DNA recombinante Flashcards
(23 cards)
Enzima de restricción 1 del DNA recombinante
Corta muy lejos (100pdb)
Asimétrico
ENZIMA DE RESTRICCIÓN 2
Secuencias PALINDRÓMICAS (ESPECÍFICAS)
Tipos de cortes de secuencias palindrómicas
Corte romo
Corte cohesivo
¿Cómo es el corte romo?
simétrico
¿Cómo es el corte cohesivo?
Asimétrico (Nt libres)
enzima de restricción 3
Corta lejitos (20-30pdb)
asimétrico
¿Qué son las enzimas de restricción?
mecanismo de defensa bacteriano (degrada ADN ajeno)
¿Cómo la bacteria protege su propio DNA?
METILANDOLO (A o C)
Enzima de restricción 4
Reconoce DNA metilado
¿Qué es el DNA recombinante?
Gen que queremos producir + gen de bacteria (plásmido) = bacteria produce nuestra prot.
¿Qué es un vector?
Molecula que alberga DNA ajeno
Vector de clonación
ALMACENA (copia)
plásmidos, bacteriófagos, fagémidos, cósmidos son ejemplos de vectores de..
Clonación
Veector de expresión
PRODUCIR UNA PROTEÍNA
Plásmido o bacteriófago son ejemplos de vectores de..
expresión
Partes del vector de clonación: (3)
ORI
Sitio múltiple de clonación
marcador de selección
Partes del vector de expresión: (6)
ORI
Sitio múltiple de clonación
Marcador de selección
- Promotor
- IRES
- Secuencia de PoliA
¿Qué es un plásmido?
DNA circular doble hebra que replican bacterias (fáciles de manipular)
¿Qué es un bacteriófago?
Virus que infecta bacterias = se limpia DNA para insertar otro gen
Alberga pedazos grandes
¿Qué son los cósmidos?
Híbrido = plásmido + fago
Útil en clonación
Cromosomas artificiales =
BAC (Bacterias) E coli
YAC (levaduras) Eucariotas
Ventajas de las BAC
Rápido crecimiento y bajo costo
NO modificaciones postraduccionales
Prot. sencillas
Ventajas de las YAC
Facil manipulación
Sí modificaciones postraduccionales (no igual a mamíferos)
Prot. complejas
