teste de sensibilidade a antimicrobianos- TSA Flashcards
O que são antimicrobianos?
Compostos que controlam a multiplicação bacteriana.
O que são bacteriostáticos?
Substâncias que promovem a estase do metabolismo, com paragem da mutliplicação.
O que são bactericidas?
Substâncias que promovem a lise celular, levando à morte celular.
O que permite o TSA.
Permite determinar o perfil de suscetibilidade/resistência de uma cultura bacteriana pura em relação a uma gama de AB.
Diferencia a concentração mínima inibitória da concentração mínima bactericida.
A determinação da eficácia de um fármaco antimicrobiano baseia-se no conceito de concentração mínima inibitória.
A CMI é a menor concentração de um AB capaz de prevenir a multiplicação bacteriana in vitro. Existem diferentes categorias de suscetibilidade.
A CMB é a redução de 99,9% do inóculo original.
Como se determina a CMI?
Através de placas de 96 poços com meio Mueller-Hinton líquido com concentrações decrescentes de AB.
Estes poços são inoculados com uma quantidade de inóculo bacteriano de concentração conhecida.
Após a incubação observa-se a multiplicação através da turvação do meio.
A maior diluição do fármaco (menor concentração de AB) que inibe a multiplicação bacteriana é a CMI.
Como se determina a CMB?
Após aferir a CMI, a suspensão bacteriana do poço correspondente à CMI é transferida para um novo meio sem AB e sujeita a incubação.
Se não ocorrer crescimento a CMB é igual à CMI (bactericida).
Se ocorrer crescimento a CMB é maior do que a CMI (bacteriostático). Nesta situação é necessário elevar a concentração do fármaco de modo a induzir a morte bacteriana.
Para determinar o valor exato da CMB deve-se semear todos os tubos sem crescimento.
O que é um E-test?
Nova metodologia para a determinação da CMI.
Placa com MH agar semeada por inundação ou toalha. Colocar à superfície uma tira com um AB específico, na qual a concentração de AB diminui de cima para baixo. Incubação, onde ocorre a difusão do AB no meio de agar.
Aqui a CMI é a menor concentração de AB a partir da qual ocorre inibição da multiplicação bacteriana.
Caracteriza os testes de difusão através do método de Kirby Bauer.
Método mais utilizado para testar a sensibilidade de uma cultura pura face a vários antibióticos.
Coloca-se um disco impregnado com uma concentração conhecida de AB na superfície do agar semeado por tapete com uma cultura pura de concentração conhecida.
Ocorre a difusão radial do AB do disco, criando um gradiente de concentração. Após incubação verifica-se a presença de um halo de inibição.
A interpretação dos halos de inibição de crescimento é baseada em tabelas de leitura que relacionam o diâmetro do halo com a resistência bacteriana ao AB testado.
Que três zonas de inibição existem nos testes de difusão?
Suscetibilidade, intermédia e resistência.
É suscetível se a multiplicação ocorrer na zona em que a concentração do AB é inferior à CMI, significa que concentrações baixas de AB conseguem inibir a multiplicação bacteriana.
Se for intermédia significa que a concentração não é suficiente para inibir toda a população bacteriana, ou seja, o AB pode não ser o mais adequado.
Quais as condições essenciais para realização de um TSA?
- Pureza das culturas. TSA é realizado sobre uma película uniforme de crescimento, sendo difícil distinguir se temos mais do que um tipo morfológico.
2 Controle do grau de turvação da suspensão inocular. É necessário garantir a formação de uma película de crescimento uniforme. Se a película for muito densa há uma subestimação do halo, caso contrário há uma sobrestimação. - Composição do meio. Disponibilidade de AB é maior em meio líquido. Não podem existir iões metálicos nem antagonistas específicos.
- Escolha dos antibióticos a testar.
- Condições de incubação. Ter em atenção o tempo e atmosfera.
- Utilização de tabelas de leitura. Quando a espécie bacteriana ou animal não se encontram referenciadas utilizam-se os valores mais relacionados. Quando não há dados relativos a isolados veterinários recorre-se aos limites definidos para isolados humanos.
