14. Flashcards
(27 cards)
generacijsko vrijeme kvasca
90min
kolko DNA je kodirajaće u kvasca
70%
NUŽNI UVJETI ZA KONJUGACIJU
kvasca
stanice različitog tipa parenja (a i α)
homozigotnost za tip parenja (a ili α)
G1faza
NUŽNI UVJETI ZA MEJOZU kvasca
heterozigotnost za tip parenja (a/α)
G1faza staničnog ciklusa
nefermentabilni izvor ugljika (KAc)
koraci konjugacije kod kvasca
- Vezanje feromona na receptore
- Zaustavljanje staničnog ciklusa
- Morfološke promjene
- Fuzija stanica
- Fuzija jezgara
- Pupanje diploidne stanice
- Diploidna stanica
a-specifični geni
strukturni geni
- MFA1, MFA2
polipeptidi - pro-a-feromon
postranslacijske modifikacije
- Ste6, Ste14 i Ste16
nastaje a-feromon i STE 2 (receptor alfe )
α-specifični geni
strukturni geni-MFα1, MFα2
polipeptidi-pre-pro-α-feromon
postranslacijske modifikacije -Ste13,Kex1i Kex2
nastaju α-feromon i STE3 (receptor za a-feromon)
STE 2
receptor za α-feromon
STE 3
receptor za a-feromon
podjedinice G-proteina, vežu GTP i GDP
GPA1, STE4 i STE18
protein kinaze
STE7, STE11 i FUS3
aktivator transkripcije
STE12
disekcija askusa (razdvajanje spora)
enzimska razgradnja askusa
• razdvajanje spora pomoću mikromanipulatora, na hranjivoj podlozi
• inkubacija pri 28-30°C
Homotalizam
promjena tipa parenja
Kako se odvija Promjena tipa parenja
gen HO cijepa MATa i on se popravlja prema HML alfa i nastaje MATalfa
gen HO cijepa MATalfa i on se popravlja prema HMRa
Heterotalični sojevi kvasca
ne mijenjaju tip parenja
- ne diploidiziraju
- laboratorijski sojevi
protein α1
pozitivni regulator α-specifičnih gena (sinteza α-feromona i a-receptora . . .)
protein α2
negativni regulator a-specifičnih gena
proteinski dimer a1α2
negativni regulator haploid-specifičnih karakteristika
pozitivni regulator diploid-specifičnih karakteristika
protein a2
nema ulogu
Regulacija tipa parenja kvasca
STANICA α-TIPA PARENJA (α1 i α2)
- protein α1 - aktivira α-specifične gene (sinteza α-feromona i a-receptora)
- protein α2 - reprimira a-specifične gene
STANICA a-TIPA PARENJA (a1 i a2)
- a-specifični geni eksprimiraju se konstitutivno
- nema proteina α1 - nema aktivacije α-karakterističnih gena
- nema proteina α2 - nema represije a-karakterističnih gena
STANICA a/α-TIPA PARENJA
- protein α2 – reprimira a-karakteristike
- proteinski dimer a1α2 – reprimira haploid-specifične gene (nema sinteze
feromona, feromonskih receptora i proteina α1) i aktivira diploid specifične
gene (moguća mejoza)
STANICA a/α-TIPA PARENJA
- protein α2 – reprimira a-karakteristike
- proteinski dimer a1α2 – reprimira haploid-specifične gene (nema sinteze
feromona, feromonskih receptora i proteina α1) i aktivira diploid specifične
gene (moguća mejoza)
Profaza mejoze l
leptoten, zigoten, pahiten, diploten i dijakineza
• leptoten
• promjena u organizaciji kromatina – nastaju nove proteinske strukture
• indukcija dvolančanih lomova u DNA (oko 250 lomova/stanici)
• vezanje specifičnih proteina za lomove – stvaranje ranih
rekombinacijskih čvorova (nodula)
• zigoten
• sparivanje homolognih kromosoma
• nestaju dvolančani lomovi i nastaju rekombinacijski intermedijeri
• formiranje sinaptonemskog kompleksa
pahiten
• formiraju se bivalenti (spareni homologni kromosomi)
• sinaptonemalni kompleks je potpuno formiran
• razrješavanje rekombinacijskih intermedijera
• kasni rekombinacijski intermedijeri rezultiraju recipročnom
rekombinacijom (“crossing over”)
• diploten i dijakineza
• disocijacija sinaptonemalnog kompleksa
• zadržava se veza između sestrinskih kromatida
• kromosomi se još više kondenziraju, vidljive hijazme (veze između
homolognih kromosoma)
• priprema kromosoma za metafazu
pahiten
formiraju se bivalenti (spareni homologni kromosomi)
• sinaptonemalni kompleks je potpuno formiran
• razrješavanje rekombinacijskih intermedijera
• kasni rekombinacijski intermedijeri rezultiraju recipročnom
rekombinacijom (“crossing over”)
leptoten
promjena u organizaciji kromatina – nastaju nove proteinske strukture
• indukcija dvolančanih lomova u DNA (oko 250 lomova/stanici)
• vezanje specifičnih proteina za lomove – stvaranje ranih
rekombinacijskih čvorova (nodula)