Tema 2: Métodos de estudio e investigación I Flashcards

(128 cards)

1
Q

Cómo se denomina en microscopía a la capacidad de presentar distintos y separados dos puntos adyacentes a una distancia mínima?

A

Poder de Resolución

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Q

Cómo se denomina en microscopía a la distancia mínima entre dos puntos para que estos puedan distinguirse como tales?

A

Límite de resolución

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Q

Límite de resolución del ojo humano

A

200 µm

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4
Q

Límite de resolución de Microscopio óptico

A

0,2 µm

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5
Q

Pasos de preparación de muestras para M. óptica

A

1) Fijación
2) Inclusión
3) Microtomía
4) Tinción

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6
Q

En qué consiste el proceso de fijación de una muestra

A

Mantener la estructura del tejido lo más parecido a su estado in vivo

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7
Q

Qué técnica de preparación de muestras se encarga de mantener la estructura del tejido lo más parecido a su estado in vivo

A

Fijación

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8
Q

Objetivos de la fijación

A

Detener degradación, Insolubilizar componentes, Dar consistencia, Facilitar tinción

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9
Q

Tipos de fijación

A

física y química

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10
Q

En qué se basa la fijación física

A

criofijación (congelación)

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11
Q

Con qué tipo de fijación se relaciona la criofijación

A

Física

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12
Q

En qué consiste la criofijación

A

Congelación de tejido fresco

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13
Q

Inconveniente de la criofijación

A

Reversibilidad del proceso

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14
Q

Cuando se usa la fijación física?

A

Cuando no se puede usar la química

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15
Q

técnicas de criofijación física

A

Tratamiento previo con crioprotectores, congelación instantánea

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16
Q

Crioprotectores (ejemplos)

A

DMSO, propitenglicol, sacarosa, glicerol

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17
Q

Funciones de los crioprotectores

A

Evita que se formen cristales, aumentan densidad

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18
Q

Función de congelación instantánea en criofijación

A

evita formación de cristales, evita rotura de estructuras tisulares

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19
Q

Qué se utiliza para la congelación instantánea de la criofijación

A

N2 líquido, gas carbónico

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20
Q

En qué se basa la fijación química

A

Mantener estructuras tisulares mediante el empleo de agentes químicos

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21
Q

Tipos de agentes químicos en fijación química

A

Entrecruzantes, oxidantes y precipitantes

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22
Q

Ejemplos de agentes entrecruzantes (fijación química)

A

Formaldehído, glutaraldehído

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23
Q

Qué tipo de agente es el formaldehído en fijación química

A

Entrecruzante

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24
Q

Qué tipo de agente es el glutaraldehído en fijación química

A

Entrecruzante

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25
Qué es la trama espacial
Gel que se forma por acción de agentes entrecruzantes en fijación química
26
En qué se basa la acción de agentes entrecruzantes en fijación química
Cambio de proteínas, de sólidas a gel, formando la trama espacial
27
Funciones de la trama espacial
preserva posición, da consistencia al tejido
28
Cuál de los dos agentes entrecruzantes es buen fijador de membranas
Glutaraldehído
29
Qué agente entrecruzante da una fijación reversible
Formaldehído
30
Qué agente entrecruzante da una fijación irreversible
Glutaraldehído
31
En qué tipo de microscopía se usa formaldehído como agente entrecruzante
Óptica
32
En qué tipo de microscopía se usa glutaraldehído como agente entrecruzante
Óptica y electrónica
33
Qué agente entrecruzante se usa para M. óptica
glutaraldehído y formaldehído
34
Qué agente entrecruzante se usa para M. electrónica
Glutaraldehído
35
Componentes de formaldehído
Aminas, Aa aromáticos
36
Componentes de glutaraldehído
Grupos polares, malla proteica
37
Ejemplo de agente oxidante de fijación química
tetraóxido de osmio
38
característica principal de agentes oxidantes en fijación química
Electrodensos (aportan contraste)
39
Ejemplo de agentes precipitantes en fijación química
Ácido pícrico
40
En qué se basan los agentes precipitantes (fijación química)
Desnaturalización de proteínas
41
Qué tipo de agente químico da contraste a las muestras (fijación química)
Oxidantes
42
Qué tipo de agente químico desnaturaliza proteínas (fijación química)
Precipitantes
43
Con qué agente químico se relaciona el líquido de Bovin (fijación química)
precipitantes
44
Por qué se utiliza el líquido de Bovin en fijación química
Porque no existe fijador universal
45
Qué tipo de agente químico es el tetraóxido de osmio
Oxidante
46
Qué tipo de agente químico es el ácido pícrico
Precipitante
47
Qué técnica de preparación de muestras se basa en infiltración de un medio para dar consistencia al tejido y obtener cortes finos
Inclusión
48
Cuáles son los medios de inclusión (para M. óptica)
Parafina y epoxi
49
En qué técnica de preparación de muestras se usan la parafina y el epoxi?
Inclusión
50
Cuál es el medio de inclusión más usado (M. óptica)
Parafina
51
Pasos previos a la inclusión
Deshidratación y aclaramiento
52
En qué se basa la deshidratación previa a la inclusión
Inmersión sucesiva en alcoholes de degradación creciente
53
En qué se basa el aclaramiento previo a la inclusión
Sustitución de etanol por disolvente orgánico
54
Disolventes orgánicos usado en aclaramiento previo a la inclusión
Benzol, xilol, tolueno
55
Proceso de preparación de muestras en que se usan benzol, xilol y tolueno
Aclaramiento previo a la inclusión
56
Por qué se realiza un aclaramiento antes de la inclusión
Porque el etanol no se mezcla bien con la parafina
57
Función de epoxi y parafina
dar consistencia al tejido
58
Qué técnica de preparación de muestras se basa en instrumentos de precisión para obtener cortes finos y uniformes
Microtomía
59
Tipos de intrumentos en microtomía
Microtomo, criostato, vibratomo, (ultramicrotomo)
60
Tipo de muestras para microtomo
Parafina
61
con qué instrumento de microtomía se relaciona la parafina
Microtomo
62
Tipo de muestras para criostato
congeladas
63
Con qué instrumento de microtomía se relacionan las muestras congeladas
Criostato
64
Tipo de muestras para vibratomo
Tejido fresco
65
Por qué se caracteriza el vibratomo
manipulación rápida
66
Con qué instrumento de microtomía se relacionan los tejidos frescos
Vibratomo
67
Qué instrumento de microtomía da manipulación rápida
Vibratomo
68
Tamaño cortes de Microtomo
3 - 5 µm
69
Tamaño de cortes de Criostato
8 - 15 µm
70
Tamaño de cortes de Vibratomo
25 µm
71
Donde tiene importancia el ultramicrotomo
Microscopía electrónica
72
Qué técnica de preparación de muestras en M. Óptica se basa en dar contraste a las células
Tinción
73
Paso previo a tinción
Rehidratación
74
Cuándo hay que desparafinar en preparación de muestras para M.O.?
En tinción
75
Estructura general de un colorante
Cromóforo y auxocromo
76
Función del cromóforo
dar color
77
qué parte del colorante se encarga de dar color
cromóforo
78
Función del auxocromo
Afinidad colorante-célula
79
Qué parte del colorante se encarga de la afinidad colorante-célula
auxocromo
80
Tipos de colorantes
Básicos y ácidos
81
Grupo auxocromo básico
Amina
82
carga neta de colorantes básicos
positiva
83
Grupo auxocromo ácido
carboxilos
84
carga neta de colorantes ácidos
negativa
85
Componentes de colorantes básicos
ANs, glucosaminoglucanos, proteínas ácidas
86
Componentes acidófilos (de colorantes ácidos)
Proteínas citoplasmáticas, gránulos de secreción y colágeno
87
Ejemplos de colorantes básicos
hematoxilina, azul de metileno
88
Qué tipo de colorante es la hematoxilina
Básico
89
Qué tipo de colorante es el azul de metileno
Básico
90
Ejemplos de colorantes ácidos
eosina, fucsina
91
Qué tipo de colorante es la eosina
ácido
92
Qué tipo de colorante es la fucsina
ácido
93
Longitud de onda de M. Óptico de campo claro
400 - 700 µm
94
En qué tipo de microscopía se usa contraste de fases
Óptica
95
En qué se basa el contraste de fases
ver células vivas sin tinción
96
el contraste de fases usa el microscopio de _______
Normasky
97
Qué tipo de M. óptica se encarga de ver células vivas sin tinción
contraste de fases
98
ejemplo de sonda fluorescente para M. óptica
DAPI
99
Qué color aporta el DAPI
Azul
100
Qué tipo de M. óptica tiene utilidad en detección de proteínas u otras moléculas mediante aminoácidos marcados con sondas fluorescentes
Fluorescencia
101
Con qué tipo de M. óptica se relaciona el marcaje múltiple
fluorescencia
102
Qué tipo de M. óptica usan fluorescencia
Fluorescencia y Confocal
103
Qué tipo de M. óptica usa un láser
Confocal
104
Sondas fluorescentes usadas en confocal
DFP, YPP, GFP
105
En qué consiste la acción del detector en la confocal?
Selecciona fluorescencia y elimina la que está por encima y por debajo
106
Qué tipo de M. óptica permite fluorescencia en células vivas
Confocal
107
Qué tipo de M. óptica permite la localización de proteínas después de un tiempo
Confocal
108
Qué tipo de microscopía no tiene lentes, sino bovinas?
Electrónica
109
DeBroglie sobre ME
Descubre movimiento de electrones
110
Busch sobre ME
Los campos magnéticos pueden utilizarse como lentes para enfocar haz de electrones
111
Ruska y Knoll
Diseñan primer ME
112
ME en 1935
Primer ME con PR > M. óptica
113
Quién descubre mov de electrones en ME
DeBroglie
114
Quién afirma que los campos magnéticos pueden servir de lentes en ME
Busch
115
Quienes diseñaron ME
Ruska y Knoll
116
Tipos de ME
de transmisión (MET), de barrido (MEB)
117
Dónde se genera el haz de electrones en MET
Cátodo
118
Función del Alto Vacío en MET
hace que los electrones vayan hacia la muestra sin chocar con ésta
119
Límite de Resolución de MET
0,1 nm
120
Partes de las bobinas electromagnéticas de MET
Condensador, objetivos, lentes proyectoras
121
Metales pesados usados en MET
Citrato de plomo, osmio, acetato de uracilo
122
Sustancias usadas en fijación de ME
Glutaraldehído, tetraóxido de osmio
123
En qué microcopía se usa tetraóxido de osmio?
Electrónica
124
Qué fija el glutaraldehído?
Proteínas
125
Función del tetraóxido de osmio en fijación de ME?
Estabilización de bicapas lipídicas
126
Qué fijador de ME fija proteínas?
Glutaraldehído
127
Qué fijador de ME estabiliza bicapas lipídicas?
Tetraóxido de osmio
128