drożdże

Question 1

zalety drożdży

Answer 1

modyfukacje potranslacyjne

nie niesie ryzyka zakażenia

Question 2

niemetylotroficzne

Answer 2

saccharmycec cerevisiae

Question 3

metylotroficzne

Answer 3

pichia pastoris
Mogą przeżyć na pożywce z metanolem jako jedynym źródłem węgla.
mają oksydaze alkoholową

Question 4

wady drożdży

Answer 4

niedokładna glikozylacja

Question 5

promotor PAOX1

Answer 5

inkudowany etanolem, represja kataboliczna, bardzo silny, dla oksydazy alkoholowej 1, wymaga dużo metanolu

Question 6

promotor PGAP

Answer 6

konstytutywny, silny, nie do toksycznych białek, nie wymaga metanolu

Question 7

promotor PFLD1

Answer 7

indukowany metanolem gdy jedyne źródło azotu to (NH4)2SO4, bardzo silny

Question 8

wektory dla p. pastoris

Answer 8

wahadłowe

Question 9

hodowla pod kontrolą PAOX1

Answer 9

1. wzrost na pożywce z glicerolem - zwiększenie masy
2. zmniejszenie ilości glicerolu w celu zahamowania wzrostu
3. dodatek metanolu - indukcja ekspresji

Question 10

Transformacja sferoplastów

Answer 10

trawienie ściany komórkowej drożdży odpowiednimi enzymami, dodanie DNA do uzyskanej zawiesiny sferoplastów; trudne do przeprowadzenia, zbyt długa/zbyt krótka inkubacja z enzymem nie daje pozytywnych efektów

Question 11

O-glikozylacja u ssaków vs u drożdży

Answer 11

N-acetylogalaktozamina, galaktoza, kwas sjalowy, drożdże: mannoza

Question 12

N-glikozylacja u ssaków vs u drożdży

Answer 12

ogólnie u eukariota wygląda tak samo wszędzie ale u drożdży liczba przyłączonych mannoz sprawia, że jest immunogenny

Question 13

jak kaseta z plazmidu integruje się z chromosomem drożdży

Answer 13

przez rekombinację homologiczną
Zastąpienie genu AOX1 genem nas interesującym oraz genem umożliwiającym syntezę histydyny; transformanty są stabilne, ale transformacja możliwa tylko raz- niższy poziom produkcji białka.