Tema 6

Question 1

Una de las siguientes afirmaciones es falsa en relación a la transformación de las células
en el proceso de clonaje:
a. Utilizar vectores de mayor tamaño ayuda al éxito del proceso
b. Los métodos más comunes son métodos químicos, de electroporación o
infección vírica, en caso de usar virus como un vector
c. El método usado depende de las células que se quieren usar como huéspedes
d. Es el proceso por el que un DNA manipulado in vitro se transfiere al interior de la
célula huésped, sin afectar la viabilidad de la célula.

Answer 1

a

Question 2

Algunas genotecas de cDNA se usan como genotecas de expresión. En este caso el vector usado tiene que tener secuencias que no se necesitan en los vectores usados en la preparación de una genoteca genómica ¿De qué tipo de señales estamos hablando?
a. un segundo marcador de selección
b. un promotor específico del huésped
c. un origen de replicación

Answer 2

b

Question 3

Los enzimas de restricción que generan extremos cohesivos:
a. Catalizan un corte único en el esqueleto de DNA
b. Catalizan dos cortes en el esqueleto de DNA directamente en el mismo nivel de
la doble hélice
c. Catalizan dos cortes en la misma cadena del DNA
d. Catalizan dos cortes asimétricos en el esqueleto de DNA

Answer 3

d

Question 4

Un cDNA extraído de una genoteca de cDNA contiene intrones y promotores del gen de interés:
a. Verdadero
b. Falso

Answer 4

b

Question 5

Solo una de las afirmaciones siguientes es correcta:
a. El tratamiento con cinasa de un fragmento de DNA impide la posterior acción de una ligasa
b. La transferasa terminal permite la formación de extremos cohesivos en
moléculas bicatenarias de DNA, al catalizar la síntesis de colas protuberantes a
partir de extremos 5’.
c. Las ligasas que suelen utilizar a EG pueden catalizar únicamente ligación entre
moléculas de extremos protuberantes
d. La ligasa de T4 puede catalizar ligación de dos tipos: entre moléculas de
extremos cohesivos y entre moléculas de extremos romos

Answer 5

d

Question 6

Los plásmidos de control relajado (rop-):
a. son plásmidos promiscuos
b. son plásmidos con un bajo número de copias
c. son plásmidos con un alto número de copias
d. también se llaman estrictos

Answer 6

c

Question 7

¿Cuál de las siguientes herramientas de la tecnología del DNA recombinante está incorrectamente emparejado con el proceso en el que se usa?

a. endonucleasa de restricción: generación de fragmentos de DNA para su
clonación
b. transformación: estado de competencia de las células
c. DNA ligasa: corte de DNA, generando fragmentos con extremos cohesivos
d. Hibridación: detección de clones portadores del DNA de interés

Answer 7

c

Question 8

La probabilidad de encontrar una determinada secuencia de seis nucleótidos de longitud
en una molécula de DNA es:
a. 1/24
b. 1/1296
c. 1/64
d. 1/4096

Answer 8

d

Question 9

¿En cuál de las siguientes técnicas de EG se usa o se puede usar la nucleasa S1?

a. Síntesis de cDNA a partir de mRNA
b. Marcaje de DNA por nick translation
c. Transcripción in vitro de DNA
d. Marcaje de DNA por la enzima cinasa

Answer 9

a

Question 10

Se pueden identificar células huésped transformadas por inactivación insercional mediante:

a. Secuenciación de plásmidos recombinantes
b. Elaboración de mapas de restricción de plásmidos recombinantes
c. Producción de auxótrofos nutricionales
d. Interrupción de un gen marcador del vector por introducción del DNA insertado

Answer 10

d

Question 11

La terminal transferasa es una enzima usada para la manipulación de ácidos nucleicos
que:
a. Puede añadir colas de homopolímeros en extremos 3’-OH
b. Añadir colas de homopolímeros en extremos 5’-OH
c. Necesita de un molde de DNA
d. Se aísla de bacterias gram positivas

Answer 11

a

Question 12

Para construir una genoteca de cDNA:
a. Se aprovecha del hecho de que la mayoría de mRNA son poliadenilados en los
extremos 3’ para obtener el material de partida
b. Se pueden usar, para obtener el mRNA, columnas de celulosa con oli dT, o bolas
magnéticas con oli dT o gradientes de sacarosa para aislar los complejos
mRNA-ribosomas.
c. Todas las afirmaciones son ciertas
d. El primer paso es aislar y purificar el mRNA y comprobar su integridad, ya que es
fácilmente degradable

Answer 12

c

Question 13

Sols una de les següents afirmacions és correcte:
a. La nucleasa Bal31 és una exonucleasa que actua sobre cadena senzilla, però
que, en determinades condicions de reacció pot actuar com endonucleasa sobre
substrats bicatenaris
b. La nucleasa S1 degrada DNA de cadena sencilla
c. La RNasa H és una ribonucleasa que hidrolitza molècules monocatenàries de
RNA
d. Exo III és una exonucleasa de cadena senzilla que permet eliminar extrems
protuberants en molècules bicatenàries de DNA

Answer 13

b

Question 14

Les DNAses que empram més habitualment a EG:
a. Són la DNAasa I d’E.Coli, l’exonucleasa III d’E.Coli, la Bal31 d’Alteromonas
espejiana i la S1 d’Aspergillus orizae
b. Actuen sobre DNA de cadena doble, excepte la S1 que sols degrada cadenes
simples de DNA
c. Totes les respostes són correctes
d. Procedeixen de microorganismes

Answer 14

?

Question 15

Quina de les següents no és una bona característica d’un vector plasmídic?
a. Lloc de clonació múltiple
b. Ser molt gros
c. Origen de replicació
d. Marcador de selecció lac-Z
e. Gen de resistència als antibiòtics

Answer 15

b

Question 16

La unió entre el vector de clonatge i el DNA insert:
a. Es pot fer mitjançant coes d’homopolímers sintetitzades amb la transcriptasa
inversa
b. Per evitar la recirculació del vector sense l’insert es pot tractar el vector amb una
cinasa abans d’emprar la ligasa
c. És més fàcil si s’empren molècules amb extrems cohesius
d. Se poden emprar linkers o adaptadors juntament amb l’enzim cinasa

Answer 16

c

Question 17

De quin organisme provenen les transcriptases inverses que s’empren habitualment a
EG?
a. Bacteriòfag T7
b. Pàncrees boví
c. Cap de les respostes és vàlida
d. E.Coli

Answer 17

c

Question 18

El vector plasmídic PUC19, el propòsit del gen lacZ és:
a. Permetre que el plasmidi sigui tallat per un sol punt per a la clonació d’un
fragment
b. Permetre la selecció de cèl·lules bacterianes transformades
c. Permetre la replciació del plasmidi
d. Ser un indicador de que el plasmidi recombinant conté un insert de DNA

Answer 18

d

Question 19

Quina de les següents DNA polimerases no té d’activitat correctora de lectura?
a. DNA polimerasa I
b. Klenow
c. DNA polimerasa d’T7
d. Seqüenasa

Answer 19

d

Question 20

Sobre els marcadors de selecció, només una de les respostes següents és falsa:
a. Serveixen per assegurar-se de l’èxit de la transformació de la cèl·lula hoste, però
mai per saber si el vector porta o no l’insert
b. Solen ser dos o més en els vectors plasmídics d’ús comú
c. Un d’ells és la beta-galactosidasa, que permet seleccionar els transformants
gràcies al color blau produit quan s’usa l’X-gal com a substrat
d. En els vectors procariòtics solen ser gens de resistència a antibiòtics

Answer 20

a

Question 21

Una genoteca genòmica es construeix a partir de mRNAs i conté sols les regions
codificants de proteïnes
a. Vertader
b. Fals

Answer 21

b

Question 22

Només una de les següents afirmacions és correcta:
a. La fosfatasa elimina el P de l’extrem 3’ de molècules d’àcids nucleics
b. La desfosforilació dels extrems cohesius d’un vector digerit amb un ER impedeix
la seva recircularització efectiva
c. Les cinases són molt útils per marcar radioactivament molècules d’àcids
nucleics, a l’afegir P a l’extrem 3’ que han deixat les fosfatases
d. Per evitar la recircularització d’un vector s’empra l’enzim cinasa

Answer 22

b

Question 23

A. Per marcar radioactivament el DNA s’empra la DNA polimerasa I i dATP marcat en el
fosfat gamma. B. La cinasa pot introduir grups fosfat marcats en els extrems 5’-OH del
DNA
a. Només A vertadera
b. A i B vertaderes
c. A i B falses
d. Només B vertadera

Answer 23

d

Question 24

Un clon es una còpia exacte de:
a. un organisme
b. totes les respostes són vàlides .
c. una cèl·lula
d. una seqüència d’un gen

Answer 24

b

Question 25

Indica la resposta falsa. La trasncriptasa inversa és un enzim utilitzar per manipular àcids
nucleics que:
a. Té activitat RNApolimerasa
b. Procedeix de retrovirus
c. Té activitat RNAasa
d. Fa servir RNA com a motlle

Answer 25

a

Question 26

Aplicacions d’una sonda de DNA:
a. Es pot utilitzar per a seleccionar un clon determinat dins una genoteca
b. Les sondes són habitualment emprades en métodes de seqüenciació
termociclica automàtica
c. Hibrida especificament amb la seqüència aminoacidica d’una proteina
d. Seveix per fragmentar especificament un plasmidi

Answer 26

a

Question 27

Els plasmidis recombinants generalment són introduits a les cèl·lules bacterianes
mitjançant:
a. Medis quimics
b. Transfecció mitjançant liposomes
c. Microinjeccio
d. Pistoles gèniques

Answer 27

a

Question 28

Quan es clona un fragment de DNA amb extrems EcoRI en un plasmidi digerit amb EcoRI
pot ocorre el següent:
a. E. Són correctes les respostes A i C
b. C. Es conserven els llocs de tall
c. D.No es necessari el tractament amb fosfatasa del plasmidi, ja que mai tendrem vectors
recircularitzats
d. B. Totes les respostes són correctes
e. A. Es pot clonar el fragment en ambdues orientacions

Answer 28

a

Question 29

La clonacio molecular o clonatge
a. Permet amplificar el número molecular d’un determinat fragment de DNA.
b. Es un metode per generar mutacions al DNA
c. Serveix per determinar la seqüència de nucleotids del DNA
d. S’empra per obtenir hibrids entre molècules de DNA i RNA.

Answer 29

a

Question 30

Els enzims de restriccio que generen extrems cohesius:
a. Catalitzen dos talls a la mateixa cadena de DNA
b. Catalitzen un tall únic a l’esquelet de DNA
c. Catalitzen dos talls asimètrics a l’esquelet del DNA.
d. Catalitzen dos talls a l’esquelet de DNA directament en el mateix nivell de la doble helix

Answer 30

c

Question 31

Per construir genoteca de cDNA
a. Es poden emprar per obtenir el mRNAs, columnes de cel·lulosa amb oli dT, o bolles
magnètiques amb olidT o gradients de sacarosa per aïllar els complexes
RNAm-ribosomes.
b. Totes les afirmacions són certes.
c. S’aprofita el fet de que la majoria de RNAm són poliadenilats a l’extrem 3’ per obtenir el
material de partida
d. El primer pas és aïllar i purificar el mRNA i comprovar la seva integritat, ja que és
fàcilment degradable.

Answer 31

b

Question 32

Un dels descobriments més significatius que afavoriren el desenvolupament de la tecnologia
del DNA recombinant va ser:
a. El descobriment d’antibiòtics per seleccionar els bacteris transformats
b. La utilització de les DNA polimerases per obtenir còpies complementàries de DNA
c. El desenvolupament de les tècniques d’hibridació molecular
d. La identificació i aïllament dels enzims de restricció de tipus II

Answer 32

d

Question 33

Indica la resposta falsa. Quan es clona un fragment de DNA amb extrems EcoRI i BamHI en
un plasmidi digerit amb EcoRI i BamHI, pot ocórrer el següent :
a. No és necessari el tractament amb fosfatasa del plasmidi
b. Es pot clonar el fragment en ambdues orientacions
c. Es conserven el/s lloc/s de tall
d. El fragment sols se pot inserir en una direcció

Answer 33

b

Question 34

Organitza amb l’ordre adequat els següents pasos en la construcció d’una genoteca
genòmica:
1-Ligació del vector i l’insert emprant una DNA ligasa
2-Aïllament del DNA genòmc d’un organisme
3-Transformació de la cèl·lula hoste
4-Digestió del DNA genòmic i del vector amb el mateix enzim de restricció
5-Identificació de les cèl·lules transformades en un medi selectiu
a. 1-2-3-4-5
b. 2-4-1-3-5
c. 2-1-4-3-5
d. 4-1-3-2-5

Answer 34

b

Question 35

Una genoteca genòmica se construeix a partir de mRNAs i conté sols les regions codificatns
de proteïnes
a. Vertader
b. Fals

Answer 35

b

Question 36

Per clonar un fragment de DNA se pot emprar com a vector:
a. un plasmid i
b. un llevat
c. un promotor
d. un RNAm

Answer 36

a

Question 37

Un clon d’una genoteca genòmica pot contenir més d’un gen, però això no és el cas dels
clons d’una genoteca de cDNA, ja que:
a. els vectors emprats en les genoteques de cDNA sols admeten un gen
b. els cel·lules hostes no poden ser transformades amb vectors que contenguin més d’un
gen
c. s’empren diferents enzims de restricció
d. cada fragment de cDNA clonat en cada vector correspon al mRNA d’una única unitat de
transcripció

Answer 37

d

Question 38

El millor mètode per impedir que es clonin múltiples còpies d’un fragment de DNA amb
extrems BamH I en un plasmidi digerit amb BglII (extrems compatibles) és tractant l’insert amb
……………….. i lligant amb ligasa del fag T4 .
a. Cinasa
b. Klenow
c. Un enzim de restricció
d. Fosfatasa

Answer 38

?

Question 39

Quina de les següents eines de la tecnologia del DNA recombinant està incorrectament
emparellada amb el procés en el que s’empra?
a. hibridacció-detecció de clons portadors del DNA d’interès
b. DNA ligasa-tall de DNA, generant fragments amb extrems cohesius
c. transformació-estat de competència de les cèl.lules
d. endonucleasa de restricció-generació de fragments de DNA per a la seva clonació

Answer 39

b

Question 40

De quin organisme provenen les transcriptases inverses que s’empren habitualmente a
Engenieria Genètica?
a. Bacteriòfag T7
b. E.Coli
c. Cap de les respostes és vàlida
d. Pancrees boví

Answer 40

c

Question 41

Els plasmidis de control relaxat (rop-)
a. són plasmidis promiscus
b. són plasmidis amb un baix número de còpies
c. també s’anomenen estrictes
d. són plasmidis amb un alt número de còpies

Answer 41

d

Question 42

Només una de les següents afirmacions és falsa:
a. Els llocs de restricció presents en el MCS ( multicloning site ) d’un vector no estan
representats en cap altre lloc de la molècula.
b. Els vectors plasmídics són capaços d’albergar inserts de més de 5000 kb.
c. La desfosforilació dels extrems 5 ‘d’un vector prèviament digerit mitjançant una sola
restrictasa impedeix la seva recircularizació en presència de ligasa.
d. Les restrictases de tipus I digereixen el DNA en una seqüència diferent de la que
reconeixen.

Answer 42

b

Question 43

Quina ordenació de vectors de clonació és correcta tenint en compte la longitud de major a
menor dels inserts que pot contenir?
a. YACs, BACs, cosmidis, vectors derivats de lambda i vectors plasmídics
b. cosmidis, BACs, YACs, vectors derivats de lambda i vectors plasmídics
c. BACs, YACs, vectors derivats de lambda, cosmidis i vectors plasmídics
d. YACs, cosmidis, vectors derivats de lambda, vectors plasmídics i BACs

Answer 43

a

Question 44

Quina de les següents seqüències és inversament capicua (palindròmica)?
a. 5 ‘GCAACG 3’
b. 5 ‘GCATGC 3’
c. 5 ‘GGAAAAGG 3’
d. 5 ‘GCAT 3’
e. 5 ‘GCAACGC 3 ‘

Answer 44

b

Question 45

L’enzim que s’empra per hidrolitzar o tallar DNA, s’anomena:
a. RNAsa
b. Transcriptasa inversa
c. Totes les opcions són vàlides
d. Nucleasa

Answer 45

d

Question 46

Els vectors de clonació se poden ordenar, de major a menor grandària del insert que poden
portar, de la manera següent:
a. Vectors d’inserció derivats de λ, vectors de reemplaçament derivats de λ i vectors
plasmídics.
b. Cosmidis, BACS, vectors derivats de λ i vectors plasmídics
c. BACs, cosmidis, vectors derivats de λ i vectors plasmídics.
d. BACs, vectors derivats de λ, cosmidis i vectors plasmídics .

Answer 46

c

Question 47

Per construir una genoteca de cDNA
a. Es poden emprar, per obtenir el mRNAs, columnes de cel*lulosa amb oli dT, o bolles
magnètiques amb olidT o gradients de sacarosa per aïllar els complexes
RNAm-ribosomes.
b. Totes les afirmacions són certes.
c. El primer pas és aïllar i purificar el mRNA i comprovar la seva integritat, ja que és
fàcilment degradable.
d. S’aprofita el fet de que la majoria de RNAm són poliadenilats a l’extrem 3’ per obtenir el
material de partida

Answer 47

b

Question 48

En termes de funció, l‘”oposat” d’una polimerasa és una
Trieu-ne una:
a. Luciferasa.
b. Fosfatasa.
c. Ligasa.
d. β-galactosidasa.
e. Nucleasa.

Answer 48

e

Question 49

El marcatge de sondes
Trieu-ne una:
a. Es pot fer mitjançant radioactivitat, fluorocroms o digoxigenina.
b. Es pot fer per mitjançant la incorporació de P32 amb l’ajuda d’una cinasa i una ligasa, tot i
que és un mètode ja no gaire emprat
c. Es pot fer pel mètode de random priming (encebament a l’atzar) que empra el fragment
Klenow com a polimerasa i com a encebadors tetranucleòtids a l’atzar.
d. Es pot fer pel mètode del desplaçament de tall ( nick translation ) emprant la exonucleasa Exo
III d’ E.Coli i la DNA polimerasa I.

Answer 49

?

Question 50

Un clon d’una genoteca genòmica pot contenir més d’un gen, però això no és el cas dels
clons d’una genoteca de cDNA, ja que:
Trieu-ne una:
a. els cel·lules hostes no poden ser transformades amb vectors que contenguin més d’un gen
b. s’empren diferents enzims de restricció
c. cada fragment de cDNA clonat en cada vector correspon al mRNA d’una única unitat de
transcripció
d. els vectors emprats en les genoteques de cDNA sols admeten un gen

Answer 50

c

Question 51

El clonatge s’empra frequentment per amplificar:
a) tant fragments de DNA codificant com no codificant
b) seqüències de DNA de tipus promotor o seqüències reguladores
c) cap de les opcions és vàlida
d) fragments de DNA codificants

Answer 51

a

Question 52

La nucleasa S1 s’obté d’ Aspergillus niger. B) La nucleasa Bal31 s’obté de Alteromonas
espejiana.
a) només A vertadera.
b) A i B falses.
c) A i B vertaderes.
d) Només B vertadera.

Answer 52

d

Question 53

Sols una afirmació és falsa repecte al procés de construcció d’una genoteca genòmica:
a) L’ordre que s’ha de seguir és la preparació dels inserts i del vector, la lligació, la
transformació de l’hoste i la selecció dels transformants.
b) Se necessiten diferents enzims, entre ells enzims de restricció, transcriptasa inversa i
ligasa.
c) La probabilitat de contenir un determinat fragment depèn del número de clons en
que se construeix.
d) Necessita diferents enzims, bàsicament nucleases de restricció de tipus II i ligasa.

Answer 53

b

Question 54

Selecciona l’afirmació falsa respecte als plasmidis:
a) no són autoreplicatius, és a dir la seva replicació depèn de la cèl·lula hoste
b) habitualment són elements extracromosòmics
c) són de DNA de doble cadena
d) generalment el seu DNA és circular

Answer 54

a

Question 55

En el context de les tècniques de manipulació d’ADN, una sonda:
a) Pot ser d’ADN o d’ARN.
b) Són certes totes les respostes.
c) Ha d’estar marcada per poder-se detectar la seva localització.
d) Pot provenir d’una espècie diferent a la del gen que volem identificar.
e) És un àcid nucleic de seqüència coneguda que és total o parcialment complementari
a la molècula que volem detectar o localitzar.

Answer 55

b

Question 56

Respecte al rastreig de genoteques, sols una de les següents afirmacions és falsa:
a) Es pot dissenyar una sonda per localitzar el clon/ns d’interès mitjançant un fragment
de DNA del mateix gen d’una espècie propera.
b) Es pot dissenyar una sonda per localitzar el clon/ns d’interès mitjançant un oligo
derivat de la seqüència del producte proteic del gen, tenint en compte la
degeneració del codi.
c) Si el gen que cercam s’expressa de manera preferent en un teixit específic, una
genoteca genòmica facilitarà la identificació del clon/ns d’interès.
d) La hibridació in situ o colony blotting permet localitzar a la placa mare el clon/ns
cercat/s.

Answer 56

c

Question 57

Les genoteques genòmiques:
a) És usual emprar l’enzim SauA 3 per obtenir els fragments del genoma ja que genera
extrems roms compatibles amb els de BamH 1 en que se talla el vector.
b) Sols són útils en el cas de genomes procariotes, en el cas d’eucariotes se fan sempre
genoteques de cDNA.
c) Contenen fragments a l’atzar del genoma, tallats per digestió total amb un enzim de
restricció de diana de 4bp.
d) Contenen fragments encavalcats que s’obtenen habitualment per digestió parcial
amb un o dos enzims de restricció o per mètodes físics.

Answer 57

d

Question 58

El fragment Klenow emprat a molts de protocols d’EG:
Trieu-ne una:
a. Sols manté l’activitat de polimerasa, sintetitzant en direcció 3’-5’
b. Sols manté l’activitat de polimerasa sintetitzant en direcció 5’-3’
c. Correspon a un fragment de la DNApol I d’ E.coli que ha perdut l’activitat exonucleàsica
3’-5’, però mantén l’activitat exonucleàsica 5’-3’.
d. Correspon a un fragment de la DNApol I d’ E.coli que ha perdut l’activitat exonucleàsica
5’-3’, però mantén l’activitat exonucleàsica 3’-5’.

Answer 58

d

Question 59

En relació a les endonucleases de restricció de tipus II, només una de les afirmacions
següents és falsa:
Trieu-ne una:
a. Encara que la majoria talla en la diana que reconeix, algunes tallen a més d’un miler de
nucleòtids de distància.
b. Es coneixen algunes que reconeixen dianes de restricció no idèntiques, però produeixen
extrems cohesius compatibles.
c. Es coneixen algunes que reconeixen la mateixa diana de restricció, produint extrems
cohesius diferents.
d. Reconeixen generalment dianes palindròmiques.

Answer 59

a

Question 60

Quina afirmació és falsa respecte a les genoteques de cDNA
Trieu-ne una:
a. Són necessaris menys clons que a les genòmiques i són dependents del teixit o tipus
cel*lular de partida.
b. Sols tenen sentit en organismes eucariotes, atesa la petita longitud del seu genoma dels
procariotes.
c. Requereixen de la trancriptasa inversa per ser construïdes.
d. Empren sempre com a vectors cosmidis, YACS, BACS o derivats de fag lambda, mai els
vectors derivats de plasmidis, ja que la longitud de l’insert que poden portar resulta
massa petit.
61.

Answer 60

d

Question 61

Si vols estudiar el promotor que controla l’expressió d’un gen eucariota, quin material
de partida empraries?
Trieu-ne una:
a. un clon aïllat d’una genoteca genòmica
b. el producte amplificat per PCR de la regió codificant del gen
c. un clon aïllat d’una genoteca de cDNA
d. qualsevol de les respostes és vàlida

Answer 61

?