Θεωρία 6 Flashcards
(16 cards)
Ποια είναι η αντίδραση του κυτταρικού χυμού στην εκχύλιση με οργανικούς διαλύτες;
Μετά από την εκχύλιση του κυτταρικού χυμού με οργανικούς διαλύτες τα μακρομόρια του κυττάρου διαλύονται ενώ τα νουκλεϊκά οξέα επιπλέουν. Επομένως τα νουκλεϊκά οξέα είναι ανθεκτικά και δεν αποδιοργανώνονται με παρουσία οργανικών διαλυτών.
Με ποιους τρόπους γίνεται ο διαχωρισμός των DNA και των RNA;
> Με διάφορα χημικά μέσα
Με χρήση ενζύμων που καταστρέφουν το ένα από τα δύο
Με υπερφυγοκέντρηση με πυκνό διάλυμα σακχάρων ή CsCl
Τι είναι η ηλεκτροφόρηση;
Η ηλεκτροφόρηση με πηκτή ακρυλαμιδίου ή αγαρόζης είναι ο ευκολότερος τρόπος διαχωρισμού νουκλεϊκών οξέων με βάση το μέγεθός τους.
Πως υπολογίζεται το μοριακό βάρος ενός νουκλεϊκού οξέος με ηλεκτροφόρηση;
Το μοριακό βάρος ενός νουκλεϊκού οξέος υπολογίζεται όταν παράλληλα με την ηλεκτροφόρηση του άγνωστου νουκλεϊκού οξέος ηλεκτροφορηθούν νουκλεϊκά οξέα γνωστού μοριακού βάρους.
Τι είναι η Southern ή νότια μεταφορά;
Southern ή νότια μεταφορά είναι η μεταφορά των κομματιών DNA που ξεχωρίστηκαν κατά την ηλεκτροφόρηση σε φύλλο από στυπόχαρτο με την συμπίεση του πάνω στην επιφάνεια της πήκτης αγαρόζης.
Τι είναι η βόρεια μεταφορά;
Η μεταφορά των κομματιών RNA από την πήκτη σε φύλλο από στυπόχαρτο.
Πως γίνεται υβριδισμός με την χρήση των DNA κομματιών σε φύλλο στυπόχαρτου;
Αφού τα κομμάτια DNA μεταφερθούν σε φύλλο στυπόχαρτου, επιφέρονται σε αυτά τα μέσα μετουσίωσης και έπειτα από αυτή τη διαδικασία παραμένουν στην επιφάνεια μονές αλυσίδες DNA. Με αυτές μπορούν να γίνουν πειράματα υβριδισμού.
Πως εντοπίζουμε από ποια DNA αλυσίδα προήλθε ένα συγκεκριμένο RNA με τον υβριδισμό σε φύλλο στυπόχαρτου;
Σημάνουμε το RNA του οποίου θελουμε να βρούμε το αντίστοιχο DNA με ραδιενέργια. Έπειτα το μεταφέρουμε στο στυπόχαρτο με τις μονές αλυσίδες DNA και αφήνουμε το ραδιενεργό RNA να ζευγαρώσει με το αντίστοιχο DNA και έπειτα με το ευαίσθητο στη ραδιενεργή ακτινοβολία φωτογραφικό φίλμ εντοπίζουμε το σημείο που έχουν ζευγαρώσει οι δύο αλυσίδες.
Τι είναι τα περιοριστικά ένζυμα;
Περιοριστικά ένζυμα είναι αυτά τα οποία κόβουν το DNA σε συγκεκριμένες αλληλουχίες βάσεων του.
Ποια είναι τα είδη περιοριστικών ενζύμων;
Τύπου I: Κόβει το μόριο DNA στο ίδιο σημείο και τις δύο αλυσίδες
Τύπου II: Κόβει τις δύο αλυσίδες του DNA σε διαφορετικά σημεία τους
Πως γίνεται η σύνθεση του γονιδίου στο εργαστήριο;
Με την μέθοδο της αντίστροφης μεταγραφής.
Τι είναι η αντίστροφη μεταγραφή;
Η σύνθεση DNA με την βοήθεια του ενζύμου RNA κατευθυνόμενη DNA πολυμεράση, η οποία διαβάζει το mRNA και συνθέτει το DNA, σύμφωνα με τον κανόνα συμπληρωματικότητας των βάσεων.
Τι είναι η ανοσοκατακρήμνιση πολυσωμάτων;
Μέθοδος με την οποία απομονώνουμε το RNA.
Τι είναι το πολύσωμα;
Το πολύσωμα είναι ένα σύμπλοκο το οποίο αποτελείται από το ριβόσωμα, το mRNA και το tRNA.
Ποια είναι η διαδικασία ανοσοκατακρήμνισης του πολυσώματος;
Τα πολυσώματα απομονώνονται με τη φυγοκέντρηση του κυτταρικού χυμού. Έπειτα απομονώνουμε το πολύσωμα που μας ενδιαφέρει με ένα αντίσωμα. Για να απομακρύνουμε τις πρωτεΐνες από το πολύσωμα το διαλύουμε σε οργανικό διαλύτη, και έτσι παραμένει το mRNA.
Τι είναι οι DNA ανιχνευτές;
DNA ανιχνευτές είναι μικρά τμήματα DNA με τα οποία εντοπίζουμε συγκεκριμένα γονίδια DNA.
