Ultracentrifugation Flashcards
Pourquoi est-ce que les molécules ne pourraient jamais sédimenter naturellement ?
L’agitation thermique les disperse constament.
Quelle est la condition pour que les molécules sédimentent ?
Il faut qu’elles soient surjettent à des accélérations énormes.
Quelle est la force maximale, environ, qu’une ultracentrifugeuse peut exercer ?
600,000 X g
De quoi dépend la vitesse de sédimentation d’une molécule dans une ultracentrifugeuse ?
De sa masse
Comment calcule-t-on la force de sédimentation ?
C’est la force centrifuge moins la force de déplacement de la solution (force de flottaison)
Outre la force de flottaison, qu’est-ce qui ralentit la sédimentation des protéines par centrifugeuse ?
La frottement de la protéines d’intérêts aux autres composantes de la solution.
Une particule dans une centrifugeuse va accélérer jusqu’à temps que quoi ?
Que toutes les forces s’annulent
À quoi sert de savoir où la molécule s’arrête dans la centrifugation ?
Calculer sa masse molécularie
Qu’est-ce que le coefficient de sédimentation S ?
C’est une valeur calculé en 10^-13 secondes connues sous forme de Svelbergs. Analogue au coefficient de mobilité pour une électrophorèse.
Malgré qu’il existe aujourd’hui plusieurs méthodes pour calculer la masse moléculaire, dans quelle situation utilise-t-on encore l’ultracentrifugation ?
Dans le cas d’analyse de complexe de macromolécules
Que permet l’ultracentrifugation de zone ?
Séparer les molécules dépendamment de leur coefficient de sédimentation.
Dans le cas d’une ultracentrifugation de zone, sous quelle forme est déposée la solution de macromolécules ?
Sous forme de couche en haut d’un gradient de densité préparé au préalable.
Qu’est-ce qu’on utilise pour former le gradient de concentration dans l’ultracentrifugation de zone ?
Le saccharose
Que peut-on dire à propos des macromolécules de même forme lorsqu’elles sont centrifugées dans une ultracentrifugation de zone ?
Elles sont centrifugées selon leur masse moléculaire
Quelle est l’utilité de l’ultracentrifugation isotonique ou par densité d’équilibre ?
Elle sépare les molécules selon leur densité
