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MMD 1042 Module 3 > Technologies de l'ADN > Flashcards

Technologies de l'ADN Flashcards

1
Q

Enzyme qui coupe les ADN/ARN à partir d’une extrémité

A

Exonucléase

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Q

Enzyme qui coupe les ADN/ARN au milieu de la chaine

A

Endonucléase

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3
Q

Que produisent les endonucléases ?

A

Des fragments

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4
Q

Endroits caractérisés par des séquences de nucléotides spécifiques

A

Sites de restriction

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5
Q

Pourquoi les bactéries ont des enzymes de restriction ?

A

Défense contre virus/bactéries en coupant ADN étranger en morceaux

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6
Q

Type de séquence reconnu par la grande majorité des enzymes de restriction ?

A

Palindromique

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7
Q

Type de bouts produits par l’enzyme de restriction HAEIII

A

Francs

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8
Q

Type de bouts produits par l’enzyme de restriction EcoRI

A

Collants

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9
Q

Type de bouts produits par l’enzyme de restriction HindIII

A

Collants

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10
Q

Cartographie de restriction des ADN isolés d’organismes / virus ?

A

Restriction mapping

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11
Q

Une fois coupés, les fragments d’ADN peuvent être séparés selon la taille par ___________.

A

Électrophorèse sur gel d’Agarose

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12
Q

L’ADN est chargé _____________.

A

Négativement

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13
Q

Que permet le mélange de l’ADN à la Bromure d’Éthidium ?

A

Savoir la taille des fragments d’ADN

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14
Q

Enzyme qui permet de joindre deux fragments d’ADN ensemble ?

A

Ligase

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15
Q

Élément nécessaires au processus de ligation ?

A

Ligase
ATP

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16
Q

V/F : la ligation de bouts francs est 100x plus efficace que celle de bouts collants ?

A

FAUX ; les bouts collants se lient plus efficacement

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17
Q

Ligament du fragment d’ADN dans un vecteur

A

Cloning

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18
Q

Cercle d’ADN bicaténaire qui peut se répliquer de façon autonome dans un organisme hôte

A

Plasmide

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19
Q

Qu’est-ce qu’un vecteur ?

A

Plasmide manipulé en laboratoire dans lequel ont peut insérer des fragments d’ADN

20
Q

V/F : lors de la transformation, toutes les C vont recevoir un plasmide

A

FAUX ; l’efficacité de la transformation n’est PAS 100%

21
Q

Moyen d’identification des C qui ont reçu un plasmide

A

Marqueur de sélection

22
Q

Quel gène est généralement utilisé comme marqueur de sélection ?

A

Résistance à un antibiotique
Ex : Ampicilline

23
Q

Utilisations possibles de l’ADN amplifié

A
  • Préparer une grande Qt d’insert (séquencer l’insert)
  • Poursuivre un autre clonage avec ce plasmide
  • Production de protéines recombinantes
24
Q

Exemples de protéines recombinantes

A

Insuline
Hormone de croissance humaine (GH)

25
Q

Que permet d’étudier les GFP ?

A
  • Niveau de transcription d’un gène
  • Niveau de traduction
  • Localisation cellulaire de protéines
  • Co-localisation cellulaire
26
Q

V/F : l’ADN dénaturé peut se renaturer en ADN double brin lorsqu’on revient aux bonnes conditions

A

VRAI

27
Q

Moyen de détecter une mutation dans un gène

A

Méthode de Sanger

28
Q

Étapes de la méthode du didéoxy

A
  1. Séparation des brins et ajout d’amorce
  2. Ajout (amorce, desoxynucléotides, dNTPs, ADN pol)
  3. Séparation du gel et détection des brins synthétisées par extension de l’amorce
  4. Lecture de la séquence sur gel
29
Q

V/F : l’ADN polymérase de nécessite PAS d’amorce

A

FAUX ; nécessite une amorce

30
Q

Étapes du cycle PCR

A
  1. Séparation des brins (95)
  2. Hybridation des amorces (55)
  3. Synthèse par TaqI ADN polymérase (72)
31
Q

Température de synthèse par la Taql ADN polymérase

A

72 degrée C

32
Q

Plus les amorces sont longues, plus elles sont ________.

A

Spécifiques

33
Q

Combien de cycle de PCR pour obtenir 1 milliard de copies ?

A

30

34
Q

STR

A

2-6 nucléotides

35
Q

VNTR

A

10-100 nucléotides

36
Q

Emplacement précis et invariable sur un chromosome

A

Locus

37
Q

V/F : un locus se situe toujours sur un gène

A

FAUX ; pas nécéssairement

38
Q

Qu’est-ce qui permet de distinguer l’ADN d’une personne à une autre ?

A

Polymorphisme de STR/VNTR

39
Q

Site dans l’ADN où les individus diffèrent selon une seule base d’ADN

A

SNP

40
Q

Traits génétiques pouvant être associés aux SNPs

A

Couleur yeux / cheveux
Performance musculaire
Comportement social
Hérédité / susceptibilité maladies
Réponse aux médicaments

41
Q

2 types de SNPs

A

Liés
Causatifs

42
Q

2 types de SNPs causatifs

A

Régions codantes
Régions non-codantes

43
Q

Particularités des SNP liés

A

Sont à proximité d’un géne causant un trait génétique
Ne causent pas de traits mais servent de marqueurs

44
Q

Particularités des SNP causatifs

A

Causent un trait génétique

45
Q

Particularités des SNP causatifs de régions codantes

A

Peuvent affecter la séquence et la fonction des protéines

46
Q

Particularités des SNP causatifs de régions non-codantes

A

Peuvent affecter l’épissage de pré-ARNm, la régulation d’un gène , niveau d’expression

47
Q

Que permet CRISPR ?

A

Edition de génome de façon spécifique

MMD 1042 Module 3 (8 decks)

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