Θεωρία 7

Question 1

Τι είναι η PCR;

Answer 1

Η PCR ή αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης χρησιμοποιείται για την ποσοτική μεγέθυνση ενός συγκεκριμένου τμήματος DNA.

Question 2

Πόσα αντίτυπα τμημάτων δημιουργούνται σε διάστημα 3-4 ωρών με την PCR;

Answer 2

Περισσότερα από 1X10 εις την 6η.

Question 3

Με ποιο ένζυμο επιτελείται η διαδικασία της PCR;

Answer 3

Με την DNA πολυμεράση Ι.

Question 4

Τι είναι οι άλυσοι αφετηρίες;

Answer 4

Άλυσοι αφετηρίες είναι 2 συνθετικά ολιγονουκλεοτίδια τα οποία είναι συμπληρωματικά ως προς τις ακριανές αλληλουχίες του DNA στόχου. Οι αλυσίδες αυτές υβριδίζονται με τις μονόκλωνες αλυσίδες του DNA στόχου και από εκείνο το σημείο επεκτείνονται οι αλυσίδες με την DNA πολυμεράση.

Question 5

Από ποια στάδια αποτελείται ο κύκλος της PCR;

Answer 5

> Μετουσίωση: 94-95 βαθμούς για 30 sec έως 1 min
Υβριδισμός των αφετεριών: 55-65 βαθμούς για 30 sec έως 1 min
Επέκταση των αφετεριών/σύνθεση καινούριου κλώνου DNA: 72 βαθμούς, η ιδανική θερμοκρασία για την αντίδραση της πολυμεράσης

Question 6

Σε ποια συσκευή γίνεται η διαδικασία της PCR;

Answer 6

Στον θερμικό κυκλοποιητή, η οποία φέρει θερμαινόμενη πλάκα που μπορεί να εναλλάσει θερμοκρασίες με ταχύτητα και ακρίβεια.

Question 7

Ποια είναι τα συστατικά τα οποία χρησιμοποιούνται στη διαδικασία της PCR;

Answer 7

> DNA πολυμεράση
> Αφετηρίες - εκκινητές
> Γενετικό υλικό - αλληλουχία στόχος
> Ρυθμιστικό διάλυμα αντίδρασης και Mg2+
> Νουκλεοτίδια

Question 8

Τι είναι οι εκκινητές;

Answer 8

Οι εκκινητές είναι ολιγονουκλεοτίδια τα οποία οριοθετούν το τμήμα DNA που πρόκειται να πολλαπλασιαστεί.

Question 9

Τι έιναι το μεταμορφωμένο βακτήριο;

Answer 9

Το μεταμορφωμένο βακτήριο είναι αυτό στο οποίο εισάγεται το ανασυνδυασμένο DNA.

Question 10

Ποια είναι τα στάδια δημιουργίας μεταμορφωμένων βακτηρίων;

Answer 10

> Μοριακή κλωνοποίηση γονιδίων
Εισαγωγή του ανασυνδυασμένου DNA στο κύτταρο - ξενιστή
Επιλογή των μεταμορφωμένων βακτηρίων

Question 11

Τι είναι το πλασμίδιο R;

Answer 11

Πλασμίδιο R είναι αυτό το οποίο προσδίδει ανθεκτικότητα στα αντιβιοτικά.

Question 12

Πως ενσωματώνεται το γονίδιο στο πλασμίδιο;

Answer 12

Περιοριστικά ένζυμα κόβουν το πλασμίδιο και έπειτα λιγάσες εισάγουν το ξένο γονίδιο στο πλασμίδιο.

Question 13

Τι είναι τα πλασμίδια;

Answer 13

Τα πλασμίδια είναι μκρά κυκλκά DNA που βρ΄σκοντα στα προκαρυωτκά κύτταρα κα περιέχουν 1-2 γονίδια.

Question 14

Τι είναι Γενετικός δείκτης;

Answer 14

Γενετικός δείκτης είναι ένα απλό κληρονομικό γενετικό γνώρισμα με εύκολα αναγνωρισμένα αλληλόμορφα, το οποίο μπορεί να είναι ή να μην είναι μέρος του εκφραζόμενου γονιδίου. Χρησιμοποιείται για την μελέτη και ανάλυση του γενώματος.