Final - Manuel de TP Flashcards
(172 cards)
1
Q
Définit moi un milieu sélectif.
A
Permet la croissance de certaines espèces bactériennes et inhibe la croissance d’autres.
2
Q
Définit moi un milieu différentiel.
A
Permet le distingué certains traits ou caractéristiques d’espèces bactériennes.
3
Q
Que signifie la caractérisation par “aliment+ ou -“ Ex: lactose+, mannitol-, etc.
A
+ : capable de digérer
- : incapable de digérer
donc lactose +: capable de digérer et métaboliser le lactose.
4
Q
Quel gélose permettrait d’isoler les bactéries gram - dans un mélange bacétrien?
Comment?
A
- Le milieu MacConkey (McC)
- Le violet cristal et les sels biliaires inhibe la croissance de bactéries gram +
5
Q
Les Enterobacteriaceae sont généralement:
a: anaéorbiques facultatives
b: anaéorbiques
c: aérobiques
d: hypoxiques
A
a: anaéorbiques facultatives
6
Q
Donne moi une définition et un autre mot pour une bactérie “hypoxique”.
A
Une bactérie microaéorphile.
Elles aiment un faible taux d’oxygène dans leur environnement.
7
Q
Quelle est la formule pour calculer le nombre d’unités viables par mL? (NUV/mL)
Oui il peut y avoir des calculs à l’exam… 🥲
A
nombre de colonies
_____________________
Volume * Dilution
8
Q
S’il y a 118 colonies sur une gélose et que t’as étendu 0,2mL du mélange dilué par un facteur de 10-5, combien il y a-t-il d’unités viables par millilitres?
A
5,9*107 UV/mL
9
Q
Quel est l’utilité d’un tube Durham?
A
S’il y a dégagement de gaz par la bactérie une bulle de gaz est formé dans le tube Durham.
10
Q
Si un bouillon lactosé est ensemencé et que le bouillon vire jaune et une bulle est formé dans le tube Durham, que peut on conclure?
(question exam final 2023)
A
Que le bactérie est capable de fermenter le lactose ce qui cause un dégagement de gaz.
11
Q
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans un bouillon lactosé?
A
permet de mettre en évidence l’utilisation d’un sucre, le lactose, comme source de carbone et d’énergie par la bactérie. Si la bactérie peut dégrader ce sucre, il y a production d’acide qui est mis en évidence par un indicateur de pH présent dans le milieu. Il y a alors changement de couleur du milieu
12
Q
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose sulfure, indole, motilité (SIM)?
Quel réactif doit être ajouté pour détecter la présence d’indole?
(question exam final 2023)
A
- Culot noir: Production de H2S (H2S+)
- Absence de culot noir: (H2S-)
- Croissance uniquement sur la ligne d’ensemencement: motilité-
- Croissance partout dans la gélose: motilité+
- Suite à l’ajout du réactif de Kovacs, formation d’un composé rouge vif: Inodole +
- Le réactif de Kovacs est jaune: Inodole -
13
Q
Dans une gélose SIM à partir de quoi les bactéries peuvent faire de l’indole
A
Le tryptophane
14
Q
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose citrate?
A
- Reste vert: pH acide, Citrate -
- Devient bleu, Citrate +
15
Q
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose à l’urée de Christensen?
A
- Incolore: Urée - (pas d’uréase)
- rose saturé: Urée + (uréase)
16
Q
Quelles sont les réactions que l’on peut observer dans une gélose phénylalanine désaminase (PAD)?
Que faut-il ajouter à cette dernière pour observer une réaction?
A
- Une coloration verte du réactif: (PAD+)
- Une coloration jaune du réactif: (PAD-)
- Du FeCl3
17
Q
Comment fonctionne le caractère différentielle de la gélose mannitol-sel (MSA)?
A
La dégradation du mannitol (Mannitol+) crée un changement de pH dans le milieu faisant réagir l’indicateur de pH de la gélose pour devenir jaune.
Mannitol- : gélose reste rouge
18
Q
Comment fonctionne le caractère différentielle de la gélose MacCokney (McC)?
A
La gélose contient du lactose. Elle possède un indicateur de pH.
Lactose+ : colonies rouges
Lactose- : colonies jaunes
19
Q
Quel est agent sélectif des géloses MSA?
(question exam final 2023)
A
MSA: mannitol-sel agar
la haute teneur en NaCl (7,5%)
20
Q
Tu fait une coloration d’un frotti sur une lame provenant d’une souche d’une gélose MacConkey. Quand tu l’observe au microscope tu vois des bacilles violettes. Qu’est-ce qui a pu arrivé lors de la coloration qui à causé ce résultat.
Explique.
(question exam final 2023)
A
Il y a eu un problème lors de la décoloration à l’alcool puisque seulement les bactéries gram + devrait être coloré violette. Cependant, la McC inhibe la croissance des gram +, donc la seul manière qu’il pourrait y avoir des bactéries violettes est si la décoloration du violet cristal à l’alcool n’a pas été faite.
21
Q
À quoi sert une contrôle négatif?
(question exam final 2023)
A
confirmer une application adéquate des techniques sur les échantillons et l’absence de contaminants dans les réactifs.
22
Q
Quel milieu est idéal pour effectuer l’examen de la morphologie coloniale d’une souche bactérienne?
A
Une gélose neutre/normale (GN)
23
Q
On veut compter le nombres d’unités viables et que nous possédons une série de dilution de 10-1 à 10-4. Après avoir étaler 0,1mL de la dilution 10-4 on n’observe aucune colonies. Quel est la prochaine étape logique?
A
Étaler 0,1mL de la dilution de 10-3.
24
Q
Quel caractéristique macroscopique permet d’évaluer la concentration en bactérie dans un bouillon?
A
La turbidité
25
Quelles sont les types d'hémolyses que l'on peut observer sur gélose?
(nom et définition)
𝛾: absence d'hémolyse (rouge)
⍺: hémolyse partielle (verdâtre)
β: hémolyse totale (incolore)
26
Si sur une gélose sang autour de la première strie tu observe un couleur verdâtre, mais qu'autour de la seul colonie isolée il n'y a pas de changement de couleur, comment peut-on caractériser l'hémolyse?
Pourquoi?
Hémolyse 𝛾 (absence)
toutes caractéristiques morphologiques ou métaboliques prisent de colonies de bactéries doivent être faites de **colonies isolées**
27
Vrai ou Faux: Une bactérie qui est gram+ est nécessairement un coccus.
Faux
28
Avec quoi réagit le FeCl3 pour tester positif dans la gélose PAD?
Avec l'acide phényl-pyruvique, le sous-produit de la dégradation de la phénylalanine.
29
Qu'est-ce qu'un milieu de culture ?
Un milieu de culture est un mélange de substances nutritives qui fournit une source d'énergie, de carbone, d'azote, de phosphore, de soufre et de minéraux essentiels à la croissance et à la multiplication des microorganismes.
29
Quelle testes permettent de déterminer la motilité bactérienne? (2)
1. Gélose SIM
2. Observation à l'état frais
30
Quelle est la différence entre un milieu de culture liquide et un milieu solide ?
Un milieu liquide est un bouillon qui permet aux cellules microbiennes de se disperser dans l'eau, tandis qu'un milieu solide contient de l'agar qui permet aux cellules de se multiplier à la surface et de former des colonies visibles.
30
Comment s'appelle le site antigénique reconnu par les anticorps?
Épitope
31
Pourquoi l'agar est-il utilisé dans les milieux solides ?
L'agar est utilisé car il n'est pas métabolisé par la plupart des bactéries et il fournit un support mécanique pour la croissance bactérienne après avoir été liquéfié et refroidi à environ 42°C.
31
Comment détermine-t-on la concentration relative des puits périphériques dans la technique d'Ouchterlony?
Plus la ligne du précipité est près du puit central (anti-gènes), plus le puit périphérique est concentré.
Si tu ne te souviens pas c'est quoi : https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Ftice.agrocampus-ouest.fr%2Fpluginfile.php%2F41798%2Fmod_glossary%2Fattachment%2F519%2FTest%2520dOuchterlony.pdf&psig=AOvVaw0dqW1AWaj47Z5lNw_D9C6W&ust=1713809412563000&source=images&cd=vfe&opi=89978449&ved=0CBIQjRxqFwoTCLC90Nzz04UDFQAAAAAdAAAAABA6
32
Quelle est l'importance de la stérilité dans les milieux de culture ?
Les milieux de culture doivent être stériles pour éviter la contamination par des microorganismes étrangers qui pourraient interférer avec l'expérience ou l'analyse des microorganismes d'intérêt.
32
Explique le phénomène où l'on ne voit pas de ligne de précipité dans un puit à forte dilution.
La réaction est en postzone. Il y a trop d'antigène. Tous les épitopes sont liés à un antigène de cellule qui n'est lié à aucun autre AC, ce qui empêche la formation de réseau.
33
Qu'est-ce qu'un milieu de culture ?
Un milieu de culture est un mélange de substances nutritives qui fournit une source d'énergie, de carbone, d'azote, de phosphore, de soufre et de minéraux essentiels à la croissance et à la multiplication des microorganismes.
33
Comment stérilise-t-on un milieu de culture ?
La stérilisation se fait généralement par autoclavage, qui utilise de la vapeur d'eau à 121°C pour éliminer tous les microorganismes.
34
Quelle est la différence entre un milieu de culture liquide et un milieu solide ?
Un milieu liquide est un bouillon qui permet aux cellules microbiennes de se disperser dans l'eau, tandis qu'un milieu solide contient de l'agar qui permet aux cellules de se multiplier à la surface et de former des colonies visibles.
34
Qu'est-ce qu'une culture en suspension ?
Une culture en suspension est le résultat de la multiplication des cellules microbiennes dans un milieu liquide jusqu'à former une suspension qui donne une apparence trouble au milieu.
35
Pourquoi l'agar est-il utilisé dans les milieux solides ?
L'agar est utilisé car il n'est pas métabolisé par la plupart des bactéries et il fournit un support mécanique pour la croissance bactérienne après avoir été liquéfié et refroidi à environ 42°C.
35
Comment se forment les colonies microbiennes sur un milieu solide ?
Sur un milieu solide, les cellules se déposent et se multiplient à la surface, poussant les cellules filles vers la périphérie et formant des colonies visibles provenant d'un seul microorganisme.
36
Quelle est l'importance de la stérilité dans les milieux de culture ?
36
Quelle influence la forme des cellules et le milieu de culture ont-ils sur la morphologie des colonies ?
La forme des cellules, leur mode de division et la nature du milieu influencent la morphologie des colonies. Différentes espèces peuvent présenter des caractéristiques morphologiques distinctes.
37
Qu'est-ce qu'une culture confluente ?
Une culture confluente est le résultat d'un dépôt excessif de microorganismes à la surface d'un milieu solide, où les colonies ne sont pas isolées mais forment plutôt un tapis à la surface du milieu.
38
Quel type de microscope est généralement utilisé dans les laboratoires de travaux pratiques pour observer les microorganismes ?
Le microscope optique à fond clair, également connu sous le nom de microscope ordinaire, est couramment utilisé.
39
Quels aspects de la morphologie et de l'arrangement cellulaire des microorganismes peut-on observer au microscope optique ?
On peut observer la forme des microorganismes (coccus, bâtonnet, vibrio, spirille, etc.) ainsi que leur arrangement cellulaire (isolé, paire, tétrade, grappe, chaînette, etc.).
40
Pourquoi est-il important d'avoir une concentration suffisante de bactéries lors de la préparation microscopique ?
Une concentration suffisante permet d'assurer une fréquence moyenne d'une bactérie par champ microscopique, ce qui facilite l'observation et l'identification.
Concentration idéale : 1,2 X 10^6 bactéries par millilitre
41
Quel est l'avantage principal de la coloration des microorganismes pour l'examen microscopique ?
La coloration augmente le contraste optique entre le microorganisme et le milieu ambiant, ce qui facilite l'observation.
42
Qu'est-ce qu'un frottis bactérien et comment est-il préparé ?
Un frottis bactérien est préparé en étalant une petite quantité de culture bactérienne sur une lame et en la laissant sécher à l'air. Il est ensuite fixé à la lame par la chaleur.
43
Quelle est la différence entre la coloration simple et la coloration de Gram ?
La coloration simple utilise un colorant basique comme le bleu de méthylène pour colorer tous les microorganismes de manière uniforme.
La coloration de Gram est une méthode différentielle qui permet de distinguer les bactéries en fonction de leur affinité pour le colorant.
44
Pourquoi la coloration peut-elle modifier la morphologie des microorganismes ?
Bien que la coloration facilite l'observation, elle peut également exercer un stress sur les microorganismes et parfois modifier légèrement leur morphologie.
45
Quels sont les 4 changements morphologiques observé chez des cellules infectées? (4)
1. grande inclusion intracytoplasmique causant le noyau à être repoussé aux parois de la cellule.
2. Inclusion virale nucléaire (noyau prends une forme d'étoile)
3. Inclusion virale nucléaire (chromatine repoussé aux parois de du noyau en halo clair. Centre noir est l'inclusion virale)
4. Formation de syncytium par fusion de plusieurs cellules pour donner une cellule géante multinucléée.
Images se retrouvent à la séance 9 exercice C
46
Qu'est-ce que la croissance confluente et comment l'évite-t-on ?
La croissance confluente se produit lorsque les bactéries sont trop proches les unes des autres et forment un tapis continu. Pour obtenir des colonies isolées, on étale l'inoculum en dilution en stries sur la gélose, en commençant par un secteur pour diminuer progressivement la concentration des bactéries.
47
Comment procède-t-on à l'étalage en stries ?
On commence par étaler un tiers de la gélose, puis on flambe le fil pour éliminer les bactéries et on laisse refroidir. Ensuite, on étale des bactéries des dernières stries effectuées, en réduisant la concentration des bactéries, et on continue sur un deuxième puis un troisième tiers de la gélose, en flambant à nouveau le fil entre chaque série de stries.
48
Quel est l'objectif de la coloration de Gram ?
La coloration de Gram est une technique différentielle qui permet de distinguer les bactéries Gram positives des Gram négatives en fonction de la structure de leur paroi cellulaire, ce qui a également des implications pour leur sensibilité aux antibiotiques.
49
Quelles sont les étapes de base de la coloration de Gram (4) ?
- Coloration avec le violet de gentiane,
- Fixation du colorant avec du lugol,
- Décoloration à l'alcool à 95%,
- Contre-coloration avec la safranine.
50
Comment les bactéries Gram positives se distinguent-elles après la coloration de Gram ?
Les bactéries Gram positives restent violettes après la coloration car leur paroi cellulaire épaisse retient le complexe violet de gentiane-lugol même après la décoloration à l'alcool.
51
Qu'arrive-t-il aux bactéries Gram négatives pendant la coloration de Gram ?
Les bactéries Gram négatives perdent le complexe violet de gentiane-lugol pendant la décoloration à l'alcool et apparaissent incolores, puis elles sont contre-colorées en rose par la safranine.
52
Quelles sont les caractéristiques de la paroi cellulaire des bactéries Gram positives ?
La paroi des bactéries Gram positives est constituée d'une épaisse couche de peptidoglycane et d'acides teichoïques, qui retiennent le colorant violet lors de la coloration de Gram.
53
Quelle est la composition de la paroi cellulaire des bactéries Gram négatives et comment cela affecte-t-il leur coloration ?
La paroi des bactéries Gram négatives est plus complexe, avec une mince couche de peptidoglycane recouverte d'une membrane externe contenant des lipopolysaccharides (LPS). Cette structure ne retient pas le violet de gentiane après la décoloration, permettant la contre-coloration en rose.
54
Quelle est la fonction des lipopolysaccharides (LPS) dans la paroi des bactéries Gram négatives ?
Les LPS ont de nombreuses fonctions, notamment en tant que barrière de protection et dans la réponse immunitaire. Ils sont importants dans la virulence de certaines bactéries et peuvent être impliqués dans la pathogénicité.
55
Quels sont les milieux sélectifs McC et MSA et quelle est leur utilité ?
MacConkey (McC) et mannitol-sel agar (MSA)
Ces milieux favorisent la croissance de certaines espèces au détriment d'autres en inhibant ou en n'offrant pas les conditions nécessaires pour la croissance de certains microorganismes indésirables.
56
Comment le milieu MacConkey sélectionne-t-il certaines bactéries ?
Le milieu MacConkey contient du violet cristal et des sels biliaires qui inhibent la croissance des bactéries Gram positives et permettent la différenciation des bactéries lactose positives qui fermentent le lactose et produisent des colonies mauves, des lactose négatives qui restent incolores.
57
Quelle est la particularité du milieu MSA ?
Le milieu MSA contient 7,5% de NaCl, qui est un taux de sel élevé limitant la croissance à certains genres, comme Staphylococcus. Il contient également du mannitol et un indicateur de pH qui permettent de détecter les bactéries qui fermentent le mannitol en les colorant en jaune.
58
Quelle est la différence entre un milieu sélectif et un milieu différentiel ?
Un milieu sélectif inhibe la croissance de certains microorganismes tandis qu'un milieu différentiel contient des substances qui révèlent la présence ou l'absence d'un trait spécifique comme la capacité de fermenter un sucre spécifique.
59
Qu'est-ce que le microbiote et le microbiome ?
Le microbiote désigne l'ensemble des microorganismes (bactéries, virus, champignons, etc.) présents dans un environnement spécifique comme le corps humain. Le microbiome se réfère à l'ensemble des gènes de ces microorganismes.
60
Où peut-on trouver des microorganismes dans notre environnement ?
Les microorganismes sont omniprésents et peuvent être trouvés dans l'air, l'eau, le sol, chez les plantes et les animaux, ainsi que dans et sur le corps humain.
61
Pourquoi tous les microorganismes présents dans l'air ambiant ne sont-ils pas propices à la multiplication microbienne ?
L'air ambiant a généralement une faible concentration de matières organiques et une humidité relative faible, ce qui ne fournit pas les conditions optimales pour la croissance de nombreux microorganismes.
62
Quels facteurs peuvent contribuer à la présence de microorganismes dans l'air ?
Les particules solides comme la poussière, les particules liquides comme les aérosols, et les microorganismes provenant des voies respiratoires humaines peuvent tous véhiculer des microorganismes dans l'air.
63
Quelles surfaces dans notre environnement immédiat sont les plus propices à la multiplication microbienne ?
Les surfaces qui reçoivent des microorganismes véhiculés par des particules solides ou liquides, et celles en contact avec des matières organiques, offrent des conditions favorables pour la multiplication microbienne.
64
Pourquoi la surface du corps humain est-elle particulièrement favorable à la croissance microbienne ?
La peau et les muqueuses du corps humain offrent d'excellentes conditions pour la croissance de nombreuses espèces microbiennes en raison de la présence de matières organiques et d'humidité.
65
Qu'est-ce qu'un milieu de culture et quels sont ses critères de base ?
Un milieu de culture est un mélange de substances nutritives ajusté pour répondre aux besoins métaboliques des microorganismes pour la culture. Il doit être chimiquement stable, tamponné, capable de se maintenir dans un état liquide, solide ou semi-solide et stérile.
66
Pourquoi les milieux de culture sont-ils variés ?
Ils sont variés en raison des besoins nutritionnels diversifiés des microorganismes, des coûts, du rendement, de la facilité de préparation, et de leur utilisation dans différents domaines tels que le diagnostic, l'industrie et la recherche.
67
Qu'est-ce que le "truc du professeur C HOPK’NS" ?
C'est un moyen mnémotechnique pour se rappeler des éléments chimiques essentiels pour la vie des bactéries :
- C: source de carbone,
- H et O: sources d'hydrogène et d'oxygène,
- P: source de phosphore,
- K’: potassium et d'autres oligo-éléments,
- N: source d'azote,
- S: source de soufre.
68
Quels sont les facteurs de croissance et pourquoi sont-ils importants ?
Substances que certains organismes ne peuvent pas synthétiser eux-mêmes et doivent être présents dans leur environnement pour la multiplication cellulaire.
Ex : acides aminés, purines et pyrimidines, vitamines, etc.
69
Les termes chimiotrophe, photographe, lithotrophe, organotrophe, autotrophe et hétérotrophe décrivent quoi ?
Les modes de nutrition et la manière dont les microorganisme obtiennent l'énergie, les électrons et le carbone nécessaires à leur croissance :
Source d'énergie :
- Chimiotrophe : oxydation composés inorganiques (Fe, H, S)
- Phototrophe : lumière
Source d'électrons :
- Lithotrophe : composés inorganiques
- Organotrophe : composés organiques
Source de carbone :
- Autotrophe : CO2
- Hétérotrophe : composés organiques
70
BONUS : Quels sont des exemples de bouilles nutritifs ?
- Bouillon nutritif avec glucose et sels minéraux : source simple de C (glucose), phosphates, soufre et oligo-éléments essentiels pour croissance de bactéries hétérotrophes.
- (NH4)2SO4 : azote et soufre inorganiques.
- Hydrolysat de caséine : C'est un produit de digestion de protéines; fournit acides aminés et de peptides variés, utilisable par bactéries pour synthétiser leurs propres protéines.
- Extrait de levure : vitamines et autres facteurs de croissance. Utilisé pour enrichir milieux de culture afin de soutenir croissance de bactéries aux besoins nutritionnels complexes
71
Pourquoi est-il difficile d'observer les microorganismes à l'état frais sans coloration ?
Car le contraste entre le microorganisme et le milieu ambiant est faible, rendant leur visualisation difficile au microscope.
72
Quelle est la différence entre la motilité flagellaire et le mouvement brownien ?
Motilité flagellaire : mouvements actifs des microorganismes grâce à leurs flagelles,
Mouvement brownien : mouvement passif causé par le choc des molécules de liquide sur les particules microscopiques.
73
Quels sont les trois types de sporange à connaitre?
1. endospores
2. exospores
3. blastospores
73
Qu'est-ce qu'un aérobie strict ?
Bactérie qui nécessite de l'oxygène pour se reproduire.
74
Comment cultive-t-on des bactéries anaérobies strictes en laboratoire ?
En éliminant l'oxygène de leur environnement, par exemple en utilisant des tubes de Hall ou des jarres anaérobies qui créent des conditions anaérobies.
75
Qu'est-ce qu'un anaérobie facultatif ?
Bactérie qui peut croître en absence d'oxygène mais qui croît mieux en présence d'oxygène car elle peut l'utiliser dans ses processus métaboliques.
76
Quelle est la porosité des filtres généralement utilisé en filtration bactériologique? (2)
0,45µm et 0,22µm
76
Quelles sont les adaptations nécessaires pour cultiver des microaérophiles ?
Les microaérophiles nécessitent des conditions avec une concentration en oxygène réduite, entre 2 et 10%, et ne peuvent pas croître à des concentrations d'oxygène trop élevées ou trop basses.
77
Les substances chimiques et les conditions physiques qui peuvent empêcher temporairement la croissance des bactéries sont dites...?
bactériostatiques
77
Qu'est-ce qu'un anaérobie aérotolérant ?
Bactéries qui croissent en absence d'oxygène mais qui tolèrent sa présence sans l'utiliser pour leur métabolisme.
78
Pourquoi les capnophiles requièrent-ils des conditions spéciales de culture ?
Les capnophiles requièrent des niveaux élevés de dioxyde de carbone et des conditions anaérobies pour croître.
79
Qu'est-ce qu'une concentration minimale inhibitrice (CMI) d'un antibiotique?
La concentration minimale nécéssaire de cet antibiotique pour inhiber la croissance de la bactérie.
79
Qu'est-ce que le rH et comment est-il utilisé dans les jarres anaérobies ?
Échelle analogue à celle du pH mais pour l'hydrogène.
rH inférieur ou égal à 14 : favorise la croissance des anaérobies stricts.
rH supérieur à 14 : empêche développement d'anaérobies stricts.
80
Comment un antibiogramme permet de déterminer la concentration minimale inhibitrice?
Plus la zone d'inhibition autour de l'antibiotique est grande plus la concentration minimale inhibitrice est petite, donc plus cet antibiotique est efficace contre cette bactérie.
80
Comment le milieu LAC (Lactose) fonctionne-t-il pour identifier les bactéries ?
Le milieu LAC détecte la capacité d'une bactérie à fermenter le lactose. Si une bactérie fermente le lactose, elle produira de l'acide, ce qui entraînera un changement de couleur dans le milieu en raison d'un indicateur de pH.
81
Qu'est-ce qu'un antibiogramme?
Une gélose sur laquelle on place des pastille d'antibiotique suite à un ensemencement uniforme de la bactéries concernée. Le diamètre autour de la pastille où l'on observe aucune croissance bactérienne est la zone d'inhibition.
81
À quoi sert la gélose PIA (Peptone Iron Agar) ?
La gélose PIA est utilisée pour détecter la production de sulfure d'hydrogène (H2S) par les bactéries. Si H2S est produit, il réagit avec des sels ferreux dans le milieu pour former un précipité noir.
82
Quel mycète avons-nous étudier avec des propriétés antibiotiques?
*penicillium notatum*
82
Qu'indique une réaction positive dans le bouillon à l'eau peptonée (EP) ?
Une réaction positive dans le EP indique la production d'indole par la bactérie, ce qui peut être détecté par l'ajout du réactif de Kovacs, produisant un anneau rouge sur la surface du milieu.
83
Que démontre un résultat positif dans le milieu SIM ?
Un résultat positif dans le milieu SIM peut indiquer la motilité bactérienne, la production de H2S, et/ou la production d'indole.
84
Comment fonctionne la gélose au citrate (CIT) pour l'identification des bactéries ?
La gélose au citrate teste l'utilisation du citrate comme seule source de carbone par les bactéries. Un changement de couleur due à un changement de pH indique la consommation de citrate.
85
Quels traits suivants influencent la zone d'inhibition d'un antibiogramme faisant appel à la méthode diffusimétrique?
a. L'abondance de l'inoculum bactérien
b. La taille de la molécule antibiotique
c. L'épaisseur de la gélose
d. L'hydrophobicité de la molécule antibiotique
All of the above.
85
À quoi sert la gélose à l'urée (UREE) ?
La gélose à l'urée détecte la capacité des bactéries à hydrolyser l'urée en utilisant l'enzyme uréase, produisant de l'ammoniaque qui augmente le pH, ce qui est indiqué par un changement de couleur du milieu.
86
Quel est l'objectif de la gélose à la phénylalanine (PAD) ?
La gélose PAD est utilisée pour détecter la désamination de la phénylalanine par les bactéries, indiquée par une réaction colorée verte en présence de FeCl3.
87
Qu'est ce que la conjugaison bactérienne ?
Processus de transfert d'ADN d'une bactérie donneuse à une receveuse par contact physique, généralement via un pilus sexuel.
88
Quel rôle joue le facteur F dans la conjugaison ?
Le facteur F est un plasmide qui peut se répliquer de manière autonome dans la bactérie. Les bactéries qui possèdent ce facteur sont appelées F+ et sont capables de transférer le plasmide à d'autres bactéries F-, les rendant également F+.
89
Comment une bactérie devient-elle une souche Hfr ?
Une souche Hfr se forme lorsque le facteur F est intégré dans le chromosome bactérien, permettant le transfert de gènes chromosomiques ainsi que le plasmide F lors de la conjugaison.
90
Quelle est la différence entre une bactérie F+ et une bactérie F- ?
Une bactérie F+ possède le plasmide F, ce qui lui permet d'initier le processus de conjugaison,
Une bactérie F- ne possède pas le plasmide F et ne peut pas initier de conjugaison, mais peut recevoir du matériel génétique d'une bactérie F+.
91
Pourquoi est-il rare que l'ensemble du chromosome soit transféré lors de la conjugaison ?
Le contact entre les deux bactéries est généralement de courte durée, ce qui ne permet pas souvent le transfert complet du chromosome.
92
Quel est l'objectif du dénombrement des unités viables (NUV) ?
Déterminer le nombre de microorganismes vivants dans une suspension en comptant le nombre de colonies formées sur un milieu solide après ensemencement de différentes dilutions de la suspension.
93
Vrai ou Faux: la présence d'une zone d'inhibition autour d'un disque d'une antibiotique X signifie que cette CMI peut être appliquée in vivo.
Faux: ce test permet un indice à la dose nécéssaire, mais le in vivo est plus imprévisible.
93
Comment choisit-on les dilutions à ensemencer pour compter les colonies ?
On ensemence les dilutions qui devraient théoriquement donner entre 30 et 300 colonies isolées, car c'est la plage considérée comme fiable pour un comptage précis.
94
Qu'est-ce qui détermine qu'une dilution est appropriée pour le dénombrement ?
Une dilution est appropriée si elle produit un nombre de colonies dans la plage de comptage idéale (30 à 300 colonies) et permet la distinction claire entre les colonies individuelles.
95
Vrai ou Faux: Si deux antibiotiques dans un antibiogramme ont le même diamètre d'inhibition, ils ont le même CMI.
Faux, il existe des tables de concordances entre le diamètre des zones d'inhibition pour divers antibiotiques et la sensibilité attendue des souches.
95
Comment calcule-t-on le nombre d'unités viables par mL à partir des colonies comptées ?
Le nombre d'unités viables par mL est calculé en divisant le nombre de colonies par le volume de dilution ensemencé, puis en ajustant pour la dilution. La formule est :
NUV / mL = Nb de colonies / (volume ensemencé × dilution)
96
Pourquoi est-il important de compter les colonies tant qu'elles sont de petite taille ?
Compter les colonies lorsqu'elles sont de petite taille permet d'éviter que les colonies ne se confondent les unes avec les autres et assure un comptage précis.
97
Qu'est-ce qu'une endospore et pourquoi les bactéries en produisent-elles ?
Une endospore est une structure intracellulaire résistante formée par certaines bactéries comme réponse à des conditions de croissance défavorables. Elle permet à la bactérie de survivre en état de dormance pendant des périodes prolongées, résistant à des conditions extrêmes.
98
Quels genres bactériens sont connus pour la production d'endospores ?
Les genres bactériens Clostridium (sporulent en anaérobiose) et Bacillus (sporulent en aérobiose), qui sont tous deux Gram positifs, sont connus pour leur capacité à former des endospores.
99
Quel rôle le manganèse joue-t-il dans la sporulation ?
Il est connu pour induire la sporulation et est couramment utilisé dans les milieux de culture à cette fin.
100
Quelle est la particularité des endospores de Geobacillus stearothermophilus ?
Les endospores de Geobacillus stearothermophilus sont particulièrement résistantes à la chaleur et sont utilisées comme contrôles biologiques dans la stérilisation.
101
Comment peut-on mettre en évidence la présence d'endospores ?
La présence d'endospores peut être mise en évidence par coloration directe utilisant une technique de coloration spéciale à chaud, telle que la coloration de Schaeffer-Fulton.
102
Qu'est-ce qu'une plage de lyse?
Un trou dans une couche bactérienne suite à une infection virale lytique.
102
Quelles sont les caractéristiques d'une spore pour une espèce bactérienne donnée ?
Pour une espèce bactérienne donnée, la spore peut avoir une forme (ovoïde ou sphérique), une position (terminale, subterminale ou centrale) dans la cellule, et une taille relative, pouvant déformer ou non la cellule.
103
Comment les spores bactériennes contribuent-elles à l'échec du processus de stérilisation ?
L'endospore peut "germer" et revenir à sa forme végétative si les conditions deviennent favorables, indiquant un échec de la stérilisation si un milieu contenant du glucose et un indicateur de pH montre de l'acidification après stérilisation.
104
Comment calcul-t-on le nombre d'unités de plages de lyse par mL?(UFP/mL)
Nombre de plages de lyse
_____________________
Volume * Dilution
104
Quelle est l'efficacité des rayons ultraviolets (UV) sur les bactéries ?
Les rayons UV sont efficaces pour endommager l'ADN des bactéries, provoquant la formation de dimères de thymine, ce qui peut entraîner la mort des cellules ou des mutations.
108
Si on compte 37 plages de lyse après avoir inoculé 750µL d'une dilution à 10-9, combien y a-t-il d'unités de plages de lyse par mL?
4,93*1010 UFP/ml
111
Pourquoi utilise-t-on une gélose Mueller-Hinton pour tester le potentiel antibiotique d'un micro-organisme?
La gélose Mueller-Hinton est riche en amidon, ce qui neutralise les déchets métaboliques du micro-organisme. Ces déchets pourrait être inhibiteur sur la bactérie créant un effet anti-biotique artificiel ce qui fausserait les résultats.
115
Comment déterminons-nous le potentiel antibiotique d'un micro-organisme avec la méthode Kirby-Bauer?
S'il y a absence de croissance de la bactérie autour de du site d'inoculation du micro-organisme étudié, alors il produit un antibiotique à effet inhibiteur.
116
Quelle gélose est utilisée pour la méthode Kirby-Bauer?
Mueller-Hinton
117
Pourquoi les contrôles positifs sont-il important?
Pour confirmer que les réactifs, produits et techniques utilisés sont adéquats pour répondre à la question expérimentale.
118
Si on utilise les antibiotiques X, Y et Z et on observe deux zones inhibitrices aux même diamètre autour X et Z. Que peut-on conclure par rapport à la résistance relative de la bactérie face à ces antibiotiques?
Fuck all bitch!
Les informations ne sont pas suffisantes pour établir ce genre de conclusion. Il faudrait une charte établissant une relation entre le diamètre d'inhibition et la résistance relative (sensible, intermédiaire ou résistante). (On a fait ça en lab)
119
Quelles sont les limites de l'action des rayons UV sur les bactéries ?
Les limites incluent la distance entre la source de rayonnement et l'objet, le type de microorganisme, la présence d'endospores, le nombre de microorganismes, et les obstacles comme le verre ou l'eau qui peuvent bloquer les UV.
120
Pourquoi la température est-elle un facteur critique pour la croissance bactérienne ?
Les bactéries ne peuvent se multiplier que dans une gamme étroite de températures, ayant chacune une température minimale, optimale et maximale pour la croissance. En dehors de cette gamme, les structures cellulaires peuvent être endommagées.
121
Comment la stérilisation par chaleur humide est-elle réalisée ?
La stérilisation par chaleur humide utilise de la vapeur d'eau à 121°C sous pression (autoclave) pour dénaturer irréversiblement les protéines des bactéries et autres microorganismes, les rendant incapables de se multiplier.
121
Qu'est-ce qu'un endospore et comment affecte-t-il la résistance des bactéries à la chaleur ?
Les endospores sont des structures de survie résistantes à la chaleur produites par certaines bactéries.
122
Quelles sont les alternatives à la stérilisation thermique pour les matières thermolabiles ?
Pour les matières qui ne peuvent pas être stérilisées par la chaleur, des méthodes de stérilisation à froid, telles que la filtration, l'irradiation ou l'utilisation de gaz comme l'oxyde d'éthylène, sont utilisées.
123
Qu'est-ce que la filtration bactériologique et pourquoi est-elle utilisée ?
La filtration bactériologique est une technique utilisée pour stériliser des liquides et des gaz qui ne peuvent pas être chauffés. Elle repose sur l'utilisation de filtres ayant des pores assez petits pour retenir les bactéries.
La porosité des filtres détermine leur capacité à retenir des microorganismes de différentes tailles (souvent de 0,45 µm et de 0,22 µm).
124
Qu'est-ce qu'un filtre HEPA et quel est son usage ?
Un filtre HEPA (High Efficiency Particulate Air) a une porosité de 0,3 µm et est chargé électrostatiquement pour capturer des particules très fines, permettant d'obtenir un air pratiquement stérile.
125
Comment les substances chimiques agissent-elles sur les bactéries ?
Les substances chimiques peuvent être bactériostatiques, inhibant la croissance des bactéries sans les tuer, ou bactéricides, tuant les bactéries.
Leur action dépend du type et de la concentration de l'agent, ainsi que d'autres facteurs comme la température et le temps de contact.
126
Quelle est la différence entre un désinfectant et un antiseptique ?
Les désinfectants sont des substances bactéricides destinées à être utilisées sur des surfaces inanimées et peuvent être plus toxiques que les antiseptiques, qui sont réservés aux surfaces animées comme les tissus humains.
127
Pourquoi le NaCl à haute concentration est-il considéré comme une condition bactériostatique ?
Le NaCl à haute concentration crée un environnement hypertonic, ce qui peut inhiber la croissance des bactéries par osmose, mais sans nécessairement les tuer.
128
Qu'est-ce que la CMI et pourquoi est-elle importante ?
La concentration minimale inhibitrice (CMI) est la plus faible concentration d'un antibiotique nécessaire pour inhiber la croissance d'une bactérie. Elle est importante pour déterminer la quantité d'antibiotique requise pour traiter une infection de manière efficace.
129
Comment fonctionnent les tests de diffusion pour évaluer la sensibilité aux antibiotiques ?
Dans les tests de diffusion comme la méthode Kirby-Bauer (*antibiogramme*), des disques imprégnés d'antibiotiques sont placés sur un milieu de culture inoculé avec la bactérie. La sensibilité est évaluée en mesurant le diamètre des zones d'inhibition autour des disques après incubation.
130
Pourquoi la taille de la molécule antibiotique affecte-t-elle la diffusion dans les tests de sensibilité ?
La taille et la solubilité de l'antibiotique influencent sa capacité à se diffuser à travers la gélose. Les molécules plus grandes ou moins solubles diffuseront moins bien, affectant ainsi le diamètre de la zone d'inhibition observée.
131
Quel est le rôle du milieu Mueller-Hinton dans les tests de sensibilité aux antibiotiques ?
Le milieu Mueller-Hinton est souvent utilisé pour ces tests car il contient de l'amidon qui neutralise les déchets métaboliques bactériens, offrant un environnement standardisé pour évaluer l'activité des antibiotiques.
132
Comment interprète-t-on les résultats des tests de diffusion pour la sensibilité aux antibiotiques ?
Les résultats sont interprétés en comparant les diamètres des zones d'inhibition avec des tables de concordance standardisées qui relient ces diamètres aux catégories de sensibilité des bactéries.
133
Qu'est-ce que la gélose Mueller-Hinton et pourquoi est-elle utilisée dans ces tests ?
La gélose Mueller-Hinton est souvent utilisée dans les tests de sensibilité aux antibiotiques car elle contient de l'amidon qui neutralise les déchets métaboliques des bactéries et favorise une réponse uniforme aux antibiotiques.
134
Quelles sont les caractéristiques des moisissures ?
Les moisissures sont des thallophytes microscopiques sans chlorophylle, capables de se reproduire par voie végétative et en formant des spores appelées conidies. Elles ont un mycélium composé de hyphes et ne nécessitent pas de lumière pour croître.
135
Comment se reproduisent les moisissures ?
Les moisissures peuvent se reproduire de manière asexuée par production de conidies ou de manière sexuée en formant des spores spécifiques.
136
Quelle est la différence entre les moisissures et les levures ?
Les moisissures forment un réseau de filaments appelé mycélium, tandis que les levures sont généralement unicellulaires, formant des colonies ovoïdes et se reproduisant souvent par bourgeonnement ou fission binaire.
137
Comment les moisissures sont-elles utilisées bénéfiquement en pharmacologie et dans l'industrie alimentaire ?
Certaines moisissures sont utilisées pour produire des antibiotiques, convertir des stéroïdes, et dans la maturation de fromages, comme avec Penicillium roqueforti utilisé pour les fromages bleus.
138
Qu'est-ce qu'une conidie et quelle est son importance dans la reproduction des moisissures ?
Une conidie est une spore asexuée produite par les moisissures pour leur reproduction. Lorsqu'elle se dépose dans un environnement favorable, elle germe pour donner un nouveau réseau de mycélium.
139
Qu'est-ce qu'un virus et comment se reproduit-il ?
Un virus est un parasite intracellulaire obligatoire, composé d'acide nucléique (ADN ou ARN) entouré d'une capside protéique. Il ne peut se reproduire qu'en infectant une cellule hôte et en utilisant sa machinerie pour synthétiser de nouveaux virus.
140
Pourquoi les virus ne peuvent-ils pas se multiplier dans des milieux de culture ?
Les virus ont besoin d'une cellule hôte vivante pour la réplication car ils ne possèdent pas la machinerie cellulaire nécessaire à la synthèse de leurs composants.
141
Quelles sont les cellules hôtes dites permissives ?
Les cellules hôtes permissives sont celles qui permettent la réplication virale complète et la production de nouveaux virus infectieux.
142
Quels sont les bactériophages et leur importance ?
Les bactériophages, ou "phages", sont des virus qui infectent les bactéries. Ils sont cruciaux pour les études fondamentales en biologie moléculaire et génie génétique et peuvent affecter les industries en infectant des bactéries utiles, comme dans la production laitière.
143
Comment fonctionne la méthode des plages de lyse pour les bactériophages ?
Cette méthode permet d'observer la lyse des bactéries par les phages dans une culture en milieu liquide ou solide. Lorsque les bactéries sont lysées, des zones claires appelées plages de lyse apparaissent, indiquant la présence de bactériophages.
144
Quelle est la méthode des stries croisées ?
La méthode des stries croisées est une technique utilisée pour évaluer rapidement la sensibilité de différentes souches bactériennes à divers bactériophages, sans nécessiter le titrage complet.
145
Comment la sensibilité des bactéries aux bactériophages est-elle déterminée ?
La sensibilité est déterminée par la présence ou l'absence de lyse dans la culture bactérienne après l'exposition à un phage. La lyse ou non des bactéries par des phages spécifiques peut aider à leur identification ou à la classification des bactéries.
146
Qu'est-ce qu'une culture primaire et en quoi diffère-t-elle d'une culture secondaire ?
Une culture primaire est une culture de cellules prélevées directement de l'organisme et qui n'ont pas été subcultivées. Une culture secondaire, en revanche, provient de la subculture d'une culture primaire.
147
Pourquoi les cellules transformées comme les cellules HeLa sont-elles importantes pour la culture virale ?
Les cellules transformées, comme les cellules HeLa, peuvent se reproduire indéfiniment et sont modifiées pour être permissives à différents virus, ce qui les rend idéales pour des cultures en lignées continues.
148
Qu'est-ce qu'un effet cytopathogène et à quoi sert-il ?
Un effet cytopathogène est un changement visible dans la culture de cellules dû à la multiplication virale, utilisé comme un outil d'identification du type de virus infectant.
149
Comment un anticorps reconnaît-il un antigène ?
Un anticorps reconnaît un antigène comme une clé dans une serrure. La spécificité est due au fait que l'anticorps ne réagira qu'avec l'antigène qui a induit sa formation.
150
Quelle est la base de la détermination des groupes sanguins chez les humains ?
La détermination des groupes sanguins repose sur la présence ou l'absence d'antigènes spécifiques sur les cellules sanguines, et les anticorps présents dans le sérum.
151
Quelle technique peut automatiquement ajuster les concentrations d'antigène et d'anticorps pour observer la réaction ?
Le test de l'anneau ou la technique d'Ouchterlony peut être utilisé pour ajuster automatiquement les concentrations et observer la réaction.
152
Qu'est-ce qui se passe lorsqu'il y a un excès d'antigène ou d'anticorps dans une réaction de précipitation ?
Si il y a un excès d'antigène, on observe une postzone sans réseau de précipitation. Si il y a un excès d'anticorps, on observe une prozone également sans réseau.
153
Pourquoi la quantité de précipité diminue-t-elle lorsque l'on augmente la concentration d'antigène au-delà d'un certain point ?
Cela se produit car les épitopes de l'antigène sont saturés, il n'y a plus d'anticorps libres pour lier les complexes antigènes/anticorps entre eux, empêchant la formation de réseau.
154
Qu'est-ce qu'un antigène particulaire ?
Un antigène particulaire est un antigène attaché à une surface, comme une cellule.
155
Comment l'agglutination est-elle utilisée pour déterminer les groupes sanguins ?
Elle est utilisée pour voir si les anticorps spécifiques provoquent l'agglutination des globules rouges.
155
Pourquoi l'agglutination est-elle une technique sensible ?
Elle est sensible parce que les antigènes particulaires sont grands et moins d'anticorps sont nécessaires pour voir une réaction.
156
Qu'est-ce que le "complément" en immunologie ?
C'est un ensemble d'enzymes qui marquent et aident à éliminer les cellules étrangères.
157
Comment détecte-t-on l'activité du complément ?
Par la lyse des érythrocytes et le changement de couleur du surnageant après centrifugation.
158
Que signifie un titre élevé en termes d'activité biologique ?
Un titre élevé indique une plus grande activité biologique à des dilutions plus fortes.
