganismi in base alla loro temperatura di incubazione

Answer 9

-TERMOFILI 50/55°C
-MESOFILI 30/37°C
-PISCROFILI o CRIOFILI 20/25°C

Question 10

quali sono gli altri 2 metodi per sterilizzare

Answer 10

-utilizzare il bunsen per sterilizzare gli strumenti resistenti al calore o lavorare vicino al bunsen (fino a 10cm dal bunsen l’aria è sterile)

-metodo delle membrane filtranti, che hanno piccolissimi fori e possono servire anche per il conteggio dei microrganismi

Question 11

elenca gli strumenti spiegati nella prima lezione

Answer 11

-stufa
-autoclave
-lampada germicida
-incubatore

Question 12

a cosa serve il microonde

Answer 12

a riscaldare

Question 13

differenza tra bilancia analitica e bilancia tecnica

Answer 13

BILANCIA ANALITICA: più precisa con un massimo di 200/300g con una sensibilità di 0,001g

BILANCIA TECNICA: un massimo di 2000g e una sensibilità di 0,1g

Question 14

a cosa serve il miscelatore-omogeinizzatore

Answer 14

serve ad omogeneizzare tutto il campione

Question 15

a cosa serve la centrifuga

Answer 15

serve a separare la parte solida (pellet) dalla parte liquida

nella microcentrifuga si utilizzano le eppendorf

Question 16

a cosa serve il bagnomaria

Answer 16

a mantenere un terreno di coltura liquido, viene utilizzato a 80/90°C

Question 17

come avviene la preparazione di un vetrino a fresco

Answer 17

-una o due gocce di preparato sul vetrino e stendere con un’ansa

-lasciare asciugare all’aria o con l’aiuto del bunsen utilizzando le pinze di legno

-fissare il preparato tagliando la fiamma per 3/4 volte

-coprire il preparato con 2/3 gocce di blu di metilene

-lasciare agire per 50 secondi

-rimuovere l’eccesso di colorante con l’acqua e lasciare asciugare all’aria

-osservare

Question 18

come viene preparato un vetrino a goccia pendente (o vetrino di Koch)

Answer 18

-formare un quadratino di glicerina intorno alla concavità del vetrino di Koch

-posizionare una goccia di preparato sul vetrino coprioggetto

-ribaltare il vetrino di Koch sul vetrino coprioggetto, così che il preparato si trovi all’interno della concavità

-osservare

Question 19

in cosa si differenzia il vetrino di Koch

Answer 19

presenta una conca che permette di non schiacciare i microrganismi, così da poterli osservare ancora vivi e in movimento

Question 20

come viene effettuata la colorazione policromatica di gram

Answer 20

-posizionare una o due gocce di preparato sul vetrino e stenderle con un’ansa

-asciugare o all’aria o al bunsen

-fissare il campione

-ricoprire il vetrino con il cristalvioletto (colorante blu-viola) e lasciare agire 1 minuto

-togliere l’eccesso senza lavare e ricoprire con il Lugol (un mordenzante che fissa il colorante) e lasciare agire 1 minuto

-lavare con acqua e versare a gocce l’alcool etilico (scioglie la parete dei gram-, perchè fatta di lipopolisaccaridi, decolorandoli) e lasciare agire per 30 secondi

-lavare con acqua e ricoprire con la safranina (colorante rosso) e lasciare agire per 30 secondi

-lavare il vetrino con acqua distillata e lasciare asciugare

-osservare con olio a immersione a 100x