Technologies de l'ADN Flashcards

1
Q

Enzyme qui coupe les ADN/ARN à partir d’une extrémité

A

Exonucléase

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Q

Enzyme qui coupe les ADN/ARN au milieu de la chaine

A

Endonucléase

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3
Q

Que produisent les endonucléases ?

A

Des fragments

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4
Q

Endroits caractérisés par des séquences de nucléotides spécifiques

A

Sites de restriction

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5
Q

Pourquoi les bactéries ont des enzymes de restriction ?

A

Défense contre virus/bactéries en coupant ADN étranger en morceaux

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6
Q

Type de séquence reconnu par la grande majorité des enzymes de restriction ?

A

Palindromique

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7
Q

Type de bouts produits par l’enzyme de restriction HAEIII

A

Francs

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8
Q

Type de bouts produits par l’enzyme de restriction EcoRI

A

Collants

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9
Q

Type de bouts produits par l’enzyme de restriction HindIII

A

Collants

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10
Q

Cartographie de restriction des ADN isolés d’organismes / virus ?

A

Restriction mapping

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11
Q

Une fois coupés, les fragments d’ADN peuvent être séparés selon la taille par ___________.

A

Électrophorèse sur gel d’Agarose

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12
Q

L’ADN est chargé _____________.

A

Négativement

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13
Q

Que permet le mélange de l’ADN à la Bromure d’Éthidium ?

A

Savoir la taille des fragments d’ADN

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14
Q

Enzyme qui permet de joindre deux fragments d’ADN ensemble ?

A

Ligase

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15
Q

Élément nécessaires au processus de ligation ?

A

Ligase
ATP

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16
Q

V/F : la ligation de bouts francs est 100x plus efficace que celle de bouts collants ?

A

FAUX ; les bouts collants se lient plus efficacement

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17
Q

Ligament du fragment d’ADN dans un vecteur

A

Cloning

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18
Q

Cercle d’ADN bicaténaire qui peut se répliquer de façon autonome dans un organisme hôte

A

Plasmide

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19
Q

Qu’est-ce qu’un vecteur ?

A

Plasmide manipulé en laboratoire dans lequel ont peut insérer des fragments d’ADN

20
Q

V/F : lors de la transformation, toutes les C vont recevoir un plasmide

A

FAUX ; l’efficacité de la transformation n’est PAS 100%

21
Q

Moyen d’identification des C qui ont reçu un plasmide

A

Marqueur de sélection

22
Q

Quel gène est généralement utilisé comme marqueur de sélection ?

A

Résistance à un antibiotique
Ex : Ampicilline

23
Q

Utilisations possibles de l’ADN amplifié

A
  • Préparer une grande Qt d’insert (séquencer l’insert)
  • Poursuivre un autre clonage avec ce plasmide
  • Production de protéines recombinantes
24
Q

Exemples de protéines recombinantes

A

Insuline
Hormone de croissance humaine (GH)

25
Que permet d'étudier les **GFP** ?
- Niveau de **transcription** d'un gène - Niveau de **traduction** - **Localisation** cellulaire de protéines - **Co-localisation** cellulaire
26
**V/F** : l'ADN dénaturé peut se renaturer en ADN double brin lorsqu'on revient aux bonnes conditions
VRAI
27
Moyen de détecter une **mutation** dans un gène
Méthode de **Sanger**
28
Étapes de la méthode du didéoxy
1. **Séparation des brins** et ajout d'amorce 2. **Ajout** (amorce, desoxynucléotides, dNTPs, ADN pol) 3. **Séparation du gel** et détection des brins synthétisées par extension de l'amorce 4. **Lecture** de la séquence sur gel
29
V/F : l'ADN polymérase de nécessite **PAS d'amorce**
FAUX ; nécessite une amorce
30
Étapes du cycle **PCR**
1. **Séparation** des brins (95) 2. **Hybridation** des amorces (55) 3. **Synthèse** par TaqI ADN polymérase (72)
31
Température de synthèse par la **Taql** ADN polymérase
**72** degrée C
32
Plus les amorces sont longues, plus elles sont ________.
Spécifiques
33
Combien de cycle de PCR pour obtenir 1 milliard de copies ?
30
34
STR
2-6 nucléotides
35
VNTR
10-100 nucléotides
36
Emplacement précis et invariable sur un chromosome
Locus
37
V/F : un locus se situe toujours sur un gène
FAUX ; pas nécéssairement
38
Qu'est-ce qui permet de distinguer l'ADN d'une personne à une autre ?
Polymorphisme de STR/VNTR
39
Site dans l'ADN où les individus diffèrent selon **une seule base d'ADN**
SNP
40
Traits génétiques pouvant être associés aux SNPs
Couleur yeux / cheveux Performance musculaire Comportement social Hérédité / susceptibilité maladies Réponse aux médicaments
41
2 types de SNPs
Liés Causatifs
42
2 types de SNPs causatifs
Régions codantes Régions non-codantes
43
Particularités des **SNP liés**
Sont à proximité d'un géne causant un trait génétique **Ne causent pas de traits mais servent de marqueurs**
44
Particularités des SNP causatifs
Causent un trait génétique
45
Particularités des SNP causatifs de **régions codantes**
Peuvent affecter la **séquence** et la **fonction** des protéines
46
Particularités des SNP causatifs de régions **non-codantes**
Peuvent affecter **l'épissage** de pré-ARNm, la **régulation** d'un gène , **niveau d'expression**
47
Que permet CRISPR ?
Edition de génome de façon spécifique