W3ZO's

Question 1

Immunoblot

Answer 1

• bestuderen eiwit in een weefsel- of celextract
• eiwitten worden gedenatureerd en op grootte van elkaar gescheiden mbv SDS-elektroforese in gels
• het te onderzoeken eiwit wordt op de gel zichtbaar gemaakt met het antilichaam

Question 2

Aflezen op de blot

Answer 2

• positie eiwitband: het MW (grootte) van het eiwit
• intensiteit vd band: de hoeveelheid vh eiwit
• het aantal verschillende banden: of er meerdere vormen van een eiwit voorkomen of meerdere soorten eiwitten die met het antilichaam kunnen reageren

Question 3

Immuunprecipitatie

Answer 3

Het extract wordt behandeld met het antilichaam, de eiwit-antilichaam complexen slaan neer (precipiteren) en kunnen worden geïsoleerd en geanalyseerd

Question 4

Moleculaire hybridisatie

Answer 4

Vorming van een dubbele helix uit 2 enkelstrengige nucleïnezuren met een homologe nucleotidenvolgorde
-> om stecifieke mRNAs te bekijken

Question 5

Probe

Answer 5

Een bekend stuk enkelstrengig DNA dat kan hybridiseren met een specifiek enkelstrengig DNA of RNA molecuul

Question 6

RNA-blot

Answer 6

ipv het antilichaam wordt nu een probe gebruikt die fluorescerend of radioactief is gemarkeerd, zodat hij zichtbaar gemaakt kan worden

Question 7

Colchicine

Answer 7

Gebruikt om de cellen in de prometafase te stoppen door remming vd microtubuli en er geen spoelfiguur wordt gevormd

Question 8

Chromosome painting

Answer 8

Mengsel gebruiken van een groot aantal probes die specifiek zijn voor eenzelfde chromosoom

Question 9

Aneuploïdie

Answer 9

Abnormale hoeveelheid DNA in een cel

Question 10

Microsatelliet analyse (MA)

Answer 10

• verlies van chromosoom fragmenten opsporen

- microsatellieten bestaan uit korte repeterende sequenties, en worden geanalyseerd door DNA te amplificeren met PCR

Question 11

APC-eiwit en bèta catenine

Answer 11

• APC bindt aan bèta catenine en zorgt dat het afgebroken wordt -> transcriptiefactor TCF4 kan niet worden gestimuleerd -> cycline D niet geactiveerd
• bij niet functioneel APC eiwit wordt bèta-catenine niet meer afgebroken -> meer celcyclus

Question 12

Functies telomeer onderdelen

Answer 12

• herhaalde TTAGGG sequentie: buffer tegen beperkt verlies
• T-loop: bijdragen aan verbergen vh open uiteinde voor verschillende enzymen
• telomeer-specifieke eiwitten: maken en stabiliseren telomeer structuur, aantrekken telomerase

Question 13

MicroRNA

Answer 13

• 21 nucleotiden lang
• bindtaan mRNA moleculen waarvan ze de stabiliteit of mate van translatie kunnen regelen
• zijn gedeeltelijk complementair met het te reguleren mRNA
• kunnen bijdragen aan tumorgroei door vermindering genproducten tumorsuppressorgenen

Question 14

siRNAs

Answer 14

kunnen afbraak mRNA veroorzaken