Substratlära och odlingsteknik Flashcards

1
Q

Vad har bakterier för kemisk sammansättning?

A
70% vatten
Av torrvikten:
50% protein
25% RNA
22% annat
3% DNA
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Grundämnen i bakterier (procentuellt)

A
C 50%
O 20%
N 14%
H 8%
P 3%
K 2%
S 1%
Och mindre mängder av Ca, CL, MG och Fe
Ytterligare ca 20 grundämnen i mkt små mängder. Sk spårämnen.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Beskrivningar av vad de olika grundämnena gör i/för bakterien (kanske inte nödvändigtvis en fråga men här kommer en lista)

A

C:
Utgör ca hälften av cellens torrsubstans. Tillgångtill kol i relativt höga koncentrationer. Olika bakterier utnyttjar olika kolkällor (vilket kan utnyttjas när man vill identifiera olika bakterier)

N:
Kväve utgör 12-15% av torrvikten, krävs i förhållandevis höga koncentrationer. Fritt atmosfäriskt kväve N2 - enklaste kväve källan kan bara utnyttjas av ett fåtal bakterier. Flest oorganiska källor som ammoniumsalter (NH4+) och nitrater (NO3-)

K:
Många enzymer tex de i proteinsyntesen - se P

Mg:
Stabiliserar ribosomerna, cellmembran och nukleinsyror- enxymatiska processer - MgSO4

Ca:
Viktigt vid stabilisering av cellvägg och sporbildning- CaCl2

Fe:
Enzymer i ffa respirationskedjan, FeSO4

P:
Ingår bla i nukleinsyror och tas upp i oorganisk form

S:
Främst i svavelhaltiga aminosyror. Många kan utnyttja sulfater som svavelkälla.

Ämnen som inte bakterien själv kan syntetisera kallas ofta tillväxtfaktorer.
Vissa bakterier kväver inga tillväxtfaktorer andra bakterier kräver många tillväxtfaktorer. Viktigt att tänka på vid framställning av odlingssubstrat. Generellt behöver gram-positiva bakterier mer tillväxtfaktorer än gram-negativa.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Vilka är bakteriologins 5I

A
  1. Inockulering - odling av ett prov på ett medium för produktion av en kultur
  2. Isolering - separering av en art från en annan
  3. Inkubation - i lämplig miljö som tillåter växt
  4. Inspektion - hur ser det ut och växer
  5. Identifikation - identifikationsmetoder
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

vad står CFU för?

A

Colony forming units

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Principen av inockulering och isolering

A

Om en individuell bakteriecell separeras från en annan cell och har plats att växa till på en näringsrik yta - kommer den att bilda en koloni - bestående av många celler.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Exempel på utodlingstekniker

A
  • Utstryksodling
  • Spädningsodling
  • Spridningsteknik
  • Gräsmatteteknik
  • Kvantitativ odling
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Beskriv utstrykningsodling (trestryk)

A

Den som används allra mest.
Streck horisontellt, sedan snett som börjar i det redan utstryka och därefter snett från det andra som är snett (förlåt för kass beskrivning)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Beskriv spädningsodling

A

Prover i vätska, orginalprovet odlas på platta, spädning, det odlas på platta, spädning igen och odling på platta igen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Beskriv spridningsteknik

A

Vätskan hälls rakt på plattan och sprids sedan ut. (verktyget ser ut som en pinne med en båge på) “som en crêpe” //Sofi

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Beskriv gräsmatteodling

A

Spridning över hela plattan. Här är man ute efter en tät odling inte fria kolonier. Används vid resistensbestämning.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Beskriv kvantitativ odling

A

Vid odling av urinprov, Pinnen doppas i vätskan och stryks ut över hela plattan (inte superlätt tryck) en pinne innehåller ofta 10 ul

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Vilka typer av blododlingsflaskor finns det och vad innehåller de?

A

Aerob och anaerob

Innehåller bla antibiotikaneutraliserande medel.

Finns pH indikationer i botten av flaskan som “signalerar” om en odling behövs.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Vilka är de tre primära typerna för klassificering/indelning av odlingsmedium?

A
  1. Fysisk form
  2. Kemiska karaktäristiska
  3. Funktionell typ/ syfte med mediet
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Vad beskriver “Fysisk form” när man klassificerar odlingsmedium (a-d)

A

a, flytande
- Vattenbaserade lösningar som inte stelnar i rumstemperatur. Buljong, broth. Innehåller tex köttextrakt, peston mm

b, semisolid
- Trögflytande konsistens, vanligen använt vid mobilitets test - rörlighetstest. Man kan se om bakterierna sprider sig i lösningen eller inte, alltså om bakterien är orörlig eller rörlig.

c, fast men kan bli flytande

  • Fast yta, kolonier växer på ytan - vanligen i petriskålar
  • C1, Fast medium som kan bli flytande/stelnar, det absolut vanligaste mediumet vanligen Agar. Smälter vid 100 grader stelnar vid 42.
  • C2, fast medium som förblir fast, tex kött, ägg

d, fast kan ej bli flytande

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Vad beskriver “Kemisk karaktäristiska” när man klassificerar odlingsmedium (A,b)

A

a, syntetiskt - kemiskt definierat innehåll
- rena organiska och oorganiska komponenter, bestämda mängder, reproducerbara

b, icke syntetiskt - icke kemiskt definierat
- Minst en icke kemiskt definerbar beståndsdel extraherad från, djur, växter eller svampar - ex blod, serum, köttextrakt, infusioner (infusioner är rika på vitaminer, mineraler, proteiner och andra organiska näringsämnen.

17
Q

Vad beskriver “Funktionell typ” när man klassificerar odlingsmedium (a-h)

A

a, allmänt syfte
- letar inte efter specifik bakterie

b, berikat
- kanske inte vet vad som odlas, vill komma åt de mer kräsna bakterierna också

c, selektivt
- Man vill bara hitta ex gramnegativa

d, differentierande
- Komplexa prover, flera olika sorter. Kan använda sig utav färger för att sortera

e, anaerobisk odling

f, transport
- Behövs en gynnsam miljö för bakterierna med de ska inte växa till

g, analys
- PBS

h, antalsberäkning
- Medier som används vid beräkningen. Kan frysa med speciella buljonger

18
Q

Vad är ett generellt medium?

A

Designade för att kunna odla fram ett så brett spektrum av mikroorganismer som möjligt

  • icke syntetiska
  • ex. nutrient agar, brain heart infusion (BHI), tryptocase soy agar (TSA)
19
Q

Vad är ett berikat medium?

A

Innehåller komplexa organiska substanser som tex blod, serum, hemoglobin eller specifika tillväxtfaktorer så som vitaminer och aminosyror.

Bra om man inte vet vad man letar efter, främst för att hitta kräsna bakterier, som alltså kräver mycket tillväxtfaktorer

20
Q

Vad kallas bakterier som kräver tillväxtfaktorer och komplexa näringsämnen för att växa?

Ge ett exempel på en sådan

A

Fastidious/kräsna

Streptococcus pneumonie, som växer på blodagar

21
Q

Vad är ett selektivt medium?

Ge exempel på medium

A

Designade för en speciell grupp/grupper av bakterier. Kan behövas vid mer komplexa prover, innehållande mycket olika bakterier för att man ska kunna hitta rätt.

Viktigt vid isolering av bakterier från komplexa med mkt bakterier, ex saliv, faeces, vatten, jord mm.

MSA - mannitol salt agar,
- höga koncentrationer NaCl, selekterar för Staphylococcus som tål höga saltkoncentrationer

MacConkey- Innehåller gallsalter, gallsalter inhiberar G+ bakterier och gynnar framväxt av G-stavar

22
Q

Vad är ett differentierande medium?

A

Selekterar på storlek på kolonin eller färgomslag

Vanligt med färg och pH-indikatorer i plattor för tex påvisande av laktosjäsare- omslag till surt pH

23
Q

Vad är transport medium?

Ge exempel på medium

A

För bevaring och preservering av olika organismer vid tex transport från provtagning till utodling på laboratoriet ska hålla en viss tid

Innehåller salt, buffertar och substanser som förhindrar pH omslag, tillväxt, toxiska substanser mm.

EX.
Stuart´s och Amies

24
Q

Vad är analysmedium?

A

En trevlig miljö för bakterierna

Olika sorters medium som används för att tex lösa upp bakterier vid laboratorieanalyser- tex PBS vis resistensbestämning

25
Q

Vad är beräkningsmedium?

A

Medium som används för att späda eller odla bakterier i för beräkning av antalet bakterier.

26
Q

Från vilka källor i mediet hämtar bakterierna makro- respektive mikroelement?

A

C - från organiska föreningar, främst glukos

H och O - bland annat från vatten och ingående organiska och oorganiska substanser

N - finns i protein och nukleinsyror, ammoniak eller nitrat

S - Viktig för uppbyggnad av svavelhaltiga aminosyror från MgSO4

P - o/organiska fosfater till uppbyggnad av nukleinsyror och fosfolipider ex K-HPO4

K - många enzymer tex de i proteinsyntesen - se P

Mg - Stabiliserar ribosomerna, cellmembranen och nukleinsyror - enzymatiska processer - MgSO4

Ca - viktig vid stabilisering av cellvägg och sporbildning

Fe - Enzymer i ffa respirationskedjan, FeSO4

27
Q

Ge exempel på olika substrat/plattor (som bakterierna kan växa på)

A
  • Hästblodagar
  • BHI-agar
  • Streptockock-GBG-agar
  • HI-agar
  • Entericoccselagar (selektiv och differentierande)
  • Staphylococcus - agar (selektiva och delvis differentierande)
  • Staphcrom-agar
  • Mueller-Hinton-agar (samma i hela europa)
  • Saburaud-agar (specifik för svampar)
  • XLD-agar (selektiv för gram- tarmpatogener)
  • Urinselect chromagar (kromatogen differentierande)
  • CLED-agar (delvis selektiva och differentierande för gram-)
  • Maconkey-agar (–II–)
  • Drigalskiagar (–II–)
28
Q

Vilka kontroller görs vid tillverkning av plattor?

A
  1. F-kontroll: Förorening
  2. Växtkontroll: att de som ska växa växer fram och tvärtom
  3. Övrig kontroll:
    1, tillverkningskontroll- vägt och mätt rätt
    2, sterilkontroll 20 grader och 32 grader
    3, positiv växt kontroll/negativ växt kontroll
29
Q

Vilka miljökrav finns för att bakterierna ska växa?

A
  • Temperatur
  • Syre - koncentration
  • pH - koncnetration
  • Tryck
30
Q

Vilken är den optimala temperaturen för tillväxt?

A

någonstans mellan 20-40

De flesta bakterier odlas vid 35-37

Svamp vid 30

Campylobakter 42

31
Q

Vilket är det optimala pHt för tillväxt?

A

De flesta mikroorganismer påverkas i hög utsträckning av pH och kan oftast bara växa i vissa pH-intervall

Bakterier växer vanligtvis bäst vid pH 6-8

Svampar kan växa i ph 3-9

32
Q

Vad kallas bakterier som gillar sura miljöer?

A

Acidophiler

33
Q

Vad kallas bakterier som växer vid normalt pH?

A

Neutrophiler

34
Q

Vad kallas bakterier som gillar basiskt pH?

A

Alkalinophiler

35
Q

Vilken påverkan har tryck på tillväxten?

A

Den normala tillväxten är inte särskilt beroende av tryck. Mycket högt tryck har dock en avdödande effekt.

36
Q

GasPak System är ett exempel på?

A

Anaerob odling

37
Q

Hur fungerar GasPak system?

A

Uppnår anaerob miljö genom att låta vatten reagera med natrium borohydride och natrium bikarbonat tabletter som producerar vätgas och koldioxid.

Vätet reagerar sedan med syret på en katalysator och det bildas mer vatten.