Lab microbiología Flashcards
(44 cards)
Diferencias microscópio optico y electrónico
Electrónico:
- Usa fuente de electrones
- Condensadores magnéticos
- Muestras inertes
- Longitud de onda de 0.05 amstrong
- Aumentos de 2000 – 400, 000 X
Microscopio Optico
- Usa fuente de luz
- Lentes
- Muestras vivas o inertes
- Luz visible
- Aumentos de 1000-1500 X
Partes del microscópio
Oculares: Lente por donde se observa el objeto ampliado, usualmente con un aumento de 10x.
Objetivos: Lentes que están en contacto con la luz del objeto, con diferentes aumentos que se cambian mediante el revólver.
Revólver: Pieza giratoria donde se fijan los objetivos, permitiendo cambiarlos fácilmente.
Tubo binocular: Cuerpo principal del microscopio que aloja las lentes oculares y los objetivos, y transmite la imagen ampliada al ocular.
Platina: Superficie horizontal donde se coloca el objeto a observar, con un orificio central para el paso de la luz.
Condensador: Lente que concentra los rayos de luz sobre el objeto, mejorando la iluminación y resolución, con un diafragma para regular la luz.
Fuente de luz: Dispositivo que genera la luz para iluminar el objeto, ya sea eléctrica o natural, con opción de filtro de color.
Base: Parte inferior del microscopio que le da estabilidad y contiene el transformador que regula la intensidad de la luz.
Columna: Soporte vertical que conecta la base con el tubo, y contiene los tornillos de enfoque macrométrico y micrométrico.
Sistema óptico
- Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.
- Objetivo: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.
- Condensador: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
- Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
- Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
Sistema mecánico
- Soporte: Mantiene la parte óptica del microscopio. Está compuesto por dos partes: el pie o base y el brazo.
- Platina: Lugar donde se coloca la preparación a observar.
- Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular o binocular.
- Revólver: Soporta los sistemas de lentes objetivos y permite cambiarlos al girar.
- Tornillos de enfoque: El tornillo macrométrico aproxima el enfoque, y el micrométrico permite lograr un enfoque preciso.
Tipos de colorantes
- Colorantes ácidos: Ionizan en soluciones acuosas produciendo un núcleo colorante con carga negativa (anión). Se combinan con componentes celulares cargados positivamente, como proteínas. Ejemplos: eosina, rojo Congo, fucsina ácida.
- Colorantes básicos: El ion que lleva el color tiene carga positiva y tiene afinidad por el material nuclear y otros componentes celulares. Son los más usados en microbiología porque las bacterias, con muchos ribosomas ricos en ácido ribonucleico, se tiñen fácilmente. Ejemplos: azul de metileno, fucsina básica, cristal violeta, safranina.
Tinción de gram
- Ideada y desarrollada por Christan Gram en el año 1884
- Pasos:
1. Tinción (cristal violeta)
2. Fijación con el mordente (yodo lugol)
3. Decoloración (alcohol acetona)
4. Contratinción (safranina)
Gram positivas
- Tinción morada
- Poseen una gruesa capa de peptidoglucano de 15-80 nm.
- Tienen dos clases de ácidos teicoicos:
- Ácido lipoteicoico: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática.
- Ácido teicoico: Anclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína) y localizado más hacia la superficie.
Gram Negativas
- Se tiñen rojas/ rosas
- La capa de peptidoglucano es delgada, de 10-15 nm.
- Está unida a una segunda membrana plasmática exterior mediante lipoproteínas.
- La membrana exterior está compuesta de proteínas, fosfolípidos y lipopolisacáridos, y se une a la capa de peptidoglucano a través de lipoproteínas.
Tinción de gram positivas y negativas
- Cristal violeta:
Gram (+): Se tiñen
Gram (-): Se tiñen - Yodo lugol:
Gram (+): CV-IL
Gram (-): CV-IL - Alcohol acetona:
Gram (+): Deshidratan
Gram (-): Extraen grasas - Safranina:
Gram (+): No se tiñen
Gram (-): Se tiñen
Por que las gram positivas se tiñen de azul/violeta
– Resistencia a la decoloración
- Capa de peptidoglucano gruesa
- Compuesto CV-1 demasiado grande para escapar
Por que las gram negativas se tiñen de rojo/ rosa
- Membrana soluble, solventes orgánicos, lipopolisacáridos
- Capas peptidoglicano fina
- Retiene safranina
Agrupaciones
- Cocos:
- Cocos individuales: No están agrupados.
- Dímeros: Dos cocos juntos (estreptococos).- Cadenas: Agrupaciones en cadena (estreptococos).
- Racimos: Agrupaciones en forma de racimo (estafilococos).
- Cocos individuales: No están agrupados.
- Coco bacilo
- Bacilo:
- Bacilos
- Cadenas: Bacilos dispuestos en cadena (estreptobacilos). - Espirilos: Bacterias con forma de espiral o hélice.
- Vibriones: Bacterias con forma de coma, es decir, curvadas en forma de “S”.
Cápsula Bacteriana
- Compuesta de polisacáridos.
- Es una capa gruesa, pegajosa y mucilaginosa.
- Presente en las bacterias piógenas.
- Actúa como sustancia de reserva.
- Le confiere resistencia contra la fagocitosis.
- No se tiñe.
Espora
- Son endoesporas.
- Contienen ácido dipicolínico y calcio.
- No tienen función de reproducción.
- Son estructuras de resistencia que se desarrollan en condiciones ambientales adversas.
- Las bacterias capaces de esporular pueden crecer y reproducirse en forma de células vegetativas durante muchas generaciones.
Germinación de la Espora
Es el proceso por el cual la célula vuelve a su estado inicial.
Fases del proceso:
1. Pre-activación
2. Activación
3. Iniciación (o germinación en sentido estricto)
4. Crecimiento ulterior (entrada en fase vegetativa)
Tinción simple
1 solo colorante
Forma agrupación
Compuestas diferenciales
- Tinción de gram
- Tinción de Shafeer Fulton
- Tinción de Zihel - Neelsen
- Tinción Negativa
Tinción de gram
Gram positivas y negativas
Tinción de Shafeer Fulton
Esporas
Tinción de Zihel - Neelsen
Ácido alcohol resistentes
Tinción negativa
Cápsula
Exoenzimas
- Son enzimas secretadas al exterior por las bacterias para degradar moléculas grandes en moléculas más pequeñas.
- En las bacterias Gram negativas, se localizan en el espacio periplásmico, mientras que en las Gram positivas están ancladas en la membrana citoplasmática.
Medios de cultivo
- Peptonas: Mezclas complejas de compuestos orgánicos nitrogenados obtenidos por digestión enzimática de proteínas animales y vegetales.
- Extractos de carne: Provenientes de levadura, malta, órganos o tejidos animales pulverizados.
- Agar: Hidrato de carbono complejo obtenido de algas marinas, usado como agente de gelatinización y soporte, además de ser fuente de carbono, nitrógeno, iones, agua y vitaminas.
- Fluidos corporales: Incluyen plasma, suero y sangre completa desfibrinada.
- Sistemas amortiguadores de pH: Indicadores ácido-base para mantener el pH adecuado.
Coagulasa
Permite determinar la capacidad de coagular el plasma por la acción de la enzima coagulasa.
Se utiliza para diferenciar S. aureus (coagulasa positivo) de otras especies de Staphylococcus.
