Techniques in molecular biology and biotechnology

Question 1

Hu många kromosomer har arkéer och bakterier?

Answer 1

En cirkulär kromosom

Question 2

Hur många kromosomer har eukaryoter?

Answer 2

Flertalet kromosomer i kärnan, hur många beror på arten.

Question 3

Vad har vissa bakterier extra av?

Answer 3

En extra minikromosom som kallas plasmid. De flesta plasmider kodar för antibiotikaresistans.

Question 4

Hur replikerar plasmider sig? Hur kan de vandra?

Answer 4

Självständigt av bakteriekromosomen. De kan gå mellan bakterier. Detta är huvudorsaken till antibiotikaresitans.

Question 5

Vad är plasmider?

Answer 5

Cirkulära minikromosomer härledda från bakterier

Question 6

Vad gör replication origin i plasmider?

Answer 6

Tillåter plasmidreplikation självständigt från bakteriekromosomen

Question 7

Vad för typ av gen innehåller plasmider?

Answer 7

Antibiotikaresistans gen som ger bakterien en medfödd resistens.

Question 8

Vad är plasmidvektorer?

Answer 8

De har blivit konstruerade att innehålla en promoter. Att placera en gen nedstöms vilket tillåter den genen att uttryckas i bakterien.

Question 9

Vad är involverat i rekombinerat DNA teknologi?

Answer 9

Cutting och pasting av DNA till plasmidvektorer för framtida användning.

Question 10

Vad är restriction enzymer?

Answer 10

Bakteriala enzym som klipper specifika DNA sekvenser med hög specialitet.

Question 11

Vad är DNA ligas?

Answer 11

Sätter ihop DNA sekvenser efter replikation på lagging strand. Kan även användas vid DNA repair.

Question 12

Vad används restriction enzym och DNA ligas till i bakterier?

Answer 12

Används i kloning för att cut and pastea ihop DNA segment.

Question 13

Vad kan restriction enzymer användas till i bakterier?

Answer 13

Försvar mot en viral infektion

Question 14

Vad involverar kloning?

Answer 14

Limning av DNA segment till bakterieplasmider för att tillåta amplifikation, sekvensering eller rekombinerad proteinproduktion.

Question 15

Hur sker kloning?

Answer 15

Ett DNA segment behandlas med ett restriktionsenzym. Segmentet mixas med en plasmid som har klippts med samma enzym. DNA fragmentet och plasmiden sätts ihop med DNA ligas för att producera en cirkulär plasmid som innehåller DNA segmentet.

Question 16

Hur sker förstärkning av klonade plasmider?

Answer 16

Plasmiden kan förstärkas genom transformationsprocessen och rening från bakterialkulturen.

Question 17

Vad är transformation och hur sker det?

Answer 17

Processen där bakterien tar upp plasmid DNA som innehåller en intressant gen. Plasmiden innehåller en gen för antibiotikaresistans. Bakterien värmechockas för att få porer i bakteriens cellvägg vilket tillåter plasmiden att gå in i cellen.

Question 18

Vad klassifieras en gen som som innehåller en modifierad plasmid?

Answer 18

GMO (genetically modified)

Question 19

Hur fungerar DNA amplifikation i bakterier?

Answer 19

En plasmid introduceras för bakterier replikeras när bakterien växer. När bakterien når log-fastillväxt kan de skördas och plasmid DNA renade.

Question 20

Vad är rekombinanta proteiner

Answer 20

Mänskliga proteiner som produceras i bakterieceller.

Question 21

Hur fungerar rekombinant proteinproduktion?

Answer 21

En mänsklig gen som finns i en plasmid introduceras i bakterien. Bakteriens transkriptions och translations maskineri gör RNA och protein från mänskliga gener.

Question 22

Hur går djurkloning till?

Answer 22

Man tar kärnan från en vuxens cell och fuserar det en anukleär eggcell. Embryot innehåller genetisk information av kärndonatorn och blir en exakt genetisk kopia.

Question 23

Hur fungerar transgeniska djur?

Answer 23

DNA encoding gen introducerat till embryoniska celler efter en in vitro fertilisering. Embryot implanteras i modern. Avkomman kommer uttrycka den introducerade genen i alla kroppsceller. Detta är känt som transgeniskt djur.

Question 24

Vad kan transgeniska djur användas som?

Answer 24

För att behandla eller bota mänskliga sjukdomar och för att förstå hur vissa gener influerar patologier.

Question 25

Fördelar med att använda GMO?

Answer 25

Mer mat, kan göra att växter kan stå emot bland annat kyla. Minskade miljöpåverkningar. Kan användas för att göra framsteg inom medicin.

Question 26

Nackdelar med GMO?

Answer 26

Etiska frågor Risk för hyperhybrider Okända sideffekter Exploatering

Question 27

Hur fungerar PCR?

Answer 27

1. Initiation 2. Denaturation (95 grader) 3. Primer annealing (55 grader) 4. Extension (72 grader) 5. Slutet av först cykeln 6. Återgå till steg 2 och repetera 30-40 gånger

Question 28

Vilka tre huvudsteg består PCR av?

Answer 28

Deaturation för att separera DNA-strängarna. Annealing så att primers kan binda. Elongation för att polymeras ska fungera.

Question 29

Hur tillverkar man gel elektrofores?

Answer 29

1. Load DNA sample 2. Apply curent 3. Analyze gel

Question 30

Hur fungerar gelet i elektrofores?

Answer 30

Gelet innehåller en fluorescent dye som binder till DNA. DNA band visualiseras under UV ljus.

Question 31

Vad är real-time PCR?

Answer 31

En PCR metod som använder fluorescent probes för att övervaka amplifikation i realtid.

Question 32

Vad är principerna för real time PCR?

Answer 32

Samma som för vanlig PCR men då DNA amplifieras ökar fluorescent intensiteten.

Question 33

Hur fungerar reverse transcriptase PCR?

Answer 33

1. Purify DNA 2. Reverse transcription of purified RNA to cDNA 3. Amplify directly by qPCR 4. Measure cDNA (mRNA) concentration

Question 34

Vad är omvänd transkription? Hur fungerar det?

Answer 34

En reaktion för att omvandla RNA till DNA (cDNA). Reaktionen använder ett extra steg med reverse transcriptase.

Question 35

Vad används omvänd transkription till?

Answer 35

Tekniken används för att analysera RNA och för att konvertera processerat mRNA till DNA för kloning till rekombinerade uttryckta vektorer.

Question 36

Vad innebär precision medicine (therapy)?

Answer 36

Involverar karakterisering av en patients genetiska profil för att förutse vilket medicin som är mer fördelaktig för deras behandling. Två patienter kan svara olika på samma medicin.

Question 37

Hur fungerar CRISPR/Cas9?

Answer 37

Utvecklades som ett bakteriellt immunsystem. Infekterade bakterier använder Cas 1/2 enzymer för att klippa en del av viral DNA. Cas enzymer modifierar DNA så att det kan bli pasted till CRISPR sites i bakteriens genom. DNA som infogas till CRISPR sites i bakteriens genom.

Question 38

Vad kan CRISPR/Cas 9 genredigering användas till?

Answer 38

CRISPR/Cas9 kan användas för att modifiera DNA genom att fungera som en molekylsax. Kan användas för att reparera felaktiga gener och behandla vissa sjukdomar.

Question 39

Hur fungerar DNA forensics?

Answer 39

1. DNA används för att identifiera oidentifierade kroppar 2. DNA forensics baseras på korta tandem upprepningar loci utspridda genom genomet 3. STR: Sekvenser av baspar upprepningar. Högt varierade mellan individer 4. STR nummer varieras vid samma site på varje kromosom (beroende på om det är maternalt eller paternalt)

Question 40

Vad är ett loci?

Answer 40

Specifika regioner på kromosomerna specifikt där en särskild gen eller genetisk markör finns.

Question 41

Hur fungerar genetiska test? Vad kan de visa?

Answer 41

Ger information om mutationer och associationer med mänskliga sjukdomar. 1 kopia av en gen från varje förälder. 1 kopia kan vara muterad och 1 normal.