Übung 3 Flashcards
(13 cards)
Aufgabe mit Fluorophor und Labelgrad
Extinktionen bei jeder Wellenlänge von beiden Stoffen zusammengerechnet
explizit hinschreiben, dass Protein nur bei einer Wellenlägen absorbiert (und bei der anderen E=0);
Labelgrad: Konzentration Fluorophor/Protein
andere Möglichkeit der Konzentratinsbestimmung: d=(EP, 280-Ep650Korrekturfaktor)/(etaP280d)
Massenkonzentration berechnen
beta=c*M
Jablonski-Schema
vereinfachte Energieniveau-Schema zur Beschreibung spektroskopischer und photochemischer Eigenschaften
Welcher Übergang bei Fluoreszenz
S1-> S0
Phosphoreszenz
Materia leuchet nach Bestrahlung längere Zeit nach
Anhebung in S1 -> Intersystem Crossing (spin-verboteneer Übergang) in T1 (relativ langsam) -> Unter Lichtabgabe in grundzustand S0
Ursachen des Stokes-Shift
1) Schwingungsrelaxation
- Anregung durch Absorption von S0 auf energetisch höheren Zustand, sehr schnell
- Relaxation in elektrischen Grundzustand, umgebundsabhängiger
-weniger relavant als Lösungsmittelrelaxation
auf Strukturänderung zurückzuführend
-vor Fluoreszenz gibt Molekül überschüssige Energie durch Schwingungsrelaxation ab, Emission von energetisch tieferem Niveau
-schneller als Fluoreszenz
2) Lösungsmittelrelaxation
-ungünstige Anordnung vom LM-Relaxation nach Anregung
-Reorientierung nach Anregung und damit verbundene Anhebung des Grundniveaus -> Energieabsenkung
-LM-Relaxation hat stärkere Auswirkungen
-Änderung des Dipolmoments nach Anregung, Umbau der Solvathülle, energetischer Absenkung des angeregten Zustands
-größerer Einfluss
-Reorientierung nach Anregung, Grundniveau angehoben
ungünstige Anordnung von LM-Molekülen
FRET
strahlungslose Anregungsübertragung zu anderem Molekül
Donor-Molekül gibt Energie ab, Akzeptor nimmt auf
Förster-Radius; Effizienz der Energieübertragung abstandsabhängig
Absorptionswellenlängen dürfen nicht überlappen
Emissionsbereich des Donors muss Absorptionsbereich des Akzeptors entsprechen
Nutzung FRET
Protein-Protein-Interkationen
Rezeptor-Ligand-Bindung
Konformationsänderung von Proteinen
Polarimetrie
untersuchung der Polarisation von Transversalwellen
Rotation der Polarisationsebene direkt porportional zum Kern
Formel Polarimetrie
alpha=alpha0cd
alpha: Drehwinkel, Messgröße, Winkel, um den Drehachse geändert wird
alpha0:spezifisches Dehvermögen; optische Aktivität einer Substanz
hängen spezifische Drehung und der gemessene Drehwinkel von der Wellenlänge des polarisierten Lichts ab?
spezifischer Drehwinkel hängt ab von: T (senkt), Wellenlänge (senkt) , meist Na D-Linie=589 nm; LM (meist wässrig), d (steigert Winkel), c (steigert Winkel meist)
Def optische Aktivität
eigenschaft, Polarisationsrichtung des Lichtszu drehen
Def Polarimetrie
Untersuchung der Polarisation von Transversalwellen
