cours 6

Question 1

Schématiser un anticorps, identifier les chaînes lourdes/légères, les régions de reconnaissance d’épitopes et les régions variables/constantes

Answer 1

Correction diapo 3 PDF cours 6

Question 2

Vrai/Faux : chaque antigène peut être reconnu par plusieurs anticorps, pourquoi?

Answer 2

Vrai, parce que chaque antigène a plusieurs épitopes qui peuvent être reconnus par plusieurs anticorps spécifiques

Question 3

Nommer les trois types d’épitopes protéiques

Answer 3

1) Conformationnels
2) Linéaires
3) Néoantigéniques

Question 4

Vrai/Faux : vu que les anticorps font partie de la réponse innée, il n’y a aucune adaptation lors d’expositions multiples

Answer 4

Faux, on peut avoir entre autres augmentation de la quantité d’anticorps produits, changements d’isotypes et augmentation de l’affinité des anticorps produits.

Question 5

Décrire la méthode de production d’anticorps polyclonaux

Answer 5

1) Injection d’un antigène dans un animal (ex. lapin, chèvre, poulet, mouton, lama, etc.)
2) Activation de la réponse immunitaire de l’animal, notamment lymphos B
3) Production d’anticorps polyclonaux par lymphos B de l’animal
4) Prélèvement du sérum de l’animal pour récolter les anticorps

Question 6

Décrire la méthode de production d’anticorps monoclonaux

Answer 6

1) Exposition répétées d’un animal à l’antigène cible pour augmenter affinité et quantité d’anticorps spécifiques
2) Récolte de la rate de la souris pour prélever lymphos B
3) Fusion des cellules de la rate avec cellules myélomes (tumorales) pour immortaliser cellules productrices d’anticorps
4) Sélection des hybridomes (mélange myélomes et cellules de la rate) pour avoir ceux produisant anticorps désirés
5) Croissance massive in vitro ou in vivo

Question 7

Vrai/Faux : un anticorps monoclonal est spécifique à un seul épitope

Answer 7

v

Question 8

Qu’est-ce qu’un anticorps monoclonal chimérique?

Answer 8

Un anticorps qu’on a modifié pour que sa région variable soit d’une espèce animal et que sa région constante soit humaine.

Question 9

Qu’est-ce qu’un anticorps humanisé

Answer 9

Un anticorps chimérique pour lequel on a retiré le plus de régions étrangères possibles tout en gardant la fonction de l’anticorps.

Question 10

Vrai/Faux : plus un anticorps est humanisé, plus ses chances d’être attaqué par l’organisme dans lequel on l’injecte (immunogénicité) est faible

Answer 10

v

Question 11

Décrire la fonction d’un anticorps secondaire

Answer 11

Reconnait des épitopes sur régions constantes d’un autre anticorps

Question 12

Qu’est-ce qu’un anticorps anti-espèce?

Answer 12

Anticorps secondaire dont l’épitope est les anticorps d’une autre espèce

Question 13

Nommer les 5 méthodes de détection de substances basées sur la spécificité des anticorps

Answer 13

1) ELISA
2) Immunobuvardage de type Western
3) Immunoprécipitation
4) Cytométrie en flux
5) Immunocytochimie/immunohistochimie

Question 14

Caractériser la méthode ELISA, ses cibles, ses éléments essentiels, sa fonction et ses 4 sous-types

Answer 14

Détecte un antigène dans un format liquide

Essentiel : anticorps reconnaissant spécifiquement antigène désiré

Permet détection précise d’une substance de manière quantitative. Tient pas compte de la taille de la protéine

1) Directe : antigène reconnu directement par anticorps primaire marqué
2) Indirecte : antigène reconnu par anticorps primaire, lui-même reconnu par anticorps secondaire (ex. anti-espèce) marqué.
3) Sandwich : anticorps capturant lie l’antigène, puis l’anticorps primaire reconnait ledit antigène, et est à son tour reconnu par un anticorps secondaire marqué.
4) Compétitive : on met deux antigènes pour le même anticorps, mais seul l’un des deux déclenche le marquage.

Voir diapo 25 PDF cours 6 pour schémas

Question 15

Qu’est-ce que la courbe étalon?

Answer 15

Courbe de concentration d’anticorps selon la concentration d’antigènes

Voir diapo 26 PDF cours 6 pour schéma

Question 16

Caractériser la méthode d’immunobuvardage de type Western, ses cibles, ses éléments essentiels et sa fonction

Answer 16

Détection d’un antigène dans un lysat de cellules, d’organes ou dans un liquide par la dénaturation des protéines vers leur forme primaire (sur le gel polyacrylamide)

Essentiel : anticorps reconnaissant épitope linéaire

Permet discrimination de protéines ayant un épitope commun, mais de taille différente. Technique quantitative.

Question 17

Caractériser la méthode d’immunoprécipitation, ses cibles, et sa fonction

Answer 17

Isolement d’une protéine à partir d’une solution liquide, puis précipitation du complexe anticorps-protéine pour identification

Question 18

Caractériser la méthode de cytométrie en flux, ses cibles, ses éléments essentiels et sa fonction

Answer 18

Détection d’un antigène à l’aide d’anticorps fluorescents sur ou dans des cellules en suspension

Élément essentiel : anticorps reconnaissant épitopes conformationnels

Permet d’analyser simultanément de nombreux paramètres comme la surface intracellulaire, pH indicateur, influx de calcium, phagocytose de particules et molécules de signalisation phosphorylées. Méthode quantitative

Question 19

Vrai/Faux : la technique de cytométrie en flux permet de déterminer la granularité des cellules, comment?

Answer 19

Vrai, en évaluant le degré de diffraction des rayons, une cellule hautement granulaire déviera plus de rayons qu’une cellule sans granules

Question 20

Vrai/Faux : en plus de toutes leurs autres fonctions, les cytomètres peuvent aussi trier les cellules qui passent selon qu’elles soient positives ou négatives pour le marqueur détecté

Answer 20

v

Question 21

Caractériser les méthodes d’immunocytochimie et immunohistochimie, leurs cibles et leur fonction

Answer 21

Détection colorimétrique (comme ELISA) ou par fluorescence (comme cytométrie)
ImmunoCYTO = détection d’antigène sur cellules
ImmunoHISTO = “ sur une coupe histologique

Permet de localiser les épitopes dans une cellule, un organelle ou un tissu

Question 22

Compléter le tableau de comparaison des diapos 52 et 53

Answer 22

Correction diapos 42 et 43 PDF cours 6

Question 23

Nommer les 4 plateformes classiques de vaccination

Answer 23

1) Virus complet inactivé
2) Virus vivant atténué
3) Sous-unité protéique virale
4) Particule imitatrice de virus

Voir diapo 44 PDF cours 6 pour schéma

Question 24

Décrire les étapes de l’infection par SRAS-CoV2 (causant COVID19)

Answer 24

1) Virus entre dans corps et lie récepteur ACE2
2) Utilise machinerie cellulaire pour se répliquer
3) Virus est relâché et peut être phagocyté par cellules présentatrices d’antigènes
4) Présentation d’antigènes viraux au système immunitaire adaptatif (lymphos B et T)
5) Production de cellules B et T et d’anticorps
6) Élimination de l’infection
7) Mémoire immunologique

Voir diapo 45 PDF cours 6 pour schéma

Question 25

Quels sont les deux types de vaccins développés contre SRAS-CoV2

Answer 25

1) Type ARNm ; le vaccin contient l’ARNm codant pour la protéine Spike caractéristique du virus encapsulé dans nanoparticules lipidiques (pour pénétrer cellules)
2) Type vecteur viral : vecteur viral inoffensif (adénovirus) contient ADN codant protéine Spike

Question 26

En quoi est-ce que les immunoglobines sont utiles pour le traitement de la rage?

Answer 26

Le vaccin prend plusieurs jours (7 à 14) pour stimuler la production d’anticorps de protection, mais pendant ce temps le patient peut encore développer maladie.

Donc on injecte anticorps anti-rage de donneurs le temps que le vaccin fasse effet pour diminuer risque de développer maladie.

Question 27

Vrai/Faux : le prélèvement d’anticorps monoclonaux depuis des donneurs convalescents est très rare et peu raffiné

Answer 27

Faux, on le fait de plus en plus et c’est de plus en plus efficace.

Ex. Donald Trump a reçu un traitement aux anticorps de convalescent qui a fonctionné.