TE Praktikum

Question 1

Parameter mit Einfluss auf Zellwachstum

Answer 1

Zell-Zell Interaktion
Zell-Matrix Interaktion
Zellarchitektur
Zellpoarität

Question 2

Puffersysteme

Answer 2

Bicarbonat CO2 Basis

auf Basis organischer Substanzen (HEPES)

Question 3

Bestandteile vom Medium

Answer 3

Anorganische Salze, essentielle AS, Vitamine, Wachstumsfaktoren, Hormone, ungesättigte FS, Serum, Antibiotika, Phenolrot als Indikator

Question 4

Bedingungen für Sterilität

Answer 4

Räumliche Trennung zu anderen Laboren, Spülküche, Sterilisation von benutzten Materialien

Question 5

Befall der Zellkultur durch

1. Bakterien
2. Mycoplasmen
3. Pilze

Erkennungsmerkmale

Answer 5

1. kleine Punkte
2. schlechtes Wachstum der Kultur, Nachweis über DNA Fluoreszenz
3. Fäden, Hyphen

Question 6

Chemotherapeutika gegen

1. Bakterien
2. Pilze
3. Mycoplasmen

Answer 6

1. Hemmung der Mureinsynthese oder Translation (Penicillin)
2. Hemmung der Sterolsynthese (Amphotericin B)
3. Hemmung der Translation, Zerstörung der Zellmembran (Tetracyclin, Mynox)

Question 7

Methoden zur Reinigung

Answer 7

1. Sterilisation: Abtötung alles Organismen, Inaktivierung von Sporen und Viren
2. Desinfektin; Reduzierung keine Infektion mehr möglich
3. Reinigung: Entfernung toxischer Substanzen und Organismen

Question 8

Adhäsion

1. Art
2. Behälter

Answer 8

1. spezifisch (Rezeptoren), unspezifisch (Ladung)

2. Glas (neg. geladen), Plastik (hydrophob, hydrophilisiert)

Question 9

1. Integrin hat Bindestelle für Adhäsionsmoleküle mit welcher Sequenz?
2. bindende Adhäsionsmoleküle

Answer 9

1. RGD: Arginin, Glycin, Asparaginsäure

2. Kollagen (nicht zugänglich) , Fibronectin, Lamin, Gelatine, Fibrillin

Question 10

Integrine

1. Aufgabe
2. Aufbau
3. Aktivierung
4. Hemmung

Answer 10

1. Zell-Zell und Zell-Matrix Kontakt
2. Heterodimer
3. Aktivierung durch Ca2+
4. Hemmung durch BSA

Question 11

Gelatine

Answer 11

Denaturiertes Kollagen
Wasserbindung
RGD-Sequenzen frei —> Inhibierung der Zellhaftung durch Zugabe von RGD

Question 12

Aufbau der Haut

Answer 12

Epidermis (70 % Kollagen) aus Keratinozyten

Verankerung der Dermis über Basalmembran

Question 13

Knorpel

1. Aufbau
2. Typen

Answer 13

1. 75 % Wasser, feste Bestandteile wie Kollagen II, IX und XI
2. elastisch, hyalin, Faserknorpel

Question 14

Zellkultur

1. Wachstumsphasen
2. finit
3. Immortalisierung

Answer 14

1. lag, log, Plateau, Absterben
2. begrenzte Proliferation
3. durch spontane / virale Transformation, chemische / physikalische Mutagenese, onkogene DNA, Mutation der Tumorsuppressorgene, Expression der Telomerase

Question 15

Zellzahlbestimmung

Answer 15

Mikroskopische Zählkammer (Neubauer)
elektronische Zählung
Bestimmung der Zellproliferation oder Zellmasse
indirekte Lebenzellzahl
enzymatisch

Question 16

Färbungen von Zellkulturen / enzymatische Zellzahlbestimmung

1. Trypanblau
2. Calcein-AM
3. Neutralrot
4. MTT
5. saure Phosphatase

Answer 16

1. Vitalität: färbt tote Zellen, aber keine apoptotischen
2. wird durch endogene Esterasen hydrolisiert
3. Einlagerung in intakte Lysosomen —> lebende, aktive Zellen
4. indirekte Bestimmung der enzymatischen Aktivität
5. Substrat Glc-P in Zellen

Question 17

Kollagenase

1. Analysemethoden
2. Kollagenmessung

Answer 17

1. qualitativ: Immunofluoreszenz
   Semiquantitativ: Western Blot
   Quantitativ: ELISA
2. Sircol: bindet an Seitenketten basischer AS, Abfall bei Denaturierung
   Markierung von Hydroxy-Prolin

Question 18

Chemotaxis: Arten und Eigenschaften

Answer 18

random migration: unstimuliert, ungerichtet
Chemikinese: stimuliert, ungerichtet
Chemotaxis: stimuliert, gerichtet
Haptotaxis: stimuliert, gerichtet

Question 19

Chemotaxis: Ablauf

Answer 19

Deadhäsion, Zellbewegung, Adhäsion
Polymerisierung von Aktin in Pseudopodien
Bindung über Fibronektin-Integrin
Kontraktion von Aktin/ Myosin

Question 20

Fibrillenbildung: abhängig von…

Answer 20

Kollagenkonzentration und -typen
PTM
Glycosylierung
Andere Proteine

Question 21

Kollagen: Eigenschaften

1. Monolayer
2. kontrahiertes Gel

Answer 21

1. starke Kollagenkonzentration, keine Kollagenase

2. keine Kollagenbildung, starke Kollagenase

Question 22

Funktion von Antikörpern

Answer 22

neutralisierten Gifte / Erreger
Agglutinierung
Aktivierung des Komplementsystems
Stimulierung von Rezeptoren
Aktivierung von B-Zellen

Question 23

Eigenschaften

1. IgG
2. IgM
3. IgA
4. IgD
5. IgE

Answer 23

1. 70 - 80 %, bei Infektionen und Autoimmunerkrankungen, Embryo
2. zeitlich als erstes aktiv
3. Schutzbarriere im Speichel, Schleimhäuten, Muttermilch
4. an Oberfläche von B-Zellen
5. allergische Reaktionen

Question 24

Weg einer naiven T-Zelle

Answer 24

Vom Blutgefäß ins Lymphknoten
Klonale Selektion
Klonale Expansion
Verlassen Lymphknoten über efferente Lymphe
Transendotheliale Migration ins Gewebe

Question 25

Kontrollen 1. weglassen aller AK 2. weglassen 1. AK 3. ersetzen 1. AK durch non-immunImmunoglobulin 4. ersetzen 1. AK durch nonsense AK

Answer 25

1. überprüft Autofluoreszenz 2. überprüft unspez. Bindung des 2. Ak + Fluoreszenz 3. simuliert unspez. Bindung von 1. Ak und 2. Ak und Autofluoreszenz 4. simuliert unspez. Bindung von 1. Ak und 2. Ak und Autofluoreszenz

Question 26

Diapedese / Leukozytäre Extravasation

Answer 26

``` Margination Rolling Aktivierung Adhäsion Transmigration ```

Question 27

Funktion Trypsin /EDTA

Answer 27

Trypsin Spaltet Integrine | EDTA entzieht Integrine Ca2+

Question 28

Form 1. Fibroblasten 2. Keratinozyten

Answer 28

1. lang, dürr | 2. breit, Spiegelei-artig

Question 29

Methoden zur Anlegung einer Primärkultur

Answer 29

Auswachsen: aus Hautstück, Überführung von Fibroblasten —> einheitliche Population mit stabilem Phänotyp Enzymmethode: Abbau Bindegewebe über Kollagenase, Aktivierung über C2+, Spaltung Kollagen und Fibronektion, schneller Mediumwechsel, hohe Apoptoserate